国家自然科学基金(30600259)
- 作品数：9 被引量：83H指数：6
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- TAE和MAE方案治疗复发难治性急性白血病的前瞻性随机对照研究被引量：4
- 2010年
- 急性白血病（AL）是血液科常见恶性疾病，常规一线化疗方案可获得60％～70％的完全缓解率^[1]，复发难治者应用二线化疗方案。TAE（吡柔比星＋阿糖胞苷＋足叶乙甙）和MAE（米托蒽醌＋阿糖胞苷＋足叶乙甙）方案是目前常用的二线化疗方案，但上述两方案尚缺乏前瞻性随机对照研究，我们采用随机对照研究方法，对40例AL患者进行了研究，现将结果报告如下。
- 王艳丽秦平陈峰赵川莉宋强纪春岩朱愿超陈晨侯明
- 关键词：复发难治性急性白血病前瞻性随机对照研究TAE一线化疗方案足叶乙甙
- 人源化抗血小板膜糖蛋白Ⅵ单链抗体的研究
- 2009年
- 目的用噬菌体抗体库技术研究抑制血小板聚集功能的人源化抗血小板膜糖蛋白（GP）Ⅵ单链抗体。方法从特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血浆中用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA）技术和血小板聚集实验筛选出抑制血小板聚集的抗血小板GPⅥ自身抗体。从抗GPⅥ自身抗体阳性患者外周血淋巴细胞中提取mRNA，用RT—PCR扩增出人免疫球蛋白重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因片段，用连接DNA将VH和VL连接成单链抗体（ScFv）基因片段。用限制性内切酶SfiⅠ／NotⅠ酶切ScFv基因片段后克隆到噬菌体载体pHEN2，然后转化大肠杆菌TGI。用辅助噬菌体M13K07援救转化后的TG1，产生单链抗体。用抗原吸附法经过5轮吸附→洗脱→富集，得到纯化的抗GPⅥ单链抗体，并研究其对血小板聚集功能的影响。结果806例慢性ITP患者中11例（1．36％）血浆中抗GPⅥ自身抗体阳性，2例（0．24％）明显抑制胶原诱导的血小板聚集功能。扩增出380—400bp大小的VH和VL基因，用连接肽（Gly4Set）3成功地连接成约800bp大小的ScFv基因片段。将ScFv克隆到pHEN2并转化大肠杆菌TG1后，形成4．1×10^7个克隆。用辅助噬菌体M13K07援救TG1后产生的抗体滴度为2．62×10^10 cfu／ml。亲和层析后得到的纯化抗体可抑制胶原诱导的血小板聚集而对二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集无明显影响。结论利用噬菌体抗体库技术表达的人源化抗血小板GPⅥ抗体ScFv片段可抑制血小板聚集功能。
- 冀学斌侯明张春青石艳彭军初晓霞马道新李丽珍
- 关键词：血小板聚集噬菌体抗体库技术
- 大剂量地塞米松对特发性血小板减少性紫癜患者B细胞活化因子及调节性T细胞的影响被引量：15
- 2010年
- 目的研究大剂量地塞米松治疗前后特发性血小板减少性紫瘕（ITP）患者B细胞活化因子（BAFF）和调节性T（Treg）细胞的变化，以及BAFF对Treg细胞的作用。方法用ELISA方法检测21例慢性活动性ITP患者治疗前后血浆BAFF水平；用流式细胞术检测患者治疗前后及外周血单个核细胞培养体系中Treg细胞的比例。结果治疗前ITP患者的BAFF水平[（599．70±199．40）pg／m1]较正常对照[（454．50±132．50）pg／m1]明显升高（P〈0．05），Treg细胞比例明显降低[（1．56±6．73）％]（P〈0．01）；大剂量地塞米松治疗后，ITP患者的BAFF水平[（296．9±119．7）pg／ml]较治疗前明显下降（P〈0．01），且低于正常对照组（P〈0．01）；Treg细胞比例明显升高[（5．94±2．22）％]（P〈0．01），且高于正常对照[（4．08±1．08）％]（P〈0．01）。ITP患者BAFF水平和Treg比例与血小板计数无相关性（P〉0．05）。体外实验显示，rhBAFF0组和rhBAFF20组Treg数量无明显改变（P〉0．05）。结论慢性ITP患者的BAFF水平增高，Treg细胞数量减少。大剂量地塞米松可降低患者的BAFF水平，增加Treg细胞的数量。BAFF对Treg细胞无明显影响。
- 王春燕朱效娟侯明石艳彭军孙建芝秦平冀学斌王琳王谦
- 关键词：地塞米松B细胞活化因子调节性T细胞
- 特发性血小板减少性紫癜和骨髓增生异常综合征NRAS与FMS基因突变的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）的发病机制并探讨其与骨髓增生异常综合征（MDS）的鉴别诊断。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）方法检测MDS患者突变频率较高的NRAS基因12、13密码子及FMS基因301、969密码子点突变在中老年ITP患者及MDS患者中的出现频率。结果25例ITP患者中有1例存在NRAS基因突变，1例存在FMS基因301密码子突变；8例MDS患者中有3例出现基因突变，其中2例为NRAS基因突变，1例为FMS基因突变。结论PCR-SSCP方法检测NRAS基因12、13密码子，FMS基因301、969密码子突变有可能用于鉴别诊断ITP与MDS，ITP患者中出现NRAS基因、FMS基因突变者应归入MDS。
- 赵红玉侯明李小芳马道新刘奇迹王频
- 关键词：骨髓增生异常综合征
- 流式微球技术检测糖蛋白Ⅱb／Ⅲa自身抗体在特发性血小板减少性紫癜诊断中的应用被引量：9
- 2008年
- 目的建立流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（GPⅡb／Ⅲa）特异性自身抗体的方法，比较该方法和改良间接单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）与非免疫性血小板减少性紫癜鉴别诊断中的价值。方法应用抗人血小板GPⅡb／Ⅲa单抗（CD41a）包被微球。分离血小板，将血小板裂解后与包被过的微球孵育，再加入PE标记的羊抗人IgG多克隆抗体，流式细胞术分析。分别用该方法和改良间接MAIPA检测血小板表面和血浆中的糖蛋白特异性自身抗体，并将检测结果进行比较。结果将样本的平均荧光强度值（MFI）与正常对照MFI的均值比较，计算比率。该比率均值及范围在ITP组为3．36（0．84～22．94），非免疫性血小板减少组为1．16（0．67～5．59），正常对照组为1．08（0．72～1.76）。非参数检验得ITP组荧光强度比率与非免疫性血小板减少组及正常对照组存在显著差异（P〈0．01）。若将正常对照组上限作为界值，比率大于1．76定为阳性，则流式微球技术诊断ITP的敏感性为71．43％，特异性为94．28％，阳性预测值为95．24％，其敏感性高于改良间接MAIPA的测定值（51．79％）（x^2=4．57，P〈0．05）。由ROC曲线得流式微球法区分ITP患者与正常人的鉴别效度为0．916。结论流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白特异性自身抗体，耗时短、重复性好，敏感性高于改良间接MAIPA，对提高ITP的实验诊断水平及指导临床治疗有一定的价值。
- 刘新光王燕铭侯明张锑朱媛媛彭军
- 关键词：流式微球技术
- 利妥昔单抗治疗糖皮质激素无效的特发性血小板减少性紫癜疗效观察被引量：9
- 2008年
- 目的探讨利妥昔单抗治疗特发性血小板减少性紫癜（ITP）的疗效、安全性及治疗前后B细胞、血小板膜糖蛋白（GP）特异性自身抗体的变化。方法利妥昔单抗（375mg／m^2，每周1次，连用4周）治疗12例糖皮质激素治疗无效的ITP患者，监测治疗前后的血常规、血清免疫球蛋白定量（IgG、IgM、IgA）、血小板GPⅡb／Ⅲa和（或）GPⅠb／Ⅸ特异性自身抗体、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD19^＋、CD20^＋细胞数。结果4例完全有效，3例部分有效，2例微效，3例无效。随访中位时间5（0．5～12）个月，疗效均维持较好。有效患者治疗后血小板自身抗体均转阴。治疗前后血清IgG、IgM、IgA无明显变化，CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数无明显变化。治疗后CD19^＋／CD20^＋细胞数（4．1±2．2）×10^6／L与治疗前（295．0±86．4）×10^6／L比较明显下降（P〈0．01）。无严重不良反应。结论利妥昔单抗治疗糖皮质激素无效的ITP患者安全、有效。
- 王文俞庆宏张海燕初晓霞陈峰张春青周郁鸿侯明
- 关键词：利妥昔单抗
- 连续2个周期大剂量地塞米松治疗成人原发免疫性血小板减少症的疗效和安全性被引量：15
- 2011年
- 目的 观察连续2个周期大剂量地塞米松对成人新诊断的原发免疫性血小板减少症（ITP）患者的疗效及安全性.方法 将59例新诊断的ITP患者随机分为两组,地塞米松治疗组30例,地塞米松40 mg/d,连用4 d,7 d后再重复1个周期,以后不进行维持治疗;泼尼松治疗组29例,1.0～1.5 mg·kg-1·d-1口服,连用4周后逐渐减量.观察二组间的近、远期疗效和安全性.结果 近期疗效：治疗后第1、2周地塞米松组有效率明显高于泼尼松组（50.0%比24.1%,73.3%比55.2%,P值分别＜0.01和0.05）,治疗后第3周有效率仍高于泼尼松组,但差异无统计学意义（83.3%比68.9%,P＞0.05）.远期疗效：随访3个月,除第1个月地塞米松组复发率与泼尼松组差异无统计学意义（16.0%比20.0%,P＞0.05）,第2、3个月地塞米松组复发率均明显低于泼尼松组（24.0%比40.0%,32.0%比65.0%,P值分别＜0.05和0.01）.地塞米松组不良反应轻微,无1例并发感染及出现库欣综合征.结论 大剂量地塞米松治疗ITP的近、远期疗效均优于常规制量泼尼松且安全性好.
- 崔中光魏昱侯明赵洪国汪洪毅
- 关键词：地塞米松泼尼松
- IL-18及其受体在特发性血小板减少性紫癜患者Th1类细胞优势应答中的作用被引量：8
- 2009年
- 目的探讨白细胞介素18（IL-18）及其受体（IL-18R）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者Th1类细胞因子优势应答中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测15例活动期和18例缓解期ITP患者外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子T-bet和GATA-3mRNA的表达；应用ELISA法检测血浆中IL-18的变化；应用流式细胞术检测CD3^＋细胞和淋巴细胞表面IL-18R的表达。13名健康志愿者为正常对照。结果ITP活动期患者PBMNC中T-betmRNA表达水平（0．069±0．013）明显高于对照组（0．019±0．010）（P〈0．05），而GATA-3mRNA的表达水平（0．002±0．001）明显低于对照组（0．005±0．002）（P〈0．05）；血浆IL-18和CD3^＋细胞表面IL-18R表达水平较ITP缓解期患者和对照组显著增高。ITP缓解期患者T-bet与GATA-3mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05），T-bet／GATA-3比例基本恢复正常，血浆中IL-18和CD3^＋细胞表面IL．18R的表达水平也基本恢复正常。结论ITP活动期患者表现为Th1优势应答，T-bet／GATA-3比例明显失衡，T-bet／GATA-3比例可作为ITP患者Thl类细胞极化的敏感指标；ITP活动期患者IL一18和IL-18R表达上调，可能为ITP患者的治疗提供一个新的治疗靶点。
- 王谦杨晓静单宁宁侯明冀学斌王春燕朱效娟杨蕾张晓琳彭军马道新石艳
- 关键词：紫癜转录因子T-BET转录因子GATA-3白细胞介素-18白细胞介素18
- 标准剂量利妥昔单抗治疗复发难治性原发免疫性血小板减少症的临床研究被引量：25
- 2011年
- 目的探讨标准剂量利妥昔单抗治疗复发难治性原发免疫性血小板减少症（ITP）的疗效、安全性及治疗前后B细胞、血小板膜糖蛋白特异性自身抗体的变化。方法利妥昔单抗每周375mg／m^2，静脉滴注，连用4周，治疗31例复发难治性ITP患者，不伴随使用免疫抑制剂、化疗药、抗凝药及激素冲击疗法。监测治疗前后的血常规，血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA），血小板GPⅡb／Ⅲa和（或）GPⅠb／Ⅸ特异性自身抗体及CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD19^＋、CD20^＋细胞数。结果12例完全有效，7例有效，12例无效。中位疗效持续时间6（2—48）个月，有效患者4例复发，其余疗效均维持较好。有效患者治疗后血小板自身抗体均转阴。治疗前后外周血血红蛋白、白细胞计数无明显变化，血清IgG、IgM、IgA无明显变化，CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数无明显变化。治疗后CD19^＋／CD20^＋细胞明显下降。多数患者耐受好。结论利妥昔单抗治疗复发难治性ITP疗效肯定，不良反应可以耐受。
- 朱愿超王文周郁鸿王晓敏王欣王毅丽孙桂珍侯明
