博士科研启动基金(530046)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关作者：周银丽曾金祥夏循礼黄凤兰于玲玲更多>>
- 相关机构：江西中医学院红河学院江西中医药大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家科技支撑计划江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 同源克隆栀子玉米黄素合成途径酶基因保守区被引量：4
- 2012年
- 目的:玉米黄素生物合成途径在植物中高度保守,由7个酶催化步骤组成。本研究从栀子果实中克隆这些酶基因的保守区段。方法:利用简并引物,优化PCR扩增体系和扩增条件,胶回收后进行T-A克隆和测序。结果:成功扩增出八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,PSY)(GenBank accession JQ690895)503bp、八氢番茄红素脱饱和酶(phytoene desaturase,PDS)(Gen-Bank accession JQ690896)544bp、胡萝卜素脱饱和酶(carotene desaturase,ZDS)(GenBank accession JQ690897)611bp、胡萝卜素顺反异构酶(carotene cis-trans isomerase,CRTISO)(GenBank accession JQ690898)567bp、番茄红素β-环化酶(lycopene-β-cyclase,LYC)(GenBank accession JQ690899)745bp和β-环羟化酶(β-ring hydroxylase,β-OHase)(GenBank accession JQ690900)594bp的基因保守区段,序列已经提交GenBank登陆。结论:该研究克隆了玉米黄素合成途径中6个酶基因的保守区段,为今后应用于生物合成途径的遗传操作奠定了基础。
- 王晓云曾金祥夏循礼罗光明
- 关键词：栀子玉米黄素生物合成途径克隆
- 植物次生代谢遗传操作中基因表达优化策略研究进展
- 2013年
- 植物可以产生种类多样的次生代谢产物,供人类利用。通过转化代谢途径相关基因,可以实现对植物次生代谢途径的调控。在遗传操作中,对转基因载体上的表达元件进行优化,共表达功能基因的辅因子基因、亚基基因和转录因子基因,并采取合理措施避免基因沉默,能够促进外源功能基因的稳定、高效表达,从而提高产物的合成与积累量。本文综述了进行植物次生代谢途径遗传操作时,优化基因表达时的研究进展。提出为获得理想的转基因效果,有必要综合考虑影响功能基因表达的各种因素,并进行相应的优化。本文为植物次生代谢遗传操作研究提供了基础资料。
- 朱玉野于玲玲周银丽罗光明王晓云
- 关键词：植物次生代谢基因表达
- 植物次生代谢途径的遗传操作被引量：2
- 2012年
- 植物次生代谢产物种类极其丰富,是人类的宝贵资源,这些产物及其合成途径相关酶具有空间特异性分布的特征。植物次生代谢途径的调控是个复杂的过程,受代谢产物水平、多酶复合物相互作用等多种因素的影响。通过遗传操作改造代谢过程,调控产物在植物体内的含量,是一条切实可行和具有广阔发展空间的途径。目前,改造植物次生代谢途径可以采取单基因操作和多基因操作两种策略进行。
- 王晓云夏循礼黄凤兰张寿文
- 关键词：次生代谢产物
- 同源扩增栀子藏红花素生物合成途径酶基因保守区被引量：5
- 2012年
- 获得功能基因是对植物次生代谢产物代谢途径进行遗传操作的必要条件。通过引入脱氧次黄嘌呤碱基和分解引物,大幅度降低高简并度引物的简并程度,并优化PCR扩增体系和扩增条件,从栀子果实中成功扩增出藏红花素生物合成途径的两个关键酶——玉米黄素剪切加双氧酶(zeaxanthin cleavage dioxygenase,ZCD)和糖基转移酶(glucosyltransferase,GTase)基因的保守区段,分别长170 bp和250 bp。研究结果为今后获得全长基因,并应用于植物藏红花素生物合成途径的调控奠定了基础。
- 王晓云周银丽罗光明
- 关键词：栀子糖基转移酶
- 栀子高质量总RNA的提取被引量：7
- 2012年
- 利用改进的高盐高pH值法和EASYspin植物RNA快速提取试剂盒,从富含次生代谢产物的栀子叶片和果实中提取总RNA。用紫外分光光度法和1%非变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量,0.7%非变性琼脂糖凝胶电泳检测反转录产物质量,利用RT-PCR反应检测反转录产物用于基因扩增的有效性。结果表明,高盐高pH值法提取的栀子果实总RNA,试剂盒法提取的栀子叶片总RNA产量均较高,28S和18S条带清晰,28S条带亮度是18S条带的2倍,且A260/A280在1.9~2.0;以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广（250~5000bp）;上述反转录获得的cDNA均能够成功用于60S核糖体蛋白L18A基因片段的扩增。综上所述,利用高盐高pH值法提取栀子果实总RNA、利用EASYspin植物RNA快速提取试剂盒提取栀子叶片总RNA,效果最好。本研究成功建立了从栀子果实和叶片中提取高质量总RNA的方法。
- 朱玉野朱继孝罗光明王晓云
- 关键词：栀子果实总RNACDNA
