山西省卫生厅科技攻关计划项目(20100224)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：苗旺范益民刘晓东王宏勤赵和千更多>>
- 相关机构：山西医科大学第一医院太原市中心医院更多>>
- 发文基金：山西省卫生厅科技攻关计划项目山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脑胶质瘤中RhoA的表达及其临床意义被引量：5
- 2011年
- 目的研究RhoA在人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与病理分级的相关性,探讨RhoA在胶质瘤的诊断、恶性程度及预后判断中的临床意义。方法采用SABC免疫组化法、RT-PCR法对53例不同病理级别的星形细胞瘤及9例正常脑组织标本,进行RhoA蛋白和RhoA mRNA的检测。结果 (1)免疫组化结果显示53例胶质瘤组织中RhoA蛋白表达全部呈阳性,对照组正常脑组织存在弱表达或不表达。(2)不同级别星形细胞瘤标本的RhoA阳性细胞率、RhoA mRNA与GAPDH mRNA灰度比值均存在差异;Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级RhoAmRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级RhoAmRNA表达均高于Ⅱ级。(3)相关性分析:RhoA阳性细胞率和RhoA mRNA表达量与胶质瘤病理分级均呈正相关性(r=0.875,r=0.817,P<0.001)。结论 (1)RhoA在所有已检测的胶质瘤标本中均存在表达,且表达程度与胶质瘤病理分级呈正相关。检测RhoA的mRNA和(或)蛋白的表达,可以作为胶质瘤诊断、判断预后的一个可靠指标。(2)RhoA表达水平与肿瘤恶性程度呈正相关,提示我们可以将其作为星形细胞瘤Ⅰ～Ⅳ级新的有效的诊断标记物,同时作为常规组织病理学的分级标准的补充。这将有助于描述肿瘤的生物学行为特征,选择术后进一步的治疗方案。
- 苗旺刘晓东范益民赵和千王宏勤郝解贺
- 关键词：神经胶质瘤免疫组织化学逆转录聚合酶链反应RHOA
- 法舒地尔阻断Rho／ROCK通路对胶质瘤细胞生长的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察Rho／ROCK信号转导通路抑制剂法舒地尔对人脑胶质瘤细胞株SHG44增殖、迁移及凋亡方面的影响并探讨其机制。方法使用不同浓度（10、20、40、80、160μmol／L）的法舒地尔干预SHG4d细胞，作用不同时间，相差显微镜下观察细胞形态变化；噻唑蓝（MTT）比色法检测16、24、48h细胞增殖；伤痕愈合实验检测细胞迁移能力；Westernblot法检测ROCK—1蛋白表达；流式细胞仪检测24h细胞凋亡。结果随着法舒地尔干预浓度增加，ROCK-I蛋白表达逐渐下降（P〈0．05）；MTT法显示法舒地尔对SHG44细胞增殖的抑制作用有明显的浓度依赖性及时间依赖性（P〈0．05）；伤痕愈合实验显示较高浓度组（40、80、160μmol／L）与低浓度组（10、20μmol／L）、对照组比较，细胞迁移受到明显抑制（P〈0．05）；流式细胞仪检测显示较高浓度组早期凋亡率高于对照组、低浓度组（P〈0．05）。结论法舒地尔可能通过抑制ROCK的活性及诱导凋亡来抑制人脑胶质瘤细胞株SHG-44的增殖、迁移等恶性生物学行为。
- 苗旺刘晓东李娟王宏勤王剑芳范益民
- 关键词：胶质瘤法舒地尔增殖
- RhoC在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义
- 2012年
- 目的 研究RhoC在人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与病理分级的相关性,初步探讨RhoC在胶质瘤的诊断、恶性程度及预后判断中的临床意义.方法 采用抗亲和素-生物素复合物法（SABC）免疫组织化学法、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法对62例不同病理级别的星形细胞瘤及11份正常脑组织标本进行RhoC蛋白和RhoC mRNA的检测.结果 ①免疫组织化学结果显示62例胶质瘤组织中RhoC蛋白表达全部呈阳性,对照组正常脑组织存在弱表达或不表达.②不同病理级别星形细胞瘤标本的RhoC阳性细胞率、RhoC mRNA与甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）mRNA灰度比值均存在差异;Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义（P＜0.05）,Ⅲ、Ⅳ级RhoC mRNA表达均高于Ⅰ级、Ⅱ级.③相关性分析：RhoC阳性细胞率和RhoC mRNA表达量与胶质瘤病理分级均呈正相关性（r＝0.814,r＝0.863,P 均＜0.01）.结论 RhoC可以作为星形细胞瘤Ⅰ-Ⅳ级新的有效的诊断标记物,同时作为常规组织病理学的分级标准的补充.
- 杨光辉石斌范益民刘晓东苗旺
- 关键词：肿瘤神经上皮免疫组织化学反转录聚合酶链反应RHOC
- p53上调凋亡调控因子对不同p53表型胶质瘤细胞生长的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察p53上调凋亡调控因子（PUMA）对不同p53表型人类脑胶质瘤细胞系生长的影响，并探讨其可能的作用机制。方法构建PUMA腺病毒（Ad—PUMA）及空载体腺病毒（Ad．DsRed），分别转染胶质瘤细胞系U251（p53突变型）及SHG-44（p53野生型），CCK-8法检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Westernblot法检测PUMA及凋亡相关蛋白bcl-2、Bax的表达；Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性。结果在p53状态不同的胶质瘤细胞系U251及SHG-44中，Ad．PUMA转染组与空载体组及空白对照组比较，均显现出细胞增殖抑制效应抑制率分别为（50．89±4．73）％和（44．45±5．33）％，P〈O．05]以及促凋亡作用凋亡率分别为（44．89±5．08）％和（31．67±7．32）％，P〈0．051；Westernblot结果显示，Ad—PUMA组胶质瘤细胞转染后，可见PUMA蛋白表达升高，同时伴随抗凋亡蛋白bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达增强（P〈0．05）；Caspase活性检测结果显示Ad—PUMA组Caspase-3、Caspase-9活性增加（P〈0．05），而Caspase-8活性未见明显改变（P〉0．05）。结论无论p53表型如何，PUMA均可抑制胶质瘤细胞增殖，促进其凋亡，其机制可能是通过线粒体凋亡途径即上调Bax，抑制bcl-2表达，进而激活Caspase-9实现的，Ad—PUMA有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点。
- 王新星苗旺王宏勤刘晓东范益民
- 关键词：神经胶质瘤P53细胞增殖细胞凋亡
- 重组腺病毒P53上调凋亡调控因子增强胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性的体内研究被引量：2
- 2011年
- 目的 通过体内实验探讨外源性p53上调凋亡调控因子（PUMA）对人类脑胶质瘤细胞生长的影响及其增强胶质瘤细胞对替莫唑胺（TMZ）敏感性的机制。方法建立人类脑胶质瘤细胞株U87MG裸鼠皮下移植瘤模型，将胶质瘤裸鼠用随机区组法随机分为四组，于建模2周后，分别自腹腔注射0．9％NaCl溶液100μl（对照组）、2×108pfu／100μlAd—PUMA（PUMA组）、TMZ10mg／kg（TMz组）和2×108pfu／100μlAd—PUMA＋TMZ10mg／kg（联合组），每组8只。治疗20d后处死裸鼠，剖腹测量原位肿瘤体积、抑瘤率。TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况及计算凋亡指数（AI）。半定量RT-PCR和Westernblot法检测DNA损伤修复蛋白6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）mRNA和MGMT蛋白表达情况。结果治疗20d时对照组、PUMA组、TMZ组、联合组诱发肿瘤瘤体积分别为（3．684±O．09）、（2．634±0．13）、（2．13±0．07）、（0．97±0．02）cm3，四组体积进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。治疗组抑瘤率分别为28．5％、42．1％、73．6％，两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。TUNEL染色并计算AI：对照组（2．0±1．2）％、Ad．PUMA组（11．44-2．6）％、TMZ组（7．6±3．2）％、联合组（20．64-8．6）％，进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。半定量RT—PCR和Western blot法检测显示MGMTmRNA和MGMT蛋白在TMZ组中表达最高，与其他三组比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论Ad．PUMA联合TMZ具有协同抑制胶质瘤生长作用，其机制可能与Ad—PUMA促进凋亡和抑制MGMT表达有关。
- 刘晓东王宏勤苗旺赵和千范益民郝解贺
- 关键词：神经胶质瘤替莫唑胺重组腺病毒
