河北省卫生厅医学科学研究重点课题(20090055)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：段惠军刘青娟邢玲玲刘淑霞傅淑霞更多>>
- 相关机构：河北医科大学河北医科大学第二医院邯郸市第一医院更多>>
- 发文基金：河北省卫生厅医学科学研究重点课题更多>>
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- 抑瘤素M在肾小管上皮细胞转分化中作用及AG490的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨炎症介质的特异性阻断剂AG490在抑瘤素M(oncostatin M,OSM)诱导的人肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs),随机分为对照组、OSM(10μg.L-1)组、OSM(10μg.L-1)+AG490(10μmol.L-1)。于处理后72h收集细胞,采用免疫细胞化学染色和Western blot法检测细胞角蛋白-18(cytokeratin-18,CK-18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscle actin,α-SMA)水平。ELISA检测细胞培养上清液中FN和ColⅠ的浓度。结果 OSM能促使人肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的合成增加,同时促使HKC分泌FN和ColⅠ增多,而肾小管上皮细胞的标志物CK-18在小管上皮细胞中的表达逐渐减少;AG490干预能减弱OSM对肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的诱导及细胞外基质FN和ColⅠ的分泌作用,同时使CK-18的表达逐渐回升。结论炎症因子OSM能诱导HKC表型转分化并促使细胞外基质的分泌,而炎症特异性阻断剂AG490能部分阻断OSM的该作用。
- 刘青娟邢玲玲刘淑霞郝军曹延萍段惠军
- 关键词：抑瘤素M肾小管上皮细胞AG490小管间质纤维化
- 高糖和LY294002干预影响足细胞内Ⅳ型胶原表达被引量：1
- 2011年
- 探讨高糖和PI3K/Akt通路对足细胞内Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)表达的影响。体外培养小鼠足细胞,给予高糖(30mmol/L)处理后,分别于0,12,24,48h收集细胞,采用免疫细胞化学染色法和Western blot技术检测Col Ⅳ的表达;Western blot技术检测Akt的活化及LY294002对Col Ⅳ表达的抑制效应。结果表明,高糖诱导足细胞内Col Ⅳ蛋白表达增多,24h明显,各时间点与高糖刺激前相比均有统计学差异(P<0.05);高糖激活Akt蛋白磷酸化,p-Akt随刺激时间延长表达增多。PI3K/Akt通路抑制剂LY294002孵育细胞24h后,可减弱高糖诱导的足细胞内Col Ⅳ的表达(P<0.05)。因此,高糖可能通过激活PI3K/Akt通路上调足细胞内Ⅳ型胶原表达。
- 邢玲玲刘青娟傅淑霞曹延萍刘巍段惠军
- 关键词：足细胞
- 细胞因子信号传导抑制蛋白1对抑瘤素M诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：1
- 2011年
- 观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(suppressors of cytokine signaling,SOCS-1)对抑瘤素M(oncostatin M,OSM)诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响。体外培养人肾近曲小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆,应用OSM(10ng/mL)进行刺激。培养48h后收集细胞及上清液,分别采用Western蛋白印迹检测细胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、SOCS-1和磷酸化信号转导及转录激活因子1(phospho-signal transducers and activators of transcription,p-STAT1)的表达;采用酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中Ⅰ型胶原(collagen I,Col I)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的分泌;采用逆转录-聚合酶链反应检测CK18、α-SMA mRNA的表达。结果显示,与对照组相比,OSM组肾小管上皮细胞α-SMA及p-STAT1蛋白的合成增加,α-SMA mRNA表达增加,细胞培养上清液Col I和FN的含量增加,而CK18蛋白及mRNA的表达减少。SOCS-1过表达能抑制OSM刺激引起的α-SMA和p-STAT1的表达,减少Col I和FN的分泌,下调α-SMA mRNA的表达,同时能够逆转OSM刺激引起的CK18蛋白及mRNA的表达。由此可见,SOCS-1过表达能抑制OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化,此过程可能与STAT1的磷酸化受抑有关。
- 刘青娟邢玲玲李建英刘淑霞王辉段惠军
- 关键词：抑瘤素M肾小管上皮细胞转分化
- PI_3K/Akt通路在高糖诱导足细胞分泌Ⅳ型胶原中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在高糖诱导足细胞分泌Ⅳ型胶原(ColⅣ)中的作用。方法体外培养小鼠肾足细胞,给予高糖刺激(30mmol/L)处理0h、12h、24h、48h,正常糖(5mmol/L)分别培养相同时间作为对照,采用免疫细胞化学染色法和蛋白印迹法检测p-Akt、ColⅣ的表达。结果高糖可以诱导足细胞内p-Akt蛋白表达,随刺激时间延长分泌增多,24h达到高峰,各时间点相比有统计学差异(P<0.05);足细胞内ColⅣ蛋白表达随高糖刺激时间延长逐渐增多,并与p-Akt表达呈正相关关系(r=0.834,P=0.001)。结论高糖可能通过激活PI3K/Akt通路诱导足细胞分泌Ⅳ型胶原。
- 邢玲玲段惠军刘青娟傅淑霞刘淑霞郝军
- 关键词：PI3K/AKT通路足细胞
