国家重点基础研究发展计划(2009CB218900)
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 相关作者：陈平波墨青青陈刚王蓓蓓翁丹卉更多>>
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- 乳腺癌相关成纤维细胞的分离培养及鉴定
- 2011年
- 目的:分离培养和鉴定乳腺癌相关成纤维细胞及其与之配对的正常乳腺成纤维细胞,并初步探讨两者生物学性状的差异。方法:用胶原酶消化法获得原代乳腺癌相关成纤维细胞及其与之配对的正常乳腺成纤维细胞,通过显微镜观察细胞形态,免疫荧光观测上皮细胞和成纤维细胞标记,MTT及Western检测两者之间生物学性状差异。结果:分离得到乳腺癌相关成纤维细胞及其与之配对的正常乳腺成纤维细胞,两者均高表达Vimentin低表达cytokeratin,且两者在形态及生物学性状有一定差异。结论:与配对成纤维细胞相比,乳腺癌相关成纤维细胞高表达α-SMA,且增殖能力增强。
- 陈平波墨青青王蓓蓓翁丹卉吴鹏陈刚
- 关键词：乳腺肿瘤成纤维细胞
- H2B-RFP融合蛋白在观测肿瘤活细胞有丝分裂中的应用被引量：1
- 2011年
- 目的:肿瘤细胞染色体分裂异常是导致肿瘤基因组不稳定的根本原因,这种不稳定性促进了肿瘤的进展和恶化。本文旨在探讨H2B-RFP融合蛋白能够更好地观测肿瘤活细胞有丝分裂过程。方法:将携带H2B-RFP融合基因的质粒瞬时转染人宫颈癌细胞系Hela并利用抗性药物筛选得到阳性细胞克隆,利用激光共聚焦显微镜活细胞培养系统记录稳定筛选Hela细胞的细胞周期。结果:得到稳定表达H2B-RFP的Hela细胞且其与亲本Hela细胞相比对细胞周期的运行没有影响,并且可以展示Hela细胞有丝分裂的进程。结论:H2B-RFP融合蛋白可以非常敏感地显示肿瘤细胞的染色体并跟踪活体状态下肿瘤细胞有丝分裂过程。
- 陈平波墨青青王蓓蓓翁丹卉吴鹏陈刚
- 关键词：红色荧光蛋白有丝分裂
- MiR-133通过RHOA蛋白调节乳腺癌细胞系MCF-7的侵袭转移被引量：11
- 2010年
- 目的:探讨miR-133通过调节RHOA蛋白的表达对乳腺癌低转移细胞系MCF-7侵袭转移能力的影响。方法:(1)将has-miR-133a inhibitor经脂质体包裹转入MCF-7细胞,以Negative control作为阴性对照,未做任何处理的细胞作为空白对照。(2)通过qRT-PCR检测转染has-miR-133a inhibitor后细胞中miR-133的表达情况。(3)Transwell试验检测miR-133对于细胞迁移能力的影响。(4)细胞免疫荧光观察miR-133对于细胞骨架形态的影响。(5)Western blot检测miR-133对于RHOA蛋白表达的影响。结果:(1)转染has-miR-133a inhibitor后细胞中miR-133的表达较对照组明显减低。(2)Transwell试验结果表明抑制miR-133后可以增加细胞的迁移能力。(3)细胞免疫荧光结果提示抑制miR-133后细胞骨架形态发生明显改变,细胞具有较强的侵袭转移特性。(4)Western blot结果提示抑制miR-133后RHOA的表达较两个对照组明显上调。结论:miR-133可以通过调控RHOA蛋白的表达来抑制乳腺癌细胞系MCF-7的侵袭转移。
- 墨青青陈平波卢运萍马丁
- 关键词：乳腺肿瘤RHOA蛋白
