国家自然科学基金(30872695)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：马兵刘洋张红张克汪静更多>>
- 相关机构：成都医学院成都医学院第一附属医院第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耳垂瘢痕疙瘩分泌型卷曲相关蛋白2的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨分泌的卷曲相关蛋白2（SFRP2）在耳垂瘢痕疙瘩发生发展过程中的表达及作用，为瘢痕疙瘩的基因治疗提供新的线索。方法利用原位杂交和WesternBlot检测伤后3、6、12、24个月耳垂瘢痕疙瘩组织边缘区和中央区SFRP2的表达变化。结果在耳垂瘢痕疙瘩组织中，边缘区伤后12个月组SFRP2的表达显著高于3、6个月组（P〈0．01），而24与12个月组比较，差异无统计学意义。中央区伤后12个月SFRP2的表达出现下降（P〈0．01）；边缘区SFRP2的表达均高于同一时期中央区的表达（P〈0．05，P〈0．01）。瘢痕疙瘩表皮和血管内皮及周围组织SFRP2的表达也增强。SFRP2mRNA和蛋白质的变化相似，只是中央区SFRP2蛋白质的衰减较SFRP2mRNA延后。结论SFRP2的高表达可能参予了瘢痕疙瘩的生长发展，而且瘢痕疙瘩表皮及边缘区SFRP2的高表达对其浸润性、持续性生长作用强于中央区。血管内皮细胞及周围组织SFRP2的高表达也发挥了作用。降低SFRP2的表达可能是基因治疗瘢痕疙瘩的新途径。
- 孙志成曹川王珍祥毋巨龙马兵李世荣
- 关键词：瘢痕疙瘩基因表达
- 术中剩余皮肤组织匀浆在网状皮移植中的应用被引量：2
- 2010年
- 烧伤临床上进行皮肤移植手术时，因为术者对创面大小估计的误差、取皮质量、移植过程中皮片裁剪等因素，创面被充分覆盖后常有剩余供皮。为了充分利用这部分皮肤，我们将其制作为混悬匀浆，与网状皮肤混合移植于创面，观察其疗效。
- 马兵许雪峰张萍彭杨刘月明李晨阳文科张红张玮刘漪沦杨书
- 关键词：组织匀浆皮移植创面
- 增生性瘢痕成纤维细胞中羟基丙酮酸异构酶同系物结合结构域分析被引量：2
- 2012年
- 目的 了解增生性瘢痕Fb中羟基丙酮酸异构酶同系物（HYI）与P311蛋白相互作用的结合区域. 方法（1）以克隆有P311的pMD18-T质粒为模板,对P311进行PCR扩增；Trizol法提取人增生性瘢痕Fb的总RNA,对HYI进行RT-PCR扩增,采用双酶切法分别构建pGA DT7-P311和pGBKT7-HYI重组载体,PCR及测序验证.采用Prot Seale软件和HNN软件对HYI蛋白进行二级结构分析,据此结果扩增HYI-1（1 ～447 bp）、HYI-2（247 ～447 bp）、HYI-3（1 ～279 bp）、HYI-4（247 ～654 bp）片段,双酶切法构建pGBKT7-HYI-1、2、3、4重组载体,经PCR及测序验证.（2）采用醋酸锂法将酵母细胞AH109制备成感受态细胞,粗略等量分为HYI全长与HYI-1、2、3、4杂交组,以及阳性对照组和阴性对照组.采用聚乙二醇-醋酸锂法,前5组分别同时转化pGBKT7-HyI全长、各片段的重组载体与pGADT7-P311重组载体,后2组分别同时转化pGBKT7-53与pGADT7-RecT重组载体、pGBKT7-Lam与pGADT7-RecT重组载体.转化后即刻,取各组部分细胞分别涂布在缺乏亮氨酸、色氨酸、腺嘌呤及组氨酸的培养基（简称四缺培养基）上,另取各组部分细胞分别涂布在缺乏亮氨酸和色氨酸的培养基（简称二缺培养基）上,培养3～6d,观察菌株生长情况,5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷显色反应检测菌落β半乳糖苷酶表达. 结果（1）克隆出的P311片段与Genbank中P311（序号hsu36189）序列一致.与Genbank中HYI（序号AY775560）序列对比,HYI基因扩增片段在496 bp处的A替换为了G.经验证各重组载体插入片段无误.（2）计算机模拟结果显示,组成HYI蛋白的216个氨基酸中,可能形成α螺旋的氨基酸有101个,可能形成无规则卷曲的氨基酸有90个,可能形成延伸链的氨基酸有25个.（3）HYI-1、2、3、4克隆片段大小与预期相符,经验证各重组载体插入片段无误.（4）除阴性对照组菌株未见在四缺培养基上生长外,其他组菌株均在2种培养基上生长,�
- 汪静刘洋张克马兵赵云
- 关键词：瘢痕成纤维细胞双杂交系统技术
