上海市科学技术发展基金(064119512)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：杜祥周晓燕颜歌邹丽萍罗建民更多>>
- 相关机构：复旦大学附属肿瘤医院上海市第一人民医院上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结直肠癌组织及细胞株中分泌型卷曲相关蛋白家族的甲基化研究
- 2009年
- 目的研究分泌型卷曲相关蛋白（SFRP）基因启动子区CpG岛甲基化与结直肠癌的关系。方法采用甲基化特异性PcR（MsP）技术检测20对结直肠癌及相应癌旁组织中SFRP基因启动子区CpG岛甲基化状况，T—A克隆测序验证MSP产物。5氮杂-2＇-脱氧胞苷对结直肠癌细胞株HCT116、SW480进行去甲基化处理，MSP和Western印迹法分别检测细胞株中SFRP基因甲基化和蛋白表达。结果SFRP1、2、4、5在结直肠癌中甲基化率分别为19／20、17／20、3／20、13／20，癌旁组织中分别为12／20、8／12、1／20、7／20。结直肠癌中SFRP1、2、5甲基化率均高于癌旁组织，差异有统计学意义（P〈0．05）。HCT116细胞株SFRP1、2、4、5基因均发生甲基化，而SW480细胞株中仅SFRPI和SFRP2出现启动子甲基化。SFRP蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关，经5-氮杂-2＇-脱氧胞苷处理后能有效恢复SFRP蛋白表达。结论SFRP1、2、5甲基化可能与结直肠癌的发生有关，SFRP基因甲基化与其表达失活密切相关。
- 黄丹于彬覃文新黄朝晖盛伟琪彭之磊倪淑娟杜祥
- 关键词：结直肠肿瘤分泌型卷曲相关蛋白甲基化
- 散发性结直肠癌组织中ezrin mRNA的表达及临床意义被引量：1
- 2008年
- 目的研究散发性结直肠癌（SCRC）组织中ezrin mRNA的表达，探讨其在SCRC发生发展中的作用以及与ezrin蛋白表达部位、临床病理参数之间的关系。方法运用TaqMan实时逆转录-聚合酶链反应（real—time RT—PCR）技术检测132例SCRC患者的肿瘤组织及43例患者的癌旁正常组织中ezrinmRNA的表达；免疫组化法检测相应组织中ezrin蛋白的表达。结果SCRC组织中ezrinmRNA含量和ezrin蛋白表达阳性率均显著高于癌旁正常组织（P〈0．05）；转移组ezrinmRNA含量和ezrin蛋白表达阳性率均高于未转移组（P〈0．05）。转移组胞膜为主型ezrin蛋白表达阳性率（31．1％）显著高于未转移组（6．9％，P=0．0006）；转移组胞浆为主型ezrin蛋白表达阳性率（55．4％）与未转移组（63．8％）的差异无统计学意义（P〉0．05）；胞膜为主型组ezrinmRNA含量与胞浆为主型组的差异无统计学意义（P〉0．05）。年龄〈50岁组ezrinmRNA含量高于年龄≥50岁组（P=0．016）；右半结肠组胞膜为主型ezrin蛋白表达阳性率显著高于左半结肠和直肠（P=0．0003），左半结肠组胞浆为主型ezrin蛋白表达阳性率显著高于右半结肠和直肠（P=0．004）。ezrinmRNA、ezrin蛋自在SCRC中的表达与性别、肿瘤大小、侵袭程度、分化程度均无关（P〉0．05）。结论ezrinmRNA和ezrin蛋白表达的增高与SCRC的发生发展密切相关；ezrin蛋白表达从胞浆到胞膜的移位在肿瘤转移中可能起着重要作用；ezrinmRNA含量可能与患者年龄相关，ezrin表达部位可能与SCRC发生部位相关。ezrinmRNA、ezrin蛋白水平及表达部位可能成为临床判断SCRC预后的重要参考指标。
- 颜歌周晓燕覃业军肖秀英张瑰红杜祥
- 关键词：结直肠肿瘤EZRINMRNAEZRIN免疫组织化学
- 小干扰RNA靶向抑制埃兹蛋白对肠癌细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨细胞膜与细胞骨架连接的埃兹蛋白(Ezrin)对肠癌细胞生长和侵袭转移能力的影响。方法:选取肠癌细胞系(Lovo,SW480)作为研究材料,采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)方法下调Ezrin的表达,分别通过实时荧光定量PCR和Western印迹法检测siRNA对Ezrin mRNA和蛋白表达水平的下调及下调作用随干扰时间的变化。根据Western印迹法检测结果,选取Ezrin蛋白表达最低的时间点检测干扰后肠癌细胞生物学行为的改变。运用CCK-8法检测2株细胞干扰前后增殖能力的改变,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell实验检测肠癌细胞侵袭和转移能力的变化。结果:实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示,Ezrin siRNA对Ezrin mRNA和蛋白表达水平均有显著的下调作用。下调Ezrin蛋白后,2株肠癌细胞S期细胞比例略有下降,G1期细胞比例略有上升,与对照组比差异无统计学意义(P>0.05);2株细胞凋亡指数增加,与对照组比差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤细胞的运动侵袭能力下降,穿过人工基底膜的细胞数量明显减少,与干扰前比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Ezrin在肠癌生长和侵袭转移过程中发挥重要作用,有可能成为抑制肠癌发生发展的新靶点。
- 颜歌周晓燕邹丽萍杨银龙祝蕾罗建民杜祥
- 关键词：肠肿瘤
