浙江省重点科技创新团队项目(2012R10048-07)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李坤倪崖薛亚梅石其贤曾杰更多>>
- 相关机构：浙江省医学科学院浙江大学医学院附属邵逸夫医院温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省重点科技创新团队项目浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人精子超激活运动的比例特征被引量：1
- 2013年
- 目的研究正常人精子超激活运动的比例特征。方法 11例常规检查正常的精液,通过Percoll分离处理再分别在获能条件下培养3和5h,利用计算机辅助精子分析仪对人精子直线速度(VSL),曲线速度(VCL),平均路径速度(VAP),线性[LIN,(VSL/VCL)×100],头部侧振幅(ALH)和精子超激活(%)进行检测分析。结果在获能条件下培养3h时,精子超激活运动比例的均值为25.3%,标准差13.2%,中位数为27.0%,95%可信区间为16.4%～34.1%;在5h时,比例的均值为18.9%,标准差14.3%,中位数为18.0%,95%可信区间为9.3%～28.5%;两者服从正态分布。在获能培养3～5h过程中,人精子超激活运动的比例随时间延长呈降低趋势,但统计学差异不显著。结论人精子在获能培养3h和5h时超激活运动比例的均值分别25.3%和18.9%,95%可信区间分别为16.4%～34.1%和9.3%～28.5%,并且比例随时间的延长而呈降低趋势。
- 李坤薛亚梅倪崖石其贤
- 关键词：精子精子活力不育
- 定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子BA-ELISA方法的建立与评价
- 2015年
- 目的：建立一种定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）的生物素-亲和素ELISA（BA-ELISA）方法并评价其可靠性。方法：优选设计CFTR三个表位的大肠杆菌表达抗原,免疫新西兰白兔获得CFTR多克隆抗体,用纯化后的抗体包被酶标板,并用生物素对其标记,从人精子提取CFTR作为抗原,用辣根过氧化物酶偶联的亲和素检测,优化两种抗体浓度及实验参数,建立可定量检测CFTR蛋白的双抗体夹心BA-ELISA方法;用临床精子标本评估所建立方法的重复性、特异性等。结果：CFTR包被抗体和生物素化CFTR抗体最适浓度分别为4μg/ml和10μg/ml,最佳封闭液为1%BSA-PBST,抗原与包被抗体最佳反应时间60 min,底物显色最佳时间15 min。批内、批间变异系数分别为2.16%~9.23%和2.29%~11.71%,包被的CFTR抗体与精子胞浆蛋白无交叉反应,最低检出下限为0.15 ng/ml,标准反应曲线具有良好的线性关系R2=0.962。结论：成功创建了定量检测CFTR蛋白的ELISA方法,具有特异性强、灵敏度高等特点。
- 邱枫曾杰李坤陈爱君徐万祥倪崖
