甘肃省科技重大专项计划(092NKU032)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：张强李健赵志荀吴国华颜新敏更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 山羊痘病毒RPO30基因绿色荧光蛋白质粒的构建及融合表达被引量：1
- 2011年
- 为了研究针对山羊痘病毒RPO30的siRNAs的干扰效果,构建了RPO30基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。通过对RPO30基因进行PCR扩增,克隆入表达载体pEGFP-N1,并进行双酶切及测序鉴定;将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和RPO30基因的转录水平。结果显示,获得的目的基因片段大小与预期结果相符,该基因与Gen-Bank数据库中RPO30基因序列的同源性为97%。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,转染后第48小时,阳性细胞率达到80.1%;经RT-PCR检测,细胞内有RPO30基因的转录。证实,已成功构建了RPO30基因与EGFP基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。
- 赵志荀吴国华颜新敏崔力凡李健朱海霞张强
- 关键词：山羊痘病毒增强型绿色荧光蛋白
