国家自然科学基金(30772142)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- 微环境预处理的骨髓间充质干细胞治疗大鼠心肌梗死被引量：2
- 2009年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）或经预处理分化的BMSC（induced BMSC，iBMSC）移植能否改善心肌梗死大鼠的心功能。方法雄性sD大鼠32只（250—300g），分为假手术组、磷酸缓冲液（PBS）注射组、BMSC移植组和iBMSC移植组共4组，每组8只。将分离的BMSC与心肌细胞（微环境）共培养2周进行预分化，大鼠心肌梗死模型建立1周后，将BMSC或iBMSC细胞悬液注入梗死区的边缘位置。分别于细胞移植后的第1、2和4周，超声心动图检测各组大鼠心脏的左心室射血分数（LVEF），左心室舒张末期内径（LVIDd），左心室收缩末期内径（LVIDs）及短轴缩短率（FS）。移植后第4周进行组织学观察，心脏组织石蜡包埋切片后采用免疫荧光技术检测移植细胞的示踪标记物及心肌标志蛋白的表达情况。结果iBMSC组LVEF在第4周时是（77．3±2．6）％，与假手术组（81．8±3．6）％比较差异无统计学意义（P〉0．05），而PBS组及BMSC组的LVEF值均低于假手术组（P均〈0．05）。PBS组FS移植前后没明显变化，iBMSC组FS从移植前的（24．1±3．9）％上升到第4周的（45．1±3．1）％。M型超声心电图显示iBMSC治疗组左心室收缩能力较细胞移植前明显改善。免疫荧光分析显示，SPIO标记的移植细胞在体内表达心肌细胞标志蛋白α-辅肌动蛋白和缝隙连接蛋白43。结论经过微环境预处理的BMSC较未处理的干细胞改善心功能效果更好。这一研究为干细胞的改造与细胞移植修复心肌梗死提供了强有力的证据。
- 李晓红符永恒刘再毅张光峰董光富林秋雄余细勇
- 关键词：心肌梗死间质干细胞移植细胞分化
- BMSCs作为心肌组织工程种子细胞的分子药理学研究
- 目的探讨体外诱导 BMSCs 分化为心肌细胞的潜能,创新性模拟心肌细胞的微环境, 研究在与心肌细胞非直接接触的环境下 BMSCs 向心肌细胞表型分化的能力,并对其分化机制的进行初步探讨,为心肌细胞组织工程提供实验依据。方...
- 余细勇
- 关键词：BMSCS心肌细胞
- 文献传递
- Glucose通过SRF调控心肌细胞H9C2中microRNA-1(miR-1)的表达
- 目的:微小RNA(miRNA)可以在转录后水平抑制目的基因的表达,参与多种生物学和病理生理学过程。糖尿病患者血中高浓度的葡萄糖(Glucose)能引发心血管系统损伤,在此过程中,心肌细胞中miRNA表达谱和表达水平发生改...
- 单志新林秋雄杨敏邓春玉朱杰宁麦丽萍陈红梅邝素娟符永恒林曙光余细勇
- 文献传递
- 骨髓干细胞向心肌细胞分化的基因芯片分析被引量：1
- 2011年
- 目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)在特殊微环境下向心肌细胞分化的过程中基因表达的差异变化。方法:用密度梯度离心法培养BMSCs,原代培养乳鼠心室肌细胞,与BMSCs一起用半透膜共培养。共培养后2周提取细胞总RNA,进行22KHumanGenomeArray芯片检测。用RT-PCR检测心肌分化相关的基因的时序表达。结果:基因芯片检测BMSCs诱导前后差异基因的表达水平,发现诱导2周后表达明显升高(ratio>5)的基因有572个,表达下调(ratio<0.2)的基因有336个。基因的时序性表达发现HOP,Nkx2.5和GATA4基因在诱导前几乎没有检测到阳性表达,诱导后0.5周表达增强,1～2周表达达到高峰,维持一定水平后到4～8周表达呈下降趋势。心肌特异性基因β-MHC和ANF在0.5周开始出现,表达随时间逐渐增加,2周达到高峰。结论:分化诱导相关基因如IGF、FGF等的表达与心肌发育分化相关,GATA4和Nkx2.5等转录因子在微环境诱导心肌分化过程中起重要作用。然而心肌的分化实际上极为复杂,转录因子间相互作用的机制尚需进一步探讨。
- 李晓红林秋雄邓春玉符永恒单志新朱杰宁杨敏余细勇
- 关键词：间质干细胞心肌细胞细胞分化基因芯片
- 高葡萄糖培养增加H9C2成心肌细胞G蛋白偶联受体激酶2基因表达被引量：1
- 2010年
- 目的前期临床研究发现2型糖尿病患者淋巴细胞G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)基因表达升高,为进一步探讨GRK2表达升高的分子机制,检测高糖对GRK2基因表达的影响。方法H9C2成心肌细胞随机分成5组分别加入以下培养液:空白对照组和不同葡萄糖梯度浓度组(0,5.5,12.5,25,33mmol/L),培养72h后采用RT-PCR,WESTERN BLOTTING分别测定GRK2-mRNA和磷酸化Akt(Ser473)蛋白含量比值。结果随着葡萄糖浓度升高,H9C2成心肌细胞的GRK2-mRNA表达水平呈剂量依赖性增加,pearson相关分析提示提示两者间存在直线相关(R=0.683,P<0.001),采用Student Newman-Keuls'q检验,各葡萄糖培养组与无糖培养比较均存在统计学差异(P=0.028,P=0.009,P<0.001)。而磷酸化Akt(Ser473)蛋白表达水平减少,各组间比较存在统计学意义(F=369.1,P<0.001),回归分析和pearson相关分析提示葡萄糖浓度与磷酸化AKt(Ser473)蛋白的表达呈线性负相关(R=-0.913,P<0.001)。结论高糖培养使GRK2表达升高,可能是参与心肌细胞葡萄糖利用受损的重要机制之一。
- 陈红梅林秋雄谭虹虹杨华章余细勇
- 关键词：葡萄糖成心肌细胞糖尿病
- Notch信号转导通路分子在MSC诱导分化为心肌细胞过程中的表达变化
- 目的了解 Notch 信号转导通路在 MSC 诱导分化为心肌细胞过程中可能的作用。检测诱导 MSC 分化为心肌细胞前后不同时间 Notch 信号转导通路分子的表达水平。方法利用乳鼠心肌细胞非接触共培养法诱导 MSCs 向...
- 单志新林秋雄李晓红邓春玉杨敏林曙光余细勇
- 关键词：心肌细胞MSC
- 文献传递
- 微环境中人骨髓间充质干细胞向心肌细胞表型分化的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMSC）在非接触共培养的微环境中向心肌细胞分化的能力。方法密度梯度离心法分离培养hBMSC，用流式细胞仪鉴别其表面标记特征。采用transwell按1：10的比例共同培养hBMSC和SD乳鼠心室肌细胞。用聚合酶链反应检测心肌转录因子GATA4的基因表达水平。免疫细胞化学、免疫荧光检测横纹肌仅一辅肌动蛋白、结蛋白、肌钙蛋白（cTn）T和cTnI等心肌细胞标志蛋白的表达。结果hBMSC的标志物主要为CD29（98．64％±0．80％）和CD44（96．70％±1．50％），而极少表达CD105（2．21％±0．600k）、CD11b（0．80％±0．05％）、CD45（1．39％±0．13％）和CD34（1．73％±0．08％）。与心肌细胞共培养后第7天可在hBMSC细胞中观察到少量搏动的细胞，随着诱导时间的增加，细胞的搏动更规则、有力。与心肌发育有关的转录因子GATA4基因在诱导后1、2、3周均有表达。共培养后2周，检测的心肌标志蛋白均有阳性表达，分别是结蛋白，仅一辅肌动蛋白，cTnI和cTnT。荧光标记也检测到cTnT和cTnI的阳性表达。结论hBMSC具有向心肌细胞分化的潜能，在共培养的微环境中，可以分化成心肌细胞表型，其机制是通过心肌细胞的旁分泌作用，而不需要hBMSC与心肌细胞的直接接触。
- 李晓红余细勇林秋雄单志新张光峰张晓邓春玉符永恒邝素娟黄薇杨敏林曙光
- 关键词：肌细胞间质干细胞细胞分化微环境
- De novo differentiation of mesenchymal stem cell and myocardial cell transplantation
- ＜正＞Mature cardiac cells are terminal differentiation cells,lack of renewable capacity.How to increase the numb...
- YU Xi-Yong Research Center of Medical Sciences
- 关键词：DIFFERENTIATION
- 文献传递
- 腺病毒表达载体对MSC诱导分化能力的影响
- 目的了解腺病毒载体对 MSC 分化能力的影响,拟检测 MSC 感染腺病毒载体前和感染后不同时间保持分化的能力。方法利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒感染传至3代的人 MSCs,分别在感染后2,4,8和16 d 收...
- 林秋雄单志新李晓红邓春玉黄薇刘晓颖杨敏余细勇
- 关键词：腺病毒MSC
- 文献传递
- 干细胞心肌细胞分化的表观遗传学调控与心肌细胞移植术研究
- 心脏发育是一个非常复杂的过程,众多的基因、转录因子、蛋白质、酶和生长因子在不同层面、不同时间上调控着心肌细胞分化乃至整个心脏的发育过程。了解心肌分化整个过程的每一阶段特征性基因的调控、蛋白表达的变化,对我们诱导成体干细胞...
- 余细勇
- 文献传递
