教育部留学回国人员科研启动基金(0832008)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：覃蒙斌钟月圆黄杰安姜海行唐国都更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
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- siRNA下调鞘氨醇激酶-1对结肠癌LOVO细胞凋亡和侵袭的影响及其机制的研究被引量：1
- 2011年
- 目的研究siRNA下调鞘氨醇激酶-1(Sphk1)的表达对结肠癌LOVO细胞增殖、凋亡、侵袭以及ERK和p38通路的影响。方法采用siRNA抑制Sphk1的表达;采用MTT法测定细胞的增殖,流式细胞术分析细胞的凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭力的变化,Western杂交检测蛋白的表达;采用RT-PCR法检测细胞Sphk1 mRNA表达,ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)的分泌。结果 Sphk1 siRNA显著抑制Sphk1 mRNA和蛋白表达,并可诱导细胞的凋亡,抑制细胞的增殖和侵袭。抑制Sphk1的表达可降低ERK和磷酸化ERK蛋白的表达,并促进p38和磷酸化p38蛋白的表达,同时可抑制细胞MMP-2、MMP-9和uPA的分泌。结论抑制Sphk1可能是通过抑制ERK并激活p38 MAPK通路,下调MMP-2、MMP-9和uPA的分泌,从而抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭并促进细胞的凋亡。
- 刘诗权钟月圆黄杰安覃蒙斌唐国都姜海行
- 关键词：结肠肿瘤鞘氨醇激酶-1细胞凋亡肿瘤侵润
- 鞘氨醇激酶1调控p38和c—Jun氨基末端激酶通路影响结肠癌HT-29细胞的凋亡迁移与侵袭被引量：6
- 2011年
- 目的探讨鞘氨醇激酶1（SphK1）对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐（PMA）和N，N-二甲基鞘氨醇（DMS）诱导和抑制人结肠癌HT-29细胞SphK1的活化和表达，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞增殖，流式细胞术分析细胞凋亡，γ-^32P—ATP掺入法检测SphK1的活性，Western blot检测蛋白的表达，Transwell小室模型观察细胞迁移和侵袭能力的变化。结果PMA和DMS能分别诱导和抑制SphK1活性和表达，在24h内呈一定的时间依赖性。PMA能抑制细胞的凋亡，100nmol／LPMA作用0、6、12、24h后，细胞凋亡率分别为（9．35±0．84）％、（7．61±0．48）％、（5．53±0．76）％和（0．56±0．33）％。DMS能显著抑制细胞的增殖，诱导细胞的凋亡，50μmol／LDMS作用0、6、12、24h后，细胞凋亡率分别为（9．18±0．94）％、（12．06±1．41）％、（19．80±2．36）％和（31．85±3．60）％。对照组、PMA组和DMS组的迁移细胞数分别为68．75±6．15、109．33±11．63和10．83±2．48，侵袭细胞数分别为55．42±4．50、90．58±7．06和9．58±2．39，与对照组比较，PMA组迁移和侵袭细胞数明显增多，而DMS组则显著减少。对照组、PMA组和DMS组的p38表达强度分别为0．20±0．03、0．08±0．02和0．31±0．03，磷酸化p38（p-p38）表达强度分别为0．19±0．02、0．09±0．02和0．38±0．05，应激活化蛋白激酶／c-Jun氨基末端激酶（SAPK／JNK）的表达强度分别为0．26±0．03、0．12±0．03和0．43±0．06，PMA显著抑制p38、p-p38和SAPK／JNK蛋白的表达，而DMS则促进p38、p-p38和SAPK／JNK蛋白的表达。结论SphK1可促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并抑制细胞的凋亡，其机制可能是通过抑制p38和SAPK／JNK通路而发挥作用。
- 刘诗权覃蒙斌黄杰安钟月圆唐国都姜海行
- 关键词：结肠肿瘤鞘氨醇激酶-1迁移
- 鞘氨醇激酶-1调控ERK和NF-κB通路促进HT-29细胞的增殖和侵袭被引量：3
- 2011年
- 目的探讨鞘氨醇激酶-1(Sphk1)对结肠癌HT-29细胞的增殖、凋亡和侵袭转移的影响及其作用机制。方法采用(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐(PMA)诱导人结肠癌HT-29细胞Sphk1的活化和表达,N,N-二甲基鞘氨醇(DMS)抑制Sphk1的活化和表达;采用MTT法测定细胞的增殖,流式细胞术分析细胞的凋亡,γ-32P-ATP掺入法检测Sphk1的活性,Western杂交检测蛋白的表达,Transwell小室模型观察细胞迁移和侵袭能力的变化,ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)的分泌。结果 PMA和DMS能分别有效地诱导和抑制HT-29细胞Sphk1活性和蛋白的表达;同时,PMA能促进细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞的凋亡;DMS则抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞的凋亡。诱导Sphk1的活化以及表达可促进细胞ERK、p-ERK和NF-κBp65的蛋白表达以及MMP-2、MMP-9和uPA的分泌,而抑制Sphk1则抑制ERK、p-ERK和NF-κBp65的蛋白表达以及MMP-2、MMP-9和uPA的分泌。结论 Sphk1可能是通过激活ERK和NF-κB通路,上调MMP-2、MMP-9和uPA的分泌,从而促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞的凋亡。
- 刘诗权覃蒙斌钟月圆黄杰安唐国都姜海行
- 关键词：鞘氨醇激酶-1结肠癌细胞凋亡
