国家自然科学基金(30600254)
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 相关作者：林吉进沈秀张武君黄瑞燕邝素娟更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第一附属医院广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学水利工程天文地球更多>>
- HERG基因转染HEK293细胞及其编码通道电流的记录被引量：1
- 2008年
- 目的建立HERG基因在HEK293细胞稳定表达的方法。方法利用Lipofectamine2000将pCDNA3.0-HERG转染进入HEK293细胞,通过G418筛选阳性克隆细胞系,采用免疫荧光细胞化学方法检测该蛋白的表达,用全细胞膜片钳技术测定HERG基因介导的快速激活延迟整流钾电流(Ikr)。结果免疫荧光细胞化学检测证实转染HEK293细胞中HERG通道蛋白的表达,膜片钳全细胞实验记录到Ikr。结论该方法有效地将HERG基因转染进入HEK293细胞,并稳定表达HERG通道蛋白及介导Ikr。
- 邝素娟林吉进林曙光邓春玉余细勇吴书林单志新杨敏
- 关键词：电生理学长QT综合征HERG基因
- 心肌肥厚时延迟性整流钾电流研究进展
- 2010年
- 心肌肥厚是心肌长期负荷过度引起的一种适应性病理改变，其心肌细胞的变化，不仅是细胞体积增大的过程，也伴有心肌细胞离子通道、离子流及膜电位的变化，肥厚心肌细胞这种电生理特性的改变称为电重构。心肌肥厚最突出的电重构表现是动作电位复极延长，它是产生各种心律失常的电生理学基础。
- 胡创加林吉进闫纯英
- 关键词：心肌肥厚心肌细胞离子通道延迟性电生理特性生理学基础病理改变
- 蛋白质与蛋白质相互作用研究技术被引量：9
- 2008年
- 蛋白质-蛋白质相互作用的研究是蛋白质组学的重要内容,随着研究的深入,促进了研究技术的发展和完善。本文将对研究蛋白质相互作用的技术一酵母双杂交、化学能量共振能量转移、双分子荧光互补技术、荧光能量转移技术、生物分子相互作用分析技术、蛋白质芯片等技术的特点及应用做一综述。
- 武君沈秀张林吉进
- 关键词：蛋白质组学蛋白质-蛋白质相互作用酵母双杂交
- 磷酸化对HERG钾通道的调控作用
- 2009年
- HERG(human ether-a-go-go-related gene)编码的钾通道介导快速激活延迟整流钾电流(IKr)。IKr在心肌动作电位复极中发挥极其关键的作用,IKr的减弱可延长心肌动作电位时程,导致长QT综合征(LQTS)。HERG突变和HERG钾通道的药物性阻滞是LQTS的常见原因之一。心脏HERG钾通道功能受众多因素的调控,该通道的磷酸化是重要的调控因素之一。现有报道证实HERG钾通道的调节由蛋白激酶(protein kinases A、C和protein tyrosine kinases Src等)介导完成。
- 黄瑞燕林吉进
- 关键词：HERG蛋白激酶
- 与HERG钾通道相互作用的FHL2蛋白对该通道功能的调控被引量：1
- 2009年
- 目的筛选与心脏人类果蝇相关基因(HERG)的编码蛋白钾通道存在相互作用的蛋白质,并进一步研究该相互作用蛋白对HERG钾通道的调控作用。方法①以带有编码人类心脏HERG钾通道的cDNA为模板,通过PCR方法得到编码人类心脏HERG钾通道氨基末端(404个氨基酸)的DNA片段。将该片段克隆入pGBKT7载体,构建"诱饵"质粒pGBKT7-HERG-NT。②应用酵母双杂交技术筛选人类心脏cDNA文库。③以PCR法扩增4个半LIM结构域(FHL2)基因的开放读框片段(ORF),并克隆入pcDNA3.0载体。④以pcDNA3.0-herg转染HEK293细胞,应用G418筛选得到HEK293/HERG细胞株。以pcDNA3.0-FHL2转染HEK293细胞,筛选得到HEK293/FHL2细胞株后,再将pcDNA3.0-herg转染入该细胞株。⑤应用膜片钳技术,研究FHL2对HERG通道功能的影响。结果①用酵母双杂交技术筛选得到37个阳性克隆,其中含有表达FHL2蛋白的克隆。②膜片钳检测发现,FHL2蛋白在增加HERG电流幅度的同时并调节其激活过程。结论FHL2蛋白能与HERG氨基末端相互作用而影响HERG钾通道的功能。
- 沈秀张林吉进武君黄瑞燕
- 关键词：酵母双杂交HERGFHL2膜片钳技术
