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国家自然科学基金(30870225)

作品数：12 被引量：12H指数：2
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文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 12篇生物学

主题

  • 10篇拟南芥
  • 5篇花药
  • 5篇基因
  • 3篇雄性不育
  • 3篇突变体
  • 3篇图位克隆
  • 3篇克隆
  • 3篇GFP
  • 3篇不育
  • 2篇蛋白
  • 2篇雄性不育突变...
  • 2篇孢子
  • 2篇细胞
  • 2篇小孢子
  • 1篇蛋白因子
  • 1篇新基因
  • 1篇悬浮培养细胞
  • 1篇悬浮细胞
  • 1篇亚细胞
  • 1篇烟草

机构

  • 12篇上海大学

作者

  • 12篇张卫
  • 12篇周树敏
  • 5篇郑帮
  • 4篇陈燕
  • 3篇褚艳霞
  • 3篇郑亚洁
  • 3篇韦嘉励
  • 3篇张红莉
  • 3篇袁晓君
  • 3篇孙虎林
  • 3篇司英语
  • 2篇高贝
  • 2篇孙恒吉
  • 2篇王伟倩
  • 1篇张昉
  • 1篇王哲
  • 1篇孙立成
  • 1篇李杨
  • 1篇洪强
  • 1篇李亚琴

传媒

  • 6篇上海师范大学...
  • 3篇河南师范大学...
  • 2篇西北植物学报
  • 1篇中国生物化学...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 3篇2014
  • 2篇2013
  • 1篇2012
  • 3篇2011
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
外源基因转化烟草悬浮细胞方法的改进
2014年
烟草悬浮培养细胞作为一种重要的实验材料已有较多的研究,将外源基因通过克隆进行载体构建,转化入悬浮培养的烟草细胞并进行表达,在带有相应筛选抗性的抗生素固体培养基中进行培养,再将愈伤组织转入液体培养基中进行培养,得到转入外源基因的液体悬浮培养烟草细胞.我们通过对此法作一些改进,使其便于操作、省时,适合在一般实验室条件下进行操作,且烟草悬浮培养细胞传代培养快,取材方便的特性对实验的开展也有很大的促进.
郑帮陈燕周树敏张卫
关键词：外源基因烟草悬浮培养细胞
遗传定位一个花粉发育相关的拟南芥新基因SPG1(英文)被引量：2
2011年
通过EMS诱变获得一个拟南芥突变体shrunken pollen grain1,spg1.根据横切片的观察结果,与野生型相比较,突变体观察到异常的花粉粒.遗传学的实验表明:spg1突变现象由一个隐性的单基因控制.通过图位克隆的方法,spg1突变位点定位在3号染色体的分子标记3-AL138638-6632和3-AL353865-6814之间大约427kb的区间内.生物信息学的分析表明,在这个区间内没有任何已知的与育性相关的基因.以上结果说明SPG1是一个控制拟南芥雄性不育的新基因.
韦嘉励周树敏袁晓君张卫
关键词：拟南芥花药小孢子图位克隆
拟南芥雄性不育相关基因LDAD1&2的遗传定位(英文)被引量：1
2011年
利用EMS诱变筛选手段分离到一株拟南芥类似花药不开裂雄性不育突变体(like-defective in anther de-hiscence,ldad),其果荚干瘪,花药不能开裂且花粉败育。遗传分析表明,突变体的表型受2个隐性基因控制;细胞学观察发现,在花药发育过程中伴随着小孢子的降解;通过图位克隆初步对ldad的2个突变位点分别定位,一个定位在1号染色体上SSLP标记F22L4与端粒之间171 kb的区间,另一个定位在5号染色体上SSLP标记T10O8与端粒间150 kb的区间内;生物信息学分析显示此区间内未见育性相关的已知基因。该研究的结果对进一步克隆LDAD1&2基因及探讨其在花药发育中的功能具有重要意义。
周树敏袁晓君韦嘉励张卫
关键词：图位克隆拟南芥雄性不育小孢子花药
拟南芥翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位研究被引量：3
2015年
探讨了拟南芥的翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位.以Col野生型拟南芥的cDNA为模板,通过高保真KOD扩增酶获得2 363bp的拟南芥转录延伸因子EF1A基因片段,将其与GFP融合后共同连入p1300表达载体,利用农杆菌侵染法将p35S∶GFP和p35S∶EF1A∶∶GFP转入野生型拟南芥中,观察转基因植物细胞中GFP的表达情况.结果显示:p35S∶GFP转基因植物中,细胞核中GFP荧光强度显著高于细胞质中荧光强度,但是在p35S∶EF1A∶∶GFP转基因植物中,细胞核中荧光强度与细胞质中荧光强度无显著差异,说明在进行蛋白翻译时细胞质中的EF1A含量显著高于细胞核中,这也为翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位提供了实验依据.
陈燕王伟倩张红莉夏群芳孙恒吉李瑞沙郑帮周树敏张卫
关键词：拟南芥GFP
植物细胞质介导GFP-NLS蛋白入核转运的HeLa细胞系统的建立被引量：1
2017年
细胞核作为细胞中重要的遗传物质存储、复制和转录的结构,涉及大量信息和物质的传输活动,尤其是蛋白质的入核转运一直以来都是研究的热点问题之一。本研究证明,植物细胞质可以有效应用于动物细胞体系研究蛋白质入核转运。本文利用病毒SV40抗原蛋白中的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)标记绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),通过拟南芥细胞质的介导,利用He La细胞核建立研究蛋白质入核转运的半细胞体系。结果显示,植物细胞质结合NLS片段能改变GFP在He La细胞核内外的分布,实现对目标蛋白入核过程的介导,使GFP-NLS最后定位于细胞核内。这也意味着通过He La细胞建立起的半细胞体系能为蛋白质入核转运研究提供一个有效的研究体系。
李瑞沙洪强周树敏张红莉李杨张卫
关键词：核定位信号
拟南芥ACOS5基因表达模式分析被引量：1
2013年
探讨了拟南芥ACOS5基因的表达模式.采用PCR方法对拟南芥col生态型基因组进行扩增,获得ACOS5基因启动子序列,将其连入p1300植物表达载体中以GFP作为报告基因,并将该载体通过农杆菌转基因转入拟南芥col生态型中,观察转基因植物花药中GFP的表达情况.结果:ACOS5::GFP转基因植物从花药发育第四期到十二期均有GFP表达,GFP的表达峰值在第八期.结论:该表达载体可用,且ACOS5基因从花药发育第四期开始有微弱表达,且随着时期发展逐渐增强,至第八期达到表达最高峰值,随后随时期发展表达量逐渐减弱.
孙虎林褚艳霞郑帮郑亚洁司英语周树敏张卫
关键词：拟南芥花药GFP
拟南芥雄性不育突变体pmi1的遗传与定位被引量：1
2012年
通过甲基磺酸乙酯(简称EMS)诱变拟南芥Col-0种子获得一株隐形雄性不育突变体pollen mitosis 1,pmi1.遗传分析结果显示突变体为配子体遗传.细胞学观察发现突变体花粉粒发育出现异常:细胞塌陷,细胞核在单核靠边期后和花粉第一次有丝分裂(简称PMI)前的时间段发生降解.通过图位克隆方法将该基因定位在分子标记T19L18和T1D16之间,物理距离55Kb.测序分析证明这55Kb区间中的ERECTA基因的编码区在3067bp的位置发生单碱基替换,C/G变为A/T.由此说明ERECTA基因在拟南芥从单核小孢子到二细胞花粉的发育过程中起着重要作用.
张昉王哲高贝司英语周树敏张卫
关键词：花粉粒雄性不育PMI图位克隆
拟南芥ACOS5基因启动子的克隆和表达载体构建
2014年
花药组织特异性启动子在花药发育的分子遗传学中有重要的研究价值.采用PCR方法克隆了1kb长度的ACOS5基因启动子,并将其连入含有GFP基因的拟南芥表达载体p1300中.电激转化农杆菌GV3101后,通过农杆菌介导转化拟南芥,获得转基因植株.显微观察显示,转基因植物花药只在绒毡层中有荧光表达.这说明ACOS5基因启动子可以在拟南芥花药中驱动外源GFP基因的特异性表达.
李亚琴陈燕郑帮孙虎林周树敏张卫
关键词：拟南芥花药
拟南芥HSP70基因启动子表达载体的构建及在烟草BY2细胞中的应用被引量：2
2013年
探讨了拟南芥的HSP70基因在液体悬浮培养的烟草BY2细胞中的表达及应用.用PCR扩增的方法从拟南芥col生态型基因组中扩增获得HSP70基因启动子序列,将其连入p1300表达载体且以GFP为报告基因,将该表达载体采用农杆菌转基因转入液体悬浮培养的烟草BY2细胞中,观察转基因细胞中报告基因GFP的表达情况.结果显示:HSP70:GFP转基因液体悬浮培养的烟草BY2细胞中有GFP的表达.该表达载体可在液体悬浮培养的BY2细胞中正常表达,且可在较短时间内获得大量实验材料,对拟南芥的HSP70基因启动子的进一步研究提供理论依据和丰富的实验材料,且可明显缩短实验周期.
郑帮陈燕褚艳霞孙虎林郑亚洁孙恒吉司英语周树敏张卫
关键词：拟南芥GFP
转录因子TDF1对拟南芥雄性不育突变体atms1的温敏调控机制研究
2014年
TDF1作为MYB家族的转录因子,参与了胼胝质的降解过程,并控制绒毡层的分化从而影响着花粉粒的正常发育.以一株通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变Col-0野生型拟南芥获得的温敏雄性不育突变体atms1(ambient temperature-sensory male sterility1)对温度敏感机制进行了研究.通过构建TDF1反义RNA表达载体,在atms1突变体背景下抑制TDF1的表达来观察突变体花粉育性的变化,发现在27℃时的atms1突变体花粉的育性得以恢复.这一结果表明在花粉发育的过程中TDF1对ATMS1m具有一定的调控作用.
郑亚洁高贝夏群芳周树敏张卫
关键词：温敏雄性不育
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