上海市自然科学基金(11ZR1405200)
- 作品数：3 被引量：26H指数：2
- 相关作者：夏荣张琦王苑张艳霞曹曰针更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- SOCS1基因调控未成熟DC及其预防小鼠移植物抗宿主病的功能研究被引量：3
- 2015年
- 目的构建慢病毒干扰的树突状细胞(DC)用于预防移植物抗宿主病(GVHD)。方法通过慢病毒转染小鼠骨髓来源DC,构建过表达细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)基因的DC(DC-SOCS1)。用荧光实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot方法检测慢病毒转染后的细胞SOCS1在基因和蛋白水平的表达量变化。通过脂多糖(LPS)刺激后,以流式细胞仪检测DC-SOCS1是否依然保持未成熟DC(i DC)的特性。将C57BL/6小鼠分为4组(n≥5),DC-GFP组:输注DC-GFP+异基因小鼠骨髓细胞和脾细胞;DC-SOCS1组:输注DC-SOCS1+异基因小鼠骨髓细胞和脾细胞;i DC组:输注i DC+异基因小鼠骨髓细胞和脾细胞;磷酸盐缓冲液(PBS)组:输注PBS+异基因小鼠骨髓细胞和脾细胞。输注的异基因骨髓细胞量为1×107/只,脾细胞量为2×107/只,DC-SOCS1和DC-GFP的输注量为2×106/只。通过眼静脉将指定细胞输入各组实验小鼠体内,观察小鼠体重、外周血和靶器官组织的病理学变化。以微量标本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测各组Th1细胞因子的分泌水平。结果 1)RT-PCR和Western blot均证实转染后DC-SOCS1细胞内SOCS1表达量明显提高,2)流式检测LPS刺激前后DC-GFP组、DC-SOCS1组和i DC组胞表面共刺激分子表达量,CD80:LPS刺激前为25.34%、23.74%、29.16%,LPS刺激后为67.92%、52.17%、82.42%;CD86:LPS刺激前为46.61%、44.77%、46.18%,LPS刺激后为:80.47%、57.11%、74.10%;MHC-Ⅱ:LPS刺激前27.61%、23.67%、22.86%,LPS刺激后为:90.33%、48.57%、94.58%。3)移植后21 d各组小鼠血细胞恢复情况,WBC(×109/L):2.18±0.32、3.37±0.37、1.12±0.05、1.48±0.20;Plt:330.83±53.04、563.25±71.76、153.27±16.97、101.00±6.01;Hb(g/L):103.83±8.24、128.00±6.19、88.14±7.45、99.75±8.16(P<0.05)。4)与DCSOCS1组小鼠相比,其他各组均有不同程度靶组织损伤表现:小肠绒毛断裂坏死,粘膜下层及肌层水肿;肺组织水肿,肺泡腔破坏以及炎性渗出;肝汇管区结构破坏,炎性细胞浸润,肝组织结�
- 王苑张琦张艳霞张敬军夏荣
- 关键词：移植物抗宿主病
- 靶向RNA干扰TIM4表达对T细胞的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建靶向RNA干扰T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4(TIM4)基因的慢病毒重组表达载体,分析TIM4基因对T细胞的影响。方法根据Gene Bank报道的TIM4 mRNA序列(NM_178759.4)设计干扰片段,通过基因工程方法构建靶向RNA干扰TIM4基因的慢病毒载体,体外转染DCs后与T淋巴细胞共培养,检测细胞增殖情况及细胞因子分泌水平。结果成功构建基因干扰的慢病毒载体并转染DCs。MTT实验表明TIM4-DC组T细胞的增殖受到抑制;ELISA检测显示:TIM4-DC组IL-12和IFN-γ的分泌均明显高于对照组(P<0.05)。结论 RNA干扰TIM4基因在DCs表达后,可抑制T细胞增殖的作用以及T细胞向Th2细胞分化。
- 张琦张艳霞方勇杨李辉夏荣
- 关键词：RNA干扰树突状细胞TH细胞
- 影响患者血小板输注效果的原因分析被引量：22
- 2014年
- 目的探讨患者血小板输注效果的影响因素。方法对256名血小板减少患者输注机采血小板,输血前采用固相凝集法筛查血小板抗体,对抗体阳性者做血小板（HLA和HPA）抗体确认。以1和24 h血小板回收率（PPR）和血小板计数增高指数（CCI）判断血小板输注效果,并分析其中98例血小板输注效果不理想病例的原因,以找出血小板输注无效（PTR）的影响因素。结果本组血小板输注患者中的PTR率为38.3%（98/256）,其中男性为32.2%（39/121）、女性为43.7%（59/135）[有妊娠史者占59.3%（35/59）],超重者（25≤BMI≤29.9）为42.9%（33/77）,血小板输注次数≥3次者为53.8%（35/65）;41～70岁者占本组PTR比例的58.2%（57/98）,有抗体产生的血小板输注无效者占27.6%（27/98）,发生PTR而血小板抗体检测阴性者占71.4%（71/98）[其中存在感染者占35.2%（25/71）、发热者为33.8%（24/71）]。结论血小板同种抗体是引起PTR的重要免疫因素,而非免疫性因素造成的PTR占比更大,尤以感染和发热居多;PTR率随患者年龄、体重及输注次数增加而升高;女性患者,尤其有妊娠史者PTR率较高。
- 曹曰针张琦王苑乌宇波夏荣
- 关键词：血小板输注无效血小板抗体女性患者
