国家自然科学基金(30571924)
- 作品数:3 被引量:8H指数:1
- 相关作者:刘友生陈锐段光杰朱江葛晓冬更多>>
- 相关机构:第三军医大学西南医院第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人源N-末端脂多糖结合蛋白(NH-LBP)的原核表达及抗原性分析
- 2009年
- 目的在大肠杆菌表达系统中大量表达、纯化N-末端脂多糖结合蛋白(NH-LBP)并检测其抗原性。方法构建pET28a-NHLBP质粒,转入大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达成功后扩大培养、提取包涵体、亲和层析分离纯化,并将纯化得到的NH-LBP融合蛋白经Western blot鉴定。结果成功构建pET28a-NH-LBP表达质粒并转入BL21细菌进行诱导表达,目的蛋白以包涵体形式表达为主;经扩大培养、分离纯化产物大小与NH-LBP融合蛋白理论计算值一致,经Western blot检测具有B细胞表位。结论原核表达人源N-末端脂多糖结合蛋白(NH-LBP)是制备抗原的一种可行方便的方法,为筛选针对NH-LBP的人源性小分子抗体提供了材料。
- 陈锐刘友生朱江段光杰易维京胡川闽
- 关键词:原核表达抗原性
- 非甾体类抗炎药物对急性高原病的预防效果被引量:7
- 2011年
- 目的验证非甾体类抗炎药物盐酸苄达明对急性高原病的预防效果。方法将急进5 200 m高原的118例健康青年官兵随机分为安慰剂组(n=20)、复方红景天组(n=33)、复方党参组(n=33)、盐酸苄达明组(n=33),自海拔1 400 m,历时5 d进入5 200 m高原。从出发前5 d开始分别服用盐酸苄达明片、复方红景天胶囊、复方党参胶囊和安慰剂胶囊,定期测试其血氧饱和度(SaO2)和心率(HR),并以军用卫生标准GJB1098-91《急性高原反应的诊断和处理原则》随访记录受试者急性高原反应症状,然后分度评分;进入高原后第7天进行高原习服基础生理指标测定,进行药效评价。结果盐酸苄达明对全程试验期内受试者高原缺氧所致头痛和呕吐的预防效果显著优于安慰剂,且对头痛症状的预防效果优于复方红景天与复方党参。盐酸苄达明组受试者急性高原反应GJB评分,进入海拔5 200 m高原第3、5天SaO2、心率,高原习服基础生理指标等均显著优于安慰剂组。结论非甾体类抗炎药物盐酸苄达明防治急性高原病效果显著。
- 张俊才王引虎冯英凯刘友生崔建华李丽高江峰王琰
- 关键词:高原病化学预防非甾体类抗炎药
- 一种大容量天然人源核糖体展示单链抗体文库的构建被引量:1
- 2009年
- 目的构建大容量天然人源核糖体展示单链抗体(single chain Fv,scFv)文库,为抗体研究提供方便有效的技术平台。方法收集健康献血志愿者的白细胞悬液,离心分离单个核细胞,抽提其总RNA,逆转录成cDNA、PCR及重叠延伸PCR法构建scFv文库,并通过第2次重叠延伸PCR在scFv DNA序列5′端添加T7启动子、茎环结构、核糖体结合位点,其3′端添加6×His标签、间隔序列(基因Ⅲ)、茎环结构等改造成核糖体展示天然人源scFv文库。结果成功构建了可用于筛选抗体的核糖体展示文库容量达1013以上。结论成功构建了大容量天然人源核糖体展示scFv文库,为筛选到高亲和力和特异性抗体提供了技术平台。
- 陈锐刘友生朱江段光杰葛晓冬
- 关键词:核糖体展示文库