国家自然科学基金(30600267)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
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- ClpP粘膜免疫预防小鼠发生肺炎链球菌性肺炎和败血症被引量：3
- 2009年
- 目的:肺炎链球菌毒力蛋白ClpP鼻腔粘膜免疫BALB/c小鼠,探讨其作为肺炎链球菌候选蛋白疫苗的价值。方法:利用制备的ClpP多克隆抗体,分析ClpP在肺炎链球菌表面表达情况;ClpP蛋白粘膜免疫小鼠,TIGR4型肺炎链球菌分别经腹腔和鼻腔攻击,分析肺炎链球菌小鼠肺内定植情况并监测小鼠生存时间。结果:流式细胞技术证实了TIGR4肺炎链球菌表面表达ClpP毒力蛋白,粘膜免疫ClpP可以特异产生系统性和粘膜性的ClpP抗体,并可减少TIGR4肺炎链球菌在小鼠肺内的定植,延长小鼠生存时间。结论:ClpP粘膜免疫可预防小鼠发生肺炎链球菌性肺炎和败血症,进一步证实ClpP蛋白可作为肺炎链球菌的候选蛋白疫苗。
- 陈怡婷曹炬李岱容吴凯峰尹楠林尹一兵
- 关键词：粘膜免疫肺炎链球菌CLPP
- clpE基因缺失对肺炎链球菌毒力的影响被引量：3
- 2009年
- 【目的】探索clpE基因缺失对肺炎链球菌毒力的影响。【方法】用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺失菌株,通过动物实验观察clpE基因缺失株毒力改变情况,同时用细胞实验比较clpE基因缺失株和野生菌对宿主细胞的粘附和侵袭能力,最后用实时荧光定量PCR分析自溶素(major autolysin A,lytA)、表面黏附素A(pneumococcal surface adhesion A,psaA)、溶血素(pneumolysin,ply)、肺炎球菌表面蛋白A(pneumococcal surface protein A,pspA)和神经氨酸酶(neuraminidase,nanA)的表达。【结果】小鼠毒力实验表明野生菌株半数致死时间54h,而缺失株半数致死时间为21d,两者比较有统计学差异(P<0.01);缺失菌在对宿主细胞的粘附能力明显低于野生菌株(P<0.05)。实时荧光定量PCR显示clpE缺失株的五个毒力因子mRNA表达水平均低于野生菌,两者比较有统计学差异(P<0.05);【结论】ClpE通过调控肺炎链球菌多种毒力因子表达,而影响其毒力。
- 张群尹楠林胥文春王虹庞丹杨晓亮尹一兵张雪梅
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子实时荧光定量PCR细菌粘附
- clpP基因缺陷对肺炎链球菌毒力表达降低的研究被引量：5
- 2009年
- 目的探索clpP基因缺陷对肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)毒力的影响。方法用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpP基因,用PCR、Western blot鉴定缺陷菌株,通过RT-PCR分析自溶素(major autoly-sin A,lytA)、表面黏附A(pneumococcal surface adhesion A,psaA)、溶血素(pneumolysin,ply)和胆碱结合蛋白A(cholinebinding protein A,cbpA)的表达,并通过动物实验观察clpP基因缺陷株毒力改变情况。结果RT-PCR显示clpP缺陷株的4个毒力因子mRNA表达水平均低于野生菌,两者比较有统计学差异(P<0.05);小鼠毒力实验表明野生菌株半数致死时间为22h,而缺陷株半数致死时间为8d,两者比较有统计学差异(P<0.01);缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野生菌株(P<0.05)。结论clpP基因缺陷使S.pn多种毒力因子表达减弱,毒力降低。
- 张群胥文春尹一兵朱兴华李有强张雪梅
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子热休克蛋白
- 高渗透压环境下OREBP对AQP5的调控
- 2008年
- 目的:探讨高渗透压环境下OREBP对AQP5的调控作用.方法:利用qRT-PCR和Western Blot,研究高渗透压刺激下,MLE-15细胞OREBP和AQP5的mRNA和蛋白水平的变化规律;运用RNAi技术抑制OREBP表达后,观察AQP5mRNA及蛋白水平随高渗刺激的变化;探讨AQP5基因上游不同区域对Luciferase表达的启动及高渗环境下表达增强作用,用RNAi技术研究这种增强表达作用对OREBP的依赖性.结果:高渗透压刺激下,OREBP和AQP5的mRNA水平在12,18h达到峰值,两者蛋白水平也分别在12,18h达到峰值,RNAi抑制OREBP的表达后,AQP5对高渗的反应性消失.Luciferase实验表明在-593至-144区域内存在启动子,-2563至-2055区域存在ORE.结论:高渗透压环境下,OREBP通过与AQP5基因上游的ORE结合,调控AQP5的表达.
- 许颂霄王虹尹一兵
