国家科技支撑计划(2007BAD48B02-3)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 相关作者:易小平张春发邓柳红苏震肖苏生更多>>
- 相关机构:中国热带农业科学院海南大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 原核表达Cry3Aa蛋白对椰心叶甲的杀虫活性被引量:4
- 2009年
- 椰心叶甲是近年来传入我国的危险性有害生物,严重危害了我国海南省、广东省、台湾省和香港地区的椰子、槟榔等棕榈科植物,并有蔓延趋势,。BtCry3Aa毒蛋白对鞘翅目害虫有较强的杀虫活性。本研究首次发现大肠杆菌原核表达的Cry3Aa重组蛋白对椰心叶甲成虫具有快速杀灭作用,工程菌表达的包涵体重组蛋白处理叶片,饲喂椰心叶甲成虫,浓度为2.0mg/mL时,24h內死亡率为100%。一次性饲喂处理24h、48h和72h的LC50分别为0.7516mg/mL、0.4755mg/mL和0.3714mg/mL,连续性饲喂即使低浓度也达到较高死亡率。本试验结果为cry3Aa基因在转基因技术方面的应用或研发生物农药防治椰心叶甲害虫提供了重要的理论与技术支撑。
- 苏震邓柳红易小平肖苏生张春发
- 关键词:椰心叶甲包涵体
- 椰心叶甲的生物防治被引量:4
- 2009年
- 椰心叶甲是近年来传入我国的危险性有害生物。1994年,我国内陆将椰心叶甲列为禁止入境的二类植物检疫危险性害虫。目前椰心叶甲在我国海南省、广东省、台湾省和香港地区危害严重并有蔓延趋势,严重危害了椰子、槟榔等棕榈科植物。针对椰心叶甲的危害特征,在实际防治应用中,化学防治,物理防治等方法不能起到很好的效果,生物防治是比较重要的防治方法。本文综述了对于椰心叶甲生物防治常用的几种防治方法:释放寄生蜂、病源微生物和生物农药等。椰心叶甲的生物学防治措施,关键是开发新的防治措施和提高现有方法的防治技术,达到持续有效控制。
- 苏震邓柳红易小平肖苏生张春发
- 关键词:椰心叶甲生物防治寄生蜂绿僵菌
- AcNPV polyhedrin与cry3Aa基因的重组与重组融合蛋白在大肠菌中的表达
- 2008年
- 目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。
- 高博邓柳红易小平张春发
- 关键词:BTACNPVPOLYHEDRIN