中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-YW-G-018)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：蔡渊恒袁野姜卫红姜世民更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院吉林大学更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 定点突变提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达
- 2012年
- 采用定点突变的方法对皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)来源的D-氨甲酰水解酶(D-carbamoylase,DCase)编码基因的3个位点A18、Y30、K34进行突变,并将获得的突变体基因片段构建入高表达载体pET-28b中,转化E.coliBL21(DE3),获得带有组合三突变(A18E/Y30D/K34E)的DCase-SM表达菌株BL21/pET-DCSM。当以IPTG诱导目的蛋白表达时,发现突变菌株(DCase-SM)与出发菌株(DCase)菌株相比,目的蛋白的可溶性表达显著提高,其可溶蛋白比例约为64%;与出发菌株相比,其单位菌体酶活增加427%;另外,与本实验室前期构建的高可溶性三叠加突变体菌株DCase-M3相比,单位菌体酶活亦增加7.9%。
- 袁野蔡渊恒姜世民姜卫红
- 关键词：定点突变可溶性酶活
