广东省医学科学技术研究基金(A2011295)
- 作品数:5 被引量:13H指数:2
- 相关作者:孟金兰许岩马娜冯鉴强王金全更多>>
- 相关机构:广东药学院南方医科大学中山大学更多>>
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- H_2S对脑缺血后神经元损伤保护作用的研究
- 2013年
- 目的:探讨H2S对大鼠局灶性脑缺血后神经元的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和硫氢化钠(NaHS)组,采用线栓法制作局灶性脑缺血模型,测定脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量,免疫组化法检测caspase-3的表达水平,原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡水平。结果:与模型组比较,NaHS组大鼠脑组织中MDA含量明显下降(P<0.05),GSH、SOD含量则显著升高(P<0.01),脑组织caspase-3免疫阳性细胞和凋亡细胞数显著减少(P<0.01)。结论:H2S对大鼠局灶性脑缺血损伤的脑组织具有的作用,与H2S明显的抗氧化应激、减少神经细胞凋亡有关。
- 陈红陈爱葵
- 关键词:脑缺血抗氧化细胞凋亡
- 胱硫醚-β-合酶/硫化氢系统在鱼藤酮诱导PC12细胞损伤中的变化被引量:2
- 2014年
- 目的动态研究胱硫醚-β-合酶/硫化氢(CBS/H2S)系统在鱼藤酮诱导PC12细胞损伤中的变化。方法鱼藤酮诱导具有多巴胺能神经元特性的PC12细胞损伤作为帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型,免疫印迹法(Western blot)检测CBS的表达;亚甲基蓝分光光度计法检测细胞内CBS酶活性及硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的生成;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;GSH检测试剂盒检测细胞内GSH含量。结果鱼藤酮损伤6和12 h组,PC12细胞内CBS的表达和活性升高,H2S生成量增加;而在24和48 h组,CBS表达和活性则明显降低,H2S的生成量明显减少;鱼藤酮可以时间依赖性的降低细胞存活率及减少细胞内GSH的含量。结论鱼藤酮刺激引起内源性CBS的表达和活性先升高后降低,H2S的生成先增加后减少,这可能与PC12细胞对抗鱼藤酮诱导的氧化应激损伤有关。
- 许岩马娜邓树泳王金全冯鉴强孟金兰
- 关键词:鱼藤酮帕金森病PC12细胞硫化氢氧化应激
- 内源性硫化氢在大鼠黑质氧化损伤中的变化及作用被引量:1
- 2014年
- 目的观察大鼠黑质氧化损伤后内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的变化及其作用。方法将SD雄性大鼠单侧黑质内微量注射6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)作为黑质氧化损伤模型;H2S供体硫氢化钠(sodium hydrosulfide,Na HS)在6-OHDA损伤前连续腹腔注射3周作为预处理;实验分为对照组、6-OHDA损伤后7 d(D7组)、11 d(D11组)、17 d组(D17组)、Na HS预处理组(Na HS+6-OHDA处理),每组各8只;采用亚甲基蓝分光光度计法检测黑质胱硫醚-β-合酶(cystathionine-β-synthase,CBS)活性及H2S的含量;免疫组织化学法检测黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数;紫外分光光度法测定黑质谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平。结果与对照组比较,6-OHDA损伤后7、11、17 d黑质CBS酶活性分别下降为[(96.21±8.40)%,P>0.05],[(86.48±9.85)%,P<0.05]和[(75.16±7.45)%,P<0.01];内源性H2S含量分别减少为[(90.12±10.03)%,P<0.05],[(82.58±9.52)%,P<0.01]和[(78.16±11.55)%,P<0.01]。TH阳性细胞与对照组比较,在6-OHDA损伤后7 d即下降为[(84.32±6.06)%,P<0.05],同时伴随黑质GSH-Px活性降低及MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。但早期给予Na HS预处理补充H2S之后,与单纯6-OHDA损伤后7 d比较,TH阳性细胞则增加为[(96.15±5.03)%,P<0.05],且黑质GSH-Px的活性升高,MDA的含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 6-OHDA氧化损伤导致大鼠黑质CBS酶活性及H2S含量下降,外源性H2S预处理可早期发挥抗黑质氧化损伤的神经元保护作用,这可能与其增加GSH-Px活性及减少MDA含量有关。
- 许岩马娜刘博王晶莹廖文辉汪胜王金全孟金兰
- 关键词:硫化氢帕金森病氧化应激神经保护
- 硫化氢抑制葡萄糖调节蛋白78减轻6-OHDA诱导的PC12细胞损伤
- 2014年
- 目的:探讨硫化氢(H2S)是否通过改变葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达参与其对抗6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法应用具有神经毒性的6-OHDA损伤PC12细胞为帕金森病细胞模型,以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;DFCH-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)的水平;Rh123染色检测细胞线粒体膜电位(MMP);Western blot检测GRP78的表达。结果200μmol/L的6-OHDA引起PC12细胞的存活率显著降低,ROS生成增加及MMP降低,且诱导了GRP78的高表达。应用25~400μmol/L的NaHS预处理30 min,呈浓度依赖性抑制6-OHDA引起的细胞存活率降低,其中400μmol/L的NaHS作用最明显,此浓度也可以显著减少6-OHDA引起的ROS增多,提高MMP,同时明显抑制6-OHDA诱导的GRP78高表达。结论 H2S具有抗6-OHDA氧化应激损伤的PC12细胞保护作用,抑制内质网应激分子GRP78的表达可能是其机制之一。
- 刘博许岩马娜廖文辉汪胜林启康梁伟健孟金兰
- 关键词:硫化氢GRP78PC12细胞
- PI3K/Akt信号通路在硫化氢保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的作用被引量:10
- 2013年
- 目的探讨硫化氢(H2S)对PC12细胞PI3K/Akt信号通路的影响及该通路在H2S神经保护中的作用。方法Western blot法检测H2S供体硫氢化钠(NaHS)处理PC12细胞诱导Akt磷酸化的水平;CCK-8比色法检测细胞存活率;应用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果应用不同浓度NaHS处理PC12细胞30 min,在50~400μmol.L-1浓度范围内,呈浓度依赖性地上调Akt磷酸化的水平,但随着NaHS浓度的增加,磷酸化Akt表达量逐渐下降;Ly294002明显抑制了NaHS对Akt磷酸化水平的上调作用。NaHS预处理可以保护PC12细胞对抗600μmol.L-1CoCl2诱导的损伤,使细胞存活率提高及细胞凋亡率降低。而在预处理前使用PI3K/Akt信号通路抑制剂Ly294002,则明显地减弱了H2S的神经细胞保护作用。结论 H2S可通过激活PI3K/Akt信号通路保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤。
- 孟金兰陈雅嘉陈红董艳芬邢德刚梁燕玲兰爱平冯鉴强
- 关键词:硫化氢化学性缺氧PI3K/AKT信号通路神经保护细胞信号PC12细胞