吉林省科技发展计划基金(20060546)
- 作品数：7 被引量：61H指数：5
- 相关作者：赵寿经钱延春徐立新侯春喜贾冬梅更多>>
- 相关机构：吉林大学黑龙江广播电视大学吉林农业大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省中医药管理局资助课题博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 人参皂苷合成相关β AS基因的克隆及其反义植物表达载体的建立被引量：13
- 2008年
- 以发根农杆菌A4菌株诱导的人参发根为材料,用改良的异硫氰酸胍法提取总RNA,得到了纯度好的完整的总RNA。利用RT-PCR扩增了β香树素合成酶基因,测序结果表明该目的片段与GenBank上的β香树素合成酶基因序列一致。这一基因重组入克隆载体pMD-119T,并转化大肠杆菌。在此基础上,利用pBI121质粒载体,构建了人参β香树素合成酶基因的反义植物表达载体,为这一基因的反义调控研究打下基础。
- 赵寿经侯春喜梁彦龙薛健王建华
- 关键词：人参
- 人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：7
- 2007年
- 用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）反应合成了交联抗原GRb1-BSA（GRb1与BSA的结合比为10：1）和GRb1—OVA（GRb1与OVA的结合比为8：1）。以GRb1—BSA为免疫原，分5次免疫3只BAuyC小鼠，取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，Hat筛选，有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA（酶联免疫吸附测定）间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1：16000，并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系，分别命名为1F7和1G3，单抗检测显示在0．01～1μg／mL呈线性关系，GRb1的检测范围达50～350ng／mL，两株单抗针对相同的抗原决定簇，制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。
- 赵寿经侯春喜钱延春徐立新孙莉丽
- 关键词：生物化学工程单克隆抗体人参皂苷RB1
- 西洋参发根的诱导及其培养条件的研究被引量：5
- 2010年
- 利用发根农杆菌A4菌株在西洋参根外植体上直接诱导产生发根。在1/2 MS和MS固体培养基上得到西洋参发根,并在B5液体培养基上建立起发根离体培养系,经连续多代的培养,发根仍保持旺盛生长状态。PCR扩增结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolC基因已整合到西洋参发根基因组中并得到表达。利用紫外分光光度法测得西洋参发根的总皂苷含量达3.88%。经对发根比生长速率的测定,确定1/2 B5培养基(15 g/L蔗糖)、摇床转速100 r/min、每4周更换1次培养基并继代培养1次为西洋参发根生长适宜条件。
- 贾冬梅赵寿经钱延春吴颖杨柏明张博
- 关键词：生物工程发根农杆菌西洋参
- 水杨酸诱导下人参培养物差异表达基因片段的克隆被引量：10
- 2009年
- 本研究以人参愈伤悬浮细胞为材料,在其生长的第28天添加1×10-3mg/L水杨酸,测定水杨酸添加后,过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶等3种酶在72h内的变化及皂苷含量,结果表明:水杨酸添加后对过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶的活力影响最大,分别在24h和48h达到最大峰值,在18h开始影响多酚氧化酶的活力,培养物生长的第28天添加水杨酸可以明显提高人参愈伤组织中皂苷的合成。确定添加水杨酸后24h提取总RNA,进行cDNA-RDA分析,筛选差异片段。确定差异基因并在GenBank中注册,注册号为FE900130。为探讨水杨酸作为诱导子对人参次生代谢的影响奠定基础。
- 张悦王义蒋世翠张明哲李凤华张美萍
- 关键词：人参差异表达基因
- 产木糖醇菌株的筛选及发酵条件优化被引量：9
- 2010年
- 从玉米芯中筛选到1株高效转化D-木糖为木糖醇的酵母菌株e。经形态学鉴定及26S rDNA D1/D2区序列分析,将菌株e鉴定为Trichosporon coremiiforme(丝孢酵母)。采用单因素及正交试验优化设计研究了发酵法生产木糖醇的工艺,结果表明:酵母菌株e发酵法生产木糖醇的工艺参数为:碳源质量浓度为40g/l,氮源质量浓度为6g/l,起始pH为7,接种量为6%。
- 赵寿经侯琨粱彦龙徐立新钱延春
- 关键词：生物工程木糖醇生物转化法
- 西洋参发根的诱导及不同外源物质对发根生长和皂苷含量的影响被引量：14
- 2010年
- 利用发根农杆菌A4菌株在西洋参根外植体上直接诱导产生发根,并分析不同浓度的植物激素6-BA、NAA,前体物醋酸镁(Mg(Ac)2)、L-亮氨酸和诱导子茉莉酸甲酯(MJA)、水杨酸(SA)对西洋参(Panax quinquefolium L.)发根生长和皂苷含量的影响。同时,研究MJA与SA组合作用对皂苷含量的影响。采用高效液相色谱法测定发根中单体皂苷Rb1的含量。结果显示,适宜浓度的外源物质均可促进皂苷含量的增加,MJA尤其明显。
- 赵寿经侯艳贾冬梅徐立新钱延春
- 关键词：植物激素前体物诱导子人参皂苷
- 人参发根的愈伤组织诱导被引量：5
- 2008年
- 采用L9(34)正交试验设计方法研究了2,4-D、KT和6-BA 3种植物生长调节物质在人参发根愈伤组织诱导中的作用。结果表明:人参发根愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L;人参发根愈伤组织生长的最优培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+KT 1.5 mg/L。
- 王建华薛健侯春喜徐立新赵寿经
- 关键词：人参发根植物生长调节物质愈伤组织
