广东省科技计划工业攻关项目(2003C50204)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 类橡胶蛋白AbAMP1的重组表达及其抑菌活性研究
- 2008年
- 将类橡胶蛋白AbAMP1基因克隆至pPIC9,获得重组载体pPIC9-Ab,线性化后转化Pichia pastoris SMD1163,筛选获得阳性转化子。取表型为Mut~*的转化子AS16进行诱导表达,上清经Tricine-SDS-PAGE分析,在约4.7 kD处有一条较强主带,与AbAMP1的预期大小相符,表明获得高效表达。上清经酸性非变性电泳后,用凝胶琼脂糖弥散法测定其抑菌活性,在含Bacillus thuringiensis琼脂糖平板AbAMP1对应处有一明显抑菌带,说明重组表达的AbAMP1具有天然活性。上清液抑菌活性试验显示,AbAMP1对Fusarium oxysporum f.sp.cubense以及B.thuringiensis, B.subtilis,Staphylococcus aureus等G^+细菌均有显著的抑制作用,而对其它供试丝状真菌、酵母菌以及G^-细菌无明显抑制作用。
- 邓名荣龙良鲲朱红惠曲新勇
- 关键词：抑菌活性
- 植物防御素PD5基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量：3
- 2006年
- 将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的XholⅠ和EcoRⅠ位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5。pPIC9/PD5经BglⅡ线性化,电转化法转入PichiapastorisGS115,MD和MM平板筛选表型为His+MutS的转化子,PCR鉴定阳性转化子。转化子D24用BMGY培养至OD600为6·0时,经BMM诱导,上清液用Tricien-SDS-PAGE可检测到目标条带。同时经平板抑菌试验显示,D24的诱导发酵上清液可很好的抑制香蕉枯萎菌(Fusariumoxysporumf·sp·Cubense)及甘蓝黑腐菌Xanthomonacampestris(Smith)Dovosen的生长。植物防御素PD5基因在毕赤酵母中得到表达。
- 龙良鲲邓名荣曲新勇朱红惠
- 关键词：植物防御素分泌表达抑菌活性
