国家重点基础研究发展计划(2011CB504705)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：叶昕张廷虹秦玉洁赵敬慧扈荣良更多>>
- 相关机构：中国科学院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定被引量：2
- 2016年
- 流感病毒属于正黏病毒科,为有包膜包裹的单股负链RNA病毒。它的8个基因片段编码至少16种病毒蛋白,其中3个蛋白组成流感病毒的聚合酶复合体。流感病毒聚合酶碱性蛋白1(PB1)是该复合体的组分之一,在病毒的转录、复制及重配中发挥重要的作用。为研究其功能,构建His-PB1(aa 550–755)融合蛋白原核表达质粒,IPTG诱导融合蛋白表达,通过镍柱亲和将其纯化,然后作为抗原免疫家兔。对抗血清进行间接ELISA检测,表明抗体效价可达1∶100 000。兔源PB1蛋白抗血清经亲和纯化后,用于免疫印迹检测流感病毒WSN毒株PB1蛋白以及外源转染的FLAG-PB1蛋白,结果表明该PB1抗体具有良好的特异性,同时也能特异性识别其他亚型的A型流感病毒的PB1蛋白,为进一步研究流感病毒PB1蛋白的功能奠定了基础。
- 秦玉洁张廷虹叶昕
- 关键词：流感病毒多克隆抗体
- 我国野生动物鼬獾的狂犬病值得关注被引量：1
- 2013年
- 自2006年至今，我们连续7年在江西、浙江和安徽等省份的环千岛湖和环鄱阳湖周围地区开展了国家二类保护野生动物鼬獾的狂犬病监测，并通过文献调阅和实际检测进行了该种动物的回顾性及现行流行病学调查。结果显示，1995年以来，在上述地区（包括浙江北面的湖洲至南面的温洲和丽水等地区、安徽黄山地区和江西环鄱阳湖周围地区至东北部的景德镇地区、一直到南部的抚州等）周期性的发生过鼬獾狂犬病的流行，5～8年暴发1次，每次持续2～3年．随后持续零星散发。
- 扈荣良张守峰刘晔赵敬慧连海张菲
- 关键词：野生动物狂犬病流行病学调查鄱阳湖千岛湖
- Colletodiol降低聚合酶活性抑制流感病毒(WSN/H1N1)复制
- 2013年
- 【目的】利用流感病毒启动子报告细胞株(HeLa-IAV-Luc),从微生物代谢产物化合物库中筛选具有抑制流感病毒(WSN/H1N1)效果的化合物,并初步探索其抑制流感病毒的机理。【方法】首先用化合物处理感染流感病毒的HeLa-IAV-Luc细胞,通过荧光素酶实验来筛选出能够抑制流感病毒的化合物。其次通过在流感病毒感染的不同时间点加入化合物并检测病毒蛋白的表达水平,以此来研究化合物在流感病毒复制的何时发挥作用,并用假病毒实验进一步验证。同时通过流感病毒启动子报告实验来检测化合物对流感病毒RNA聚合酶(viral RNA polymerase,vRNP)活性的影响,探究化合物抑制流感病毒的机理。最后通过实时荧光定量PCR来检测化合物对流感病毒RNA合成的影响。【结果】通过检测流感病毒感染的HeLa-IAV-Luc细胞中荧光素酶活性从化合物库中筛选出了具有抑制流感病毒活性的化合物Colletodiol。通过在流感病毒感染的不同时间点加药以及假病毒实验证明了Colletodiol在流感病毒进入细胞后发挥作用,对血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白功能没有影响。通过启动子报告系统证明了Colletodiol能显著抑制流感病毒vRNP的活性,流感病毒RNA的合成也因此受到抑制。【结论】通过HeLa-IAV-Luc细胞筛选出了具有抑制流感病毒活性的化合物Colletodiol,其抑制流感病毒的机理是能够显著降低流感病毒vRNP复合物的活性。
- 赖文彬汪世雄叶昕
- 关键词：流感病毒
