国家自然科学基金(30971658) 作品数:5 被引量:6 H指数:2 相关作者: 李万程 肖亚梅 刘文彬 胡小慧 惠珊珊 更多>> 相关机构: 湖南师范大学 加州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
PP-1催化亚基(PP-1c)在成体小白鼠不同组织器官中的分化表达与定位 被引量:2 2011年 为了确定蛋白磷酸酶-1(protein phosphatase-1)的催化亚基(PP-1c)在小白鼠不同器官组织(肌肉、卵巢、肾、胃、脾、大脑、心、肝、肺及乳腺)中的表达模式,运用RT-PCR、Western印迹及荧光免疫组织化学技术等实验手段进行了检测和分析.结果表明,在mRNA水平,PP-1c在大脑中表达最高,卵巢及肺中表达次之,在肌肉、肾、心、肝中表达较低,在胃和乳腺中表达最低;在蛋白质水平,肝中表达最高,肾、大脑、肺和乳腺中表达较高,而肌肉、卵巢、心和脾中表达相对较低,胃中表达最低.免疫荧光组织化学实验结果显示,PP-1c的表达也具有明显的组织特异性和细胞特异性.这些结果为进一步探讨PP-1在哺乳动物不同组织器官中的功能提供了重要的实验依据. 刘文彬 聂磊 惠珊珊 胡小慧 马慧 王玲 周磊 肖亚梅 李万程PP-1与PP-2A在金鱼眼(球)不同组织/细胞中的表达模式 被引量:3 2010年 为确定蛋白磷酸酶-1和-2A(protein phosphatase-1 and phosphatase-2A,PP-1,PP-2A)在水生低等脊椎动物眼球不同组织/细胞中的表达模式,提取金鱼眼球中4种组织视网膜、晶体上皮细胞、晶体纤维和角膜的RNA和蛋白,利用RT-PCR和Western印迹技术进行检测.同时运用荧光免疫组织化学技术进行了定位表达研究.结果表明:1)在mRNA水平上,PP-1催化亚基α和PP-2A催化亚基β在金鱼视网膜、晶体上皮和角膜中表达强烈,与其在高等哺乳类脊椎动物如小鼠中的表达形成鲜明的对比;2)在蛋白水平上,PP-1和PP-2A催化亚基在金鱼视网膜和晶体上皮细胞中的表达较高,而在角膜中的表达最低.这与它们在小鼠眼球视网膜和角膜中同时具备高表达的模式形成对比;3)在金鱼发育48h的眼球中,PP-1和PP-2A催化亚基定位于视网膜的色素视网膜和神经视网膜细胞中,晶体上皮和纤维细胞中及角膜上皮细胞中,而在性成熟金鱼眼球中,此二酶催化亚基主要定位于视网膜的色素视网膜,神经视网膜及晶体上皮细胞中.这些结果为探讨PP-1和PP-2A在金鱼眼球不同组织中的功能打下了重要基础。 刘文彬 胡小慧 惠珊珊 周洁 刘姣 肖亚梅 刘少军 李万程关键词:去磷酸化 视网膜 晶体 角膜 PP2A-Aα/β在金鱼及斑马鱼发育中的分化表达模式 被引量:1 2011年 以金鱼和斑马鱼为研究对象,运用RT-PCR和Western Blot技术分析蛋白磷酸酶2A(PP2A)结构亚基A(PP2A-Aα/β)在金鱼、斑马鱼成体9种组织和12个发育时期胚胎中mRNA和蛋白水平的表达情况,得到其分化表达模式为:(1)在mRNA水平上,PP2A-Aα/β在金鱼、斑马鱼9种组织中具有较强表达;种属差异性和组织差异性均较大;结构亚基A的两亚型Aα和Aβ的表达存在差异。(2)在蛋白水平上,PP2A-Aα/β在金鱼、斑马鱼9种组织中均有表达;种属差异性不大但出现明显的组织差异性。(3)PP2A-Aα/βmRNA在金鱼和斑马鱼卵裂期到囊胚期胚胎中大量存在,PP2A-AαmRNA在金鱼眼色素期量剧增推测其对金鱼眼色素的形成至关重要。(4)PP2A-Aα/β基因在金鱼、斑马鱼12个发育时期胚胎中均有较高水平的蛋白存在,提示其为维持胚胎的正常发育发挥重要作用。 刘姣 付淑君 胡雯峰 刘方元 傅永明 唐鸿钊 刘文彬 肖亚梅 刘筠 李万程关键词:蛋白磷酸酶2A 去磷酸化 金鱼 斑马鱼 金鱼PP2A调节亚基PR55γ基因的克隆及表达分析 2011年 蛋白磷酸酶2A是一种重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,对于调控多细胞的生命活动起重要作用。以金鱼大脑为材料,运用RT-PCR技术克隆得到PP2A调节亚基B55家族中PR55γ基因编码区部分序列。结果显示PR55γ基因cDNA长1218 bp,编码的多肽共含405个氨基酸。序列分析表明,该基因编码的蛋白与已知其他物种对应的PR55γ蛋白质均有着很高的同源性。用RT-PCR的方法检测了PR55γ基因在金鱼不同组织和胚胎发育不同时期的mRNA表达水平。结果表明,PR55γ基因表达呈现明显的组织和胚胎发育阶段差异性。在成体组织中,仅在大脑和鳍中有表达。在胚胎发育过程中,PR55γ从神经胚开始出现,整体呈现上升趋势,在出膜期达到最高水平。据此推测,PR55γ基因可能在金鱼胚胎发育中具有多种重要作用。 赵琚琼 谢斯思 陈培超 邹立军 刘文彬 肖亚梅 刘少军 刘筠 李万程关键词:信号转导 蛋白磷酸酶 PP2A 发育 蛋白磷酸酶-2A催化亚基C在小鼠不同器官中的分化表达与定位 2011年 目的探讨蛋白磷酸酶-2A(PP-2A)的催化亚基(PP-2Ac)在6只小白鼠不同器官中的表达模式与定位。方法运用RT-PCR、免疫印迹法及免疫荧光技术等实验手段,分别从mRNA水平、蛋白和组织水平进行研究。结果在mRNA水平上,PP-2Ac在大脑中表达最高,卵巢中表达次之,而肌肉、肾脏、脾脏、心脏、肝脏、肺及乳腺中表达相对较低,胃中表达最低;在蛋白水平上,也是大脑中的表达最高,卵巢、脾脏、心脏、肝脏和肺中表达水平相对较高,肌肉、肾脏、乳腺中表达相对较低,胃中表达最低。免疫荧光结果显示,PP-2Ac的表达具有一定的组织特异性和细胞特异性。结论 PP-2A是哺乳动物体内最重要的蛋白磷酸酶之一。 刘文彬 惠珊珊 胡小慧 聂磊 马慧 王玲 肖亚梅 李万程关键词:催化亚基 反转录-聚合酶链式反应 免疫印迹法 免疫荧光 小鼠