“十五”国家科技攻关计划(2002BA518A04)
- 作品数：31 被引量：167H指数：8
- 相关作者：辛九庆李媛邱昌庆李世宏杨国林更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技支撑计划黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 不同凝固酶基因型牛源金黄色葡萄球菌主要致病因子的检测及分析被引量：3
- 2008年
- 采用PCR的方法对不同凝固酶基因型的30株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的主要致病因子进行检测,包括α溶血素(α-hemolysin)、β溶血素(β-hemolysin)、白细胞毒素F(LukF)、白细胞毒素S(LukS),结果显示:在28株分离株中检测到LukF和LukS;在8株和3株分离株中检测到β、和α溶血素,其分别占分离株的93%、26.7%和10%。这些致病因子在各基因型菌株间的分布并不表现出相关性,而是广泛的分布在各个基因型菌株间。
- 任宪刚朱战波崔莉宋佰芬谭磊崔玉东朴范泽
- 关键词：奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌致病因子凝固酶
- 丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q的N末端定点突变及表达载体的构建
- 2006年
- 根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppQ基因序列设计引物,从MmmSC HVRI X株中扩增出了LppQ N末端基因,并将其分别克隆到pUC18和pUC19上,利用一步重叠延伸PCR突变方法将其66位的TGA突变为TGG,经克隆与序列测定证实突变成功后,将已突变的LppQ N末端基因插入原核表达载体pET32a的多克隆位点,成功地构建了LppQ N末端基因原核表达载体pET32a-LppQ,为其下一步体外表达奠定了基础。
- 高玉龙辛九庆李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎脂蛋白定点突变
- 盐酸环丙沙星在患子宫内膜炎奶牛子宫内给药的药动学研究被引量：2
- 2008年
- 本研究以反相高效液相色谱为定量分析手段,采用5头患子宫内膜炎的奶牛,通过子宫内灌注盐酸环丙沙星(2.5g/头),研究了盐酸环丙沙星在患子宫内膜炎奶牛体内的药代动力学规律。以二氟沙星为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白,离心,经针头式过滤器处理,用反相高效液相法测定其中盐酸环丙沙星的浓度。色谱条件为:ODS-1C18柱;测定流动相为0.015mol/L四丁基溴化铵溶液-乙腈(92∶8,V/V),pH为3.0;流速为1.0mL/min;荧光检测器,激发波长(λex)278nm,发射波长(λem)465nm。通过采用MCPKP房室分析程序,分析血中浓度-时间数据,发现有三头牛血样药时数据符合无吸收三室开放模型。其血样中主要药动学参数为:T1/2α为0.916h、T1/2β为49.20h、AUC高达7.6296mg/(L·h)、Clβ为1.582L/(kg·h)。有两头牛血样药时数据符合一级吸收二室开放模型。其主要药动学参数为:T1/2α为1.26h、T1/2β为10h、AUC高达28.336mg/(L·h)。试验结果表明,盐酸环丙沙星子宫给药吸收快,分布广泛,消除慢。
- 陶金忠杨国林李剑勇李世宏赵兴绪严作庭谢家声巩忠福
- 关键词：盐酸环丙沙星药动学子宫内膜炎奶牛
- 牛源金黄色葡萄球菌凝固酶基因的分型被引量：11
- 2007年
- 为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因(Coa)扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3型为主(10/16)。发现在同一牛群中的分离株可以存在相同的基因型,也可以存在不同的基因型;而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。这种结果提示,在某个或某些牛群中存在某一金黄色葡萄球菌的流行型,但也可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆。
- 朱战波任宪刚崔玉东朴范泽
- 关键词：乳房炎金黄色葡萄球菌
- 奶牛乳房炎链球菌分离株的鉴定及药敏试验被引量：14
- 2007年
- 对从黑龙江省部分奶牛场患乳房炎奶牛乳汁中分离的10株疑似链球菌进行了培养特性、菌落形态、染色特性、生化试验等研究,确定5株为无乳链球菌,3株为停乳链球菌,2株为乳房链球菌。溶血试验结果表明,10株链球菌中有8株出现溶血现象,其中无乳链球菌有3株呈β溶血,2株呈α溶血;停乳链球菌均呈α溶血;乳房链球菌为γ溶血。动物致病性试验结果表明,停乳链球菌BHI培养液腹腔接种小白鼠0.6ml,18～24h后致死率达100%;接种无乳链球菌的小白鼠均有不同程度的发病,但未见死亡;乳房链球菌对小白鼠无致病性。药敏试验结果表明,链球菌对临床上常用的青、链霉素及磺胺类药物均已产生不同程度的耐药性,而红霉素、喹诺酮类药物则表现出较好的抑菌效果。
- 朱战波王红刘宇朱宏伟卢杰谭磊崔莉崔玉东
- 关键词：乳房炎链球菌药敏试验
- 清宫液Ⅱ号抗炎药理学研究被引量：7
- 2005年
- 为研究清宫液Ⅱ号的抗炎药理学作用,在实验室条件下建立了小鼠耳肿胀模型、毛细血管通透性增加模型、足跖肿胀模型和纸片肉芽肿模型等。结果表明,清宫液Ⅱ号对二甲苯引起的小鼠耳壳肿胀、醋酸引起的腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶引起的足跖肿胀及前列腺素E2渗出、纸片引起的肉芽增生都具有明显的抑制作用,提示清宫液Ⅱ号具有良好的抗炎效果。
- 姜巍杨国林杨志强谢家声严作廷李世宏梁纪兰巩忠福
- 关键词：抗炎药理
- 流产布鲁氏菌BCSP31基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达被引量：1
- 2007年
- 设计1对引物,突变除去布鲁氏菌BCSP31(细胞表面蛋白31)基因的N端信号肽氨基酸序列,经NotⅠ和EcoRⅠ酶切后与相同处理的表达载体pGEX-4T-1连接,转化BL21(DE3)感受态细胞。酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性克隆,测序证明其阅读框完全正确。用IPTG诱导表达构建成功的阳性克隆,对产物进行SDS-PAGE和Western-blotting检测,发现表达产物出现预期分子量57 kD的融合蛋白,该蛋白能与牛流产布鲁氏菌阳性血清发生反应,进一步证明目的蛋白主要以可溶性形式存在,表达量约占总蛋白的40%,应用GST琼脂糖凝胶FF纯化可得到纯度较高的表达产物。
- 曹小安邱昌庆周继章蔺国珍
- 关键词：流产布鲁氏菌克隆可溶性表达
- 葡萄球菌GST-mTSST-1融合蛋白的纯化及其免疫活性鉴定
- 2011年
- 将DH5α/pGXmTSST基因工程菌用IPTG诱导表达,经超声波破碎、离心、收集上清再用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱(GS4B)亲和层析纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变GST-mTSST-1融合蛋白.以SDS-PAGE分析该融合蛋白的表达量和纯度,经双向免疫琼脂扩散试验鉴定GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性.结果表明,GST-mTSST-1融合蛋白在重组菌中可溶性表达,通过GS4B胶亲和层析纯化,SDS-PAGE电泳分析得到纯度较高的目的蛋白,其相对分子质量约为47 000,与理论值一致.兔抗GST-mTSST-1抗血清可特异识别天然rTSST-1蛋白中与GST-mTSST-1融合蛋白相对应的抗原组份,证实GST-mTSST-1融合蛋白具有与野生型rTSST-1相同的表面抗原决定簇,具有较好的免疫原性.
- 郭海勇孙文怡刘斯牛雪娇王丽
- 关键词：金黄色葡萄球菌融合蛋白免疫活性纯化
- 奶牛乳房炎大肠杆菌分离株主要免疫原性蛋白纯化
- 2007年
- 应用奶牛乳房炎大肠杆菌分离株灭活菌苗免疫健康家兔,制备兔抗大肠杆菌高免血清。对该大肠杆菌菌体裂解产物进行SDS-PAGE并进行Westernblot分析,结果该菌株与稀释一定倍数的兔高免血清反应,产生3条特异性带,其中约33ku蛋白为主要免疫原性蛋白。对其进行电洗脱纯化,得到单一条带的目的蛋白。
- 辛凤艳侯喜林朴范泽
- 关键词：大肠杆菌外膜蛋白
- 盐酸环丙沙星在子宫内膜炎奶牛乳腺排泄的研究被引量：2
- 2008年
- 通过子宫内灌注盐酸环丙沙星,采用内标法以反相高效液相色谱法测定了4头患子宫内膜炎的奶牛乳汁中盐酸环丙沙星的药物浓度。研究表明,在奶牛给药后0 h^24 h,血药浓度大于乳药浓度,在24 h后,乳药浓度大于血药浓度。在48 h内盐酸环丙沙星的乳药浓度值均高于MIC值,所以仍具有抑菌作用,这对乳房炎的治疗具有重要意义。
- 陶金忠杨国林赵兴绪李剑勇李世宏
- 关键词：盐酸环丙沙星奶牛子宫内膜炎
