国家自然科学基金(81272171)
- 作品数:8 被引量:48H指数:4
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- 相关机构:重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
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- 过表达NICD通过下调基因JunB的表达抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化被引量:2
- 2018年
- 目的:研究Notch信号通路在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法:将细胞分为5组:空白组(Blank,n=3),BMP9处理组(BMP9,n=3),空白质粒对照组(BMP9+Control,n=3),过表达Notch1胞内段质粒(Notch1 intracellular domain,NICD)处理组(BMP9+NICD,n=3),DAPT处理组(BMP+DAPT,n=3)。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和钙盐染色分别验证过表达NICD对成骨分化早晚期情况的影响。进一步采用定量逆转录PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-RCR)和Western blot检测基因NICD、Hey1及成骨相关基因Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8、OPN、Runx2、OCN、JunB的表达。结果:早期ALP活性及染色结果显示,NICD组较Control组能显著抑制C3H10T1/2细胞成骨分化过程中ALP的形成[5 d:(33 167.66±2 018.45)vs.(146 451.00±14 889.67),P=0.000;7 d:(58 981.33±4 724.70)vs.(89 588.66±5 928.32),P=0.000],γ-分泌酶抑制剂(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT)完全抑制Notch通路时得到相同的结果[5 d:(44 812.66±4 174.94)vs.(146 451.00±14 889.67),P=0.000;7 d:(64 622.93±4 724.70)vs.(89 588.66±5 928.32),P=0.000]。茜素红S染色结果显示,NCID抑制钙盐结节的形成,而DAPT阻断Notch通路明显促进钙盐结节形成。qRT-PCR结果表明,NCID组中NICD及靶基因Hey1的表达较Control组明显增加[(3.90±0.02)vs.(0.35±0.01),P=0.000;(19.79±0.01)vs.(11.80±0.02),P=0.000],Western blot得到相同结果[(1.32±0.01)vs.(0.19±0.01),P=0.000],且NICD明显抑制成骨分化相关基因JunB、Runx2、OCN、OPN等的表达[(0.10±0.01)vs.(0.53±0.01),P=0.000;(0.18±0.01)vs.(0.30±0.02),P=0.000;(0.36±0.01)vs.(0.62±0.02),P=0.000;(0.07±0.01)vs.(0.48±0.01),P=0.000],而转录因子Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8的表达不受影响[(0.74±0.02)vs.(0.73±0.03),P=0.000;(0.63±0.01)vs.(0.58±0.04),P=0.000],DAPT阻断Notch通路后上述相关基因的表达明显增加。结论:�
- 王南谭涛林端阳罗小辑
- 关键词:NOTCH信号通路间充质干细胞成骨分化
- Hey1基因参与调控BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化被引量:2
- 2015年
- 目的:观察发状分裂相关增强子Hey1在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞(MSCs)C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:包装Hey1、BMP9以及GFP的过表达慢病毒,并分别作用于C3H10T1/2细胞,RT-PCR和Western blot检测Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒是否包装成功,碱性磷酸酶(ALP)检测早期成骨指标ALP的变化,茜素红S染色检测晚期成骨指标钙盐沉积,MTT检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响,流式细胞术检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响。结果:Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒包装成功;在成骨分化早期,过表达Hey1基因可促进BMP9调控的C3H10T1/2细胞的成骨分化与增殖;在成骨分化晚期,过表达Hey1基因可促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的成骨分化,并将BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期阻滞在G1期。结论:Hey1基因可参与调控BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞的早晚期成骨分化,并对细胞的增殖与周期有一定的影响。
- 唐大刚王淼张艳亮王孝林李贵强罗小辑
- 关键词:C3H10T1/2细胞成骨分化
- 人工颈椎间盘置换术的适应证与禁忌证被引量:4
- 2014年
- 人工颈椎间盘置换术是目前治疗颈椎退行性疾病的有效方法,与传统颈前路植骨融合术相比,其主要优势在于术后恢复速度较快,并且较好的维持了颈椎正常活动,降低了相邻节段颈椎退行性变的发生率和手术翻修率。因此它得到了越来越多的医生和患者的关注与认可。但人工颈椎间盘置换术的手术适应证与禁忌证,目前尚无统一标准。本文就近年国内外相关文献,从手术适应证和禁忌证两个方面做一综述,为提高对手术指征的认识与把握提供参照。
- 高天乐唐大刚张艳亮王淼罗小辑
- 关键词:人工颈椎间盘置换适应证禁忌证
- 后路减压植骨融合内固定术治疗胸椎管狭窄症的疗效及安全性被引量:7
- 2018年
- 目的探讨经后入路减压植骨融合内固定术治疗胸椎管狭窄症的疗效及安全性。方法回顾分析2010年1月至2018年5月重庆医科大学附属第一医院骨科行后入路减压植骨融合内固定术治疗的14例胸椎管狭窄症患者的病历资料。其中男7例,女7例,年龄为(55.14±9.87)岁(38~73岁)。患者出现自觉症状至确诊的时间为(35.25±45.79)个月,症状加重至确诊的时间为(10.67±14.69)个月。导致胸椎管狭窄症的因素:黄韧带骨化10例,椎间盘突出3例,椎间盘突出合并黄韧带骨化1例。观察并记录手术时间、术中减压和固定节段、术中出血量和输血量、术后引流量和引流时间,以及术中和术后并发症。采用美国脊髓损伤协会(ASIA)脊髓损伤分级(简称ASIA分级)和日本骨科协会(JOA)脊髓功能评分表(简称JOA评分)评估患者的神经功能。结果所有手术均在神经电生理监护下完成,手术时间为(216.21±60.40)min(110~322 min),术中出血量为(471.43±358.80)ml(50~1 200 ml),术中输血量为(378.29±622.81)ml(0~2 000 ml),术后引流液量为(440.93±396.44)ml(33~1 430 ml),术后引流时间为(3.93±1.59)d(1~7 d)。术后出现神经系统并发症3例,其中脑脊液漏2例,颅内积气和低颅压综合征1例,经对症处理后均痊愈。术前脊髓损伤ASIA B级1例,末次随访时改善为ASIA D级;ASIA C级4例,末次随访时3例改善为ASIA D级,1例改善为ASIA E级;ASIA D级9例,末次随访时4例改善为ASIA D级,5例改善为ASIA E级。术前及末次随访时JOA评分分别为(6.43±2.10)分和(9.14±0.95)分,二者差异有统计学意义(P<0.05),其中JOA评分改善率优3例,良6例,可4例,差1例。末次随访时未发现内固定失效病例。结论经后入路减压植骨融合内固定术治疗胸椎椎管狭窄安全有效,术后并发症少。术中脊髓的神经电生理监护和审慎的操作有助于提高手术的安全性。
- 杨升东罗小辑林豪谭涛王南林端阳王林张超邓忠齐
- 关键词:胸椎椎管狭窄黄韧带骨化胸椎间盘突出外科手术治疗
- 网袋加压椎体成形术治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折被引量:18
- 2017年
- 目的探讨网袋加压椎体成形术(vesselplasty)治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的临床效果。方法 2014年1月~2016年9月,对20例(22椎)胸腰椎压缩性骨折行网袋加压椎体成形术,平均骨密度T值-3.10(-4.44^-2.60),观察骨水泥渗漏,以及手术前后疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)、椎体高度的变化。结果共9个椎体(40.9%)发生骨水泥渗漏,其中上下终板渗漏5例,椎管内2例,椎旁1例,肋椎旁1例。随访时间6~32个月,平均23个月。疼痛VAS和ODI术后第1天比术前均明显改善[术前vs.术后第1天:(7.2±0.8)分vs.(3.3±0.8)分,t=1.81,P=0.00;70.8%±7.5%vs.25.8%±7.5%,t=24.26,P=0.00],末次随访时继续改善[(1.9±0.9)分,t=7.88,P=0.00;16.0%±5.4%,t=6.18,P=0.00]。病变椎体前缘、中部、后缘高度术后第1天均明显增加[(16.4±6.0)mm vs.(19.1±6.5)mm,t=-4.88,P=0.00;(14.5±4.4)mm vs.(19.6±5.4)mm,t=-5.53,P=0.00;(23.9±5.3)mm vs.(27.4±5.8)mm,t=-5.33,P=0.00],末次随访时部分丢失[(18.2±6.4)mm,t=6.44,P=0.00;(18.2±5.0)mm,t=4.87,P=0.00;(26.2±5.4)mm,t=4.70,P=0.00]。Cobb角术后第1天明显减小(16.7°±7.4°vs.13.1°±5.5°,t=4.39,P=0.00),末次随访时部分丢失(16.2°±5.7°,t=-5.77,P=0.00)。结论网袋加压椎体成形术治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折能显著缓解疼痛,有效恢复椎体高度。
- 王孝林权正学王南罗小辑
- 关键词:骨质疏松症压缩性骨折
- Notch信号转导通路在成骨发生中的作用
- 2014年
- Notch信号转导通路是细胞间通讯的一种重要方式,它广泛分布于无脊椎动物和脊椎动物中,起着决定细胞命运的作用。调控了包括细胞分化、增殖和凋亡等活动,并参与了机体的病理生理过程。本文结合最新研究进展,重点综述了Notch信号在成骨方面上起到的重要作用。
- 唐大刚高天乐王淼张艳亮罗小辑
- 关键词:NOTCH信号通路成骨细胞成骨分化
- 骶髂关节疼痛的临床表现、诊断及治疗被引量:10
- 2015年
- 骶髂关节疼痛作为下腰痛的一个病因,目前尚未被证实,其发病率在10%~60%,平均发病率为25%[1]。目前骶髂关节疼痛尚缺乏明确的定义,结合大多数参考文献,骶髂关节疼痛是指由于骶髂关节炎症、创伤、退行性改变及妊娠等因素引起的以髂后上棘区域疼痛为主的一组临床症状,包括骶髂关节功能障碍、骶髂关节综合征、骶髂关节障碍、骶髂关节炎。
- 张艳亮高天乐唐大刚王淼罗小辑
- 关键词:骶髂关节炎关节疼痛关节功能障碍退行性改变
- miRNA在干细胞成骨分化中的调控作用被引量:5
- 2015年
- MicroRNA(miRNA)即微小RNA,是广泛存在于真核生物中的一类非蛋白基因表达调控因子;干细胞的成骨分化是一系列基因程序表达、精确调控的结果;而近年来研究证明,干细胞的成骨分化受到miRNA的严格调控,干细胞成骨分化的主要信号通路及相关转录因子均受到miRNA的调控。本文就miRNA对BMPs/TGFβ、Wnt/β-catenin等干细胞成骨分化的主要信号通路的调控作用及机制、miRNA对Runx2、Osterix等成骨分化的特征性下游转录因子的调控机制作一综述。目前如何可控制地使干细胞定向成骨分化是组织工程医学的热点,而研究miRNA在成骨分化过程中的调控作用将为这一问题提供新的解决思路和策略。
- 王淼罗小辑唐大刚高天乐张艳亮
- 关键词:MIRNA干细胞成骨分化信号通路转录因子