中国博士后科学基金(2013M541181)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：天津农学院天津大学天津市食品加工工程中心更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 间接竞争ELISA法检测坚果类过敏原特异性研究被引量：2
- 2015年
- 以腰果蛋白为过敏抗原,腰果蛋白致敏的阳性小鼠血清作为一抗,羊抗鼠Ig E-HRP为二抗建立双抗体间接酶联免疫吸附实验(ELISA)体系,通过棋盘法确定腰果蛋白最佳反应条件工作浓度为15.92μg/m L,最佳一抗稀释度均为1∶400,最佳酶标二抗的稀释度为1∶1000,腰果蛋白浓度为1.99μg/m L。并用该方法分别对腰果、核桃、榛子、开心果、板栗、杏仁等六种坚果进行检测分析,未发现有交叉反应,本实验建立的间接竞争性ELISA诊断方法具有良好的敏感性和特异性,为坚果过敏性食品的监测及时而准确的诊断奠定了基础。
- 范建涛张爱琳姚尧张钰鑫苗颖
- 关键词：坚果ELISA棋盘法
- 坚果类过敏原的分离及免疫印迹分析被引量：5
- 2014年
- 本文采用传统的丙酮、乙醚溶剂去脂方法,选用不同品种和不同种类的坚果食品对其进行过敏蛋白的初步分离,应用BCA蛋白试剂盒测定各蛋白浓度,通过SDS-PAGE电泳分离坚果过敏蛋白各组份,采用免疫印迹(Western-blotting)方法鉴定坚果蛋白的过敏性。结果表明,各坚果蛋白提取浓度为白芝麻:14 mg/mL,黑芝麻:4 mg/mL,核桃:8 mg/mL,腰果:28 mg/mL,开心果:21 mg/mL。SDS-PAGE电泳显示15 ku是白芝麻的主要蛋白,34 ku是黑芝麻的主要蛋白,19和37 ku是腰果的主要蛋白,13 ku是核桃的主要蛋白,13和21 ku是开心果的主要蛋白。Western-Blotting显示对过敏患者的阳性混合血清均有过敏反应,坚果过敏具有同源性,白芝麻与黑芝麻的主要过敏原分子量均在22 ku,腰果的主要过敏原分子量在20 ku,核桃的主要过敏原分子量在54 ku,开心果的主要过敏原分子量在23 ku。
- 张爱琳王昌禄胡云峰周志江
- 关键词：坚果免疫印迹
