北京市自然科学基金(5062025)
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
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- JNK/SAPK信号转导通路在镉引起的Hormesis中的作用被引量：4
- 2007年
- 目的研究重金属镉对Hek293细胞的低剂量兴奋效应及JNK/SAPK信号转导通路在其中所起的作用。方法以0,1.0,3.0,9.0,27.0μmol/L浓度的氯化镉(CdCl2)染毒Hek293细胞24和36 h;在研究JNK/SAPK信号转导通路特异性抑制剂作用时,在染毒前先用SP600125预处理1 h。用MTT法测定细胞的增殖。用Western Blot方法检测磷酸化JNK/SAPK蛋白水平的变化。结果1.0μmol/L剂量的CdCl2染毒Hek293细胞24和36 h,其增殖率与对照组相比分别升高了9.96%和33.3%,差异均具有统计学意义,加入SP600125后,与对照组相比增殖率没有明显的升高;而在3.0μmol/L剂量以上染毒浓度时,增殖率随剂量增加而降低。1.0,3.0μmol/L剂量CdCl2作用于Hek293细胞对磷酸化JNK蛋白无明显影响,高于3.0μmol/L剂量时可以使JNK蛋白持续磷酸化激活至少12 h。当加入SP600125后,以上变化趋势不受影响。结论低剂量CdCl2作用于Hek293细胞可以引起Hormesis效应,该效应可以被JNK/SAPK信号转导通路特异性抑制剂SP600125阻断。JNK/SAPK信号转导通路对Hormesis效应的影响可能主要是JNK蛋白下游转录因子的作用。
- 骆颖慧魏雪涛尚兰琴乔杨峥郝长付郝卫东
- 关键词：镉HORMESISHEK293细胞增殖
- MAPK信号转导通路在CdCl_2、HgCl_2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨MAPK信号转导通路在CdCl2、HgCl2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应过程中的作用。方法以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50和500μmol/L浓度的氯化镉(CdCl2)和氯化汞(HgCl2)分别染毒RAW264.7细胞12和24 h;在研究MAPK信号转导通路特异性抑制剂作用时,在染毒前分别用ERK1/2抑制剂PD98059(100μmol/L)、U0126(25μmol/L)、JNK特异性抑制剂SP600125(25μmol/L)和P38特异性抑制剂SB203580(25μmol/L)对细胞进行预处理。采用WST-8法测定细胞增殖情况,采用Annexin-V/PI双染流式细胞仪测定细胞凋亡,采用western blot检测MAPK磷酸化蛋白表达水平。结果 CdCl2、HgCl2作用于RAW264.7细胞后,CdCl2、HgCl2浓度为0.5μmol/L(12 h)、0.05μmol/L(24 h)时可引起细胞增殖增加(P<0.05),浓度为50、500μmol/L时可引起细胞增殖减少(P<0.05);应用ERK通路抑制剂和JNK通路抑制剂对细胞进行预处理后,未观察到细胞增殖增加。应用P38通路抑制剂对细胞进行预处理后,CdCl2、HgCl2浓度为0.5μmol/L(12h)、0.05μmol/L(24 h)时仍可引起细胞增殖增加(P<0.05)。CdCl2、HgCl2作用于RAW264.7细胞3和6 h后,CdCl2、HgCl2浓度为0.5μmol/L时可引起p-JNK蛋白表达降低(P<0.05),浓度为50μmol/L时可引起p-JNK、p-P38蛋白表达增加(P<0.05);p-ERK蛋白表达无变化(P>0.05)。结论低剂量CdCl2和HgCl2作用于RAW264.7细胞可以引起Hormesis效应,该效应可以被JNK、ERK信号转导通路特异性抑制剂阻断。JNK、ERK信号转导通路在CdCl2、HgCl2诱导RAW264.7细胞低剂量兴奋效应中可能发挥重要作用。
- 郝长付郝卫东
- 关键词：CDCL2RAW264.7细胞MAPK信号转导通路
- ERK信号转导通路在CdCl_2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨ERK信号转导通路在CdCl2诱导HEK293细胞低剂量兴奋效应过程中的作用。方法以0、0.0005、0.005、0.05、0.5、5、50和500μmol/L浓度的氯化镉(CdCl2)分别染毒HEK293细胞12h和24h;在染毒前分别用ERK1/2抑制剂PD98059(100μmol/L)、U0126(25μmol/L)和c-raf shRNA对细胞进行预处理。采用MTT、WST-8法测定细胞增殖情况,采用western blot检测ERK、c-raf磷酸化蛋白表达水平,采用RT-PCR检测c-fos、c-myc、c-raf基因表达水平。结果 CdCl2作用于HEK293细胞后,CdCl2浓度为0.5(12h)、0.05μmol/L(24h)时可引起细胞增殖明显增加(P<0.05),浓度为50、500μmol/L时可引起细胞增殖明显减少(P<0.05);应用ERK通路抑制剂和c-raf shRNA对细胞进行预处理后,未观察到细胞增殖明显增加。CdCl2作用于HEK293细胞3h、6h、12h后,c-fos基因转录水平在CdCl2浓度为0.5μmol/L时明显增高(P<0.05),c-myc基因转录水平随CdCl2浓度的升高而增高,浓度为5、50μmol/L时增高明显(P<0.05),p-ERK蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论 0.5(12h)和0.05μmol/L(24h)CdCl2作用于HEK293细胞可以引起Hormesis效应,ERK信号转导通路中c-fos基因的表达变化在此过程中可能发挥重要作用。
- 郝长付郝卫东
- 关键词：氯化镉HEK293细胞ERK信号转导通路RNAI
- 硝酸镧对小鼠学习记忆低剂量兴奋效应及其机制研究被引量：7
- 2007年
- [目的]观察硝酸镧对小鼠学习记忆的低剂量兴奋效应及其与cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和Jun-氨基末端激酶(JNK)蛋白磷酸化水平的关系。[方法]以0.002、0.02、0.2、2、20 mg/kg硝酸镧染毒ICR小鼠4周,每天测定小鼠水迷宫的反应时间和错误次数;试验结束时,取小鼠大脑分离海马和皮质,采用western blot测定p-CREB和p-JNK的含量。[结果]小鼠水迷宫的反应时间在染毒第4周时随着剂量的升高,呈现逐渐缩短,然后又逐渐延长的趋势,0.2 mg/kg组的反应时间最短;而错误次数则出现相反的趋势,2 mg/kg组的错误次数最少。硝酸镧经口染毒小鼠4周,0.2 mg/kg剂量组小鼠海马的CREB(6.20±3.2)和JNK(4.11±2.92)磷酸化水平升高,与溶剂对照组相比,差异有显著性。硝酸镧染毒各剂量组小鼠的皮质CREB和JNK磷酸化与对照组相比差异无显著性。[结论]硝酸镧经口染毒引起小鼠海马CREB和JNK蛋白的磷酸化水平升高,这与小鼠的学习记忆能力的变化的趋势一致,提示低剂量硝酸镧可能通过引起学习相关蛋白磷酸化水平的升高而对小鼠的空间学习记忆产生促进作用。
- 蒋建军尚兰琴杨晓华骆颖慧赵燕董辛欣郝卫东
- 关键词：硝酸镧学习记忆P-CREBP-JNK
