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“十五”国家科技攻关计划(2002BA518A24)

作品数:2 被引量:27H指数:2
相关作者:谭亚娣张桂荣陈焕春晁彦杰陈颖钰更多>>
相关机构:华中农业大学武汉市蔬菜科学研究所更多>>
发文基金:武汉市科技攻关计划项目国家科技重大专项更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇抗体
  • 2篇ELISA
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇单克隆抗体制...
  • 1篇原核表达
  • 1篇牛分枝杆菌
  • 1篇抗体方法
  • 1篇抗体制备
  • 1篇克隆
  • 1篇间接ELIS...
  • 1篇检疫
  • 1篇杆菌
  • 1篇ELISA检...
  • 1篇IFN-Γ
  • 1篇MPB70

机构

  • 2篇华中农业大学
  • 1篇武汉市蔬菜科...

作者

  • 2篇钦博
  • 2篇郭爱珍
  • 2篇陈颖钰
  • 2篇晁彦杰
  • 2篇陈焕春
  • 2篇张桂荣
  • 2篇谭亚娣
  • 1篇万学济
  • 1篇李川
  • 1篇吴波
  • 1篇吕文
  • 1篇胡巧云

传媒

  • 1篇生物工程学报
  • 1篇中国预防兽医...

年份

  • 2篇2007
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用被引量:9
2007年
针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。
张桂荣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春谭亚娣
关键词:牛分枝杆菌ELISAMPB70检疫
牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立被引量:22
2007年
实验旨在建立牛重组IFN-γ(BovIFN-γ)的ELISA检测技术,为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞,从培养细胞中提取总RNA,经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA,进一步克隆至pET28a,转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出预期大小(18kD左右)组氨酸标记蛋白,经鉴定为BovIFN-γ;以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1,腹水效价在1:2^10×100~1:2^11×100之间。Western-blot分析显示,4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明,4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应,而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗免IgG,建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明,此方法检测敏感性达到2ng/mL,特异性良好,为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。
李川谭亚娣陈颖钰胡巧云马艳张桂荣钦博晁彦杰陈焕春郭爱珍
关键词:单克隆抗体ELISA克隆
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