国家质检公益性行业科研专项(201210018-4)
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 相关作者：杨俊兴吕建强卢体康秦智锋曾少灵更多>>
- 相关机构：深圳出入境检验检疫局学研究院四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家质检公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立被引量：7
- 2014年
- 新城疫是影响家禽养殖业的重大动物疫病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键。借助热裂解法抽提病毒RNA,在筛选出最佳核酸染料Calcein的基础上,建立新城疫病毒(NDV)实时荧光反转录环介导等温扩增(rRT-LAMP)检测法,并对该法进行特异性、敏感性及准确性分析。试验结果显示,本试验所建立的NDV-rRT-LAMP方法可有效鉴别NDV,其敏感性可检测至50个基因拷贝,与国家标准实时荧光定量RT-PCR检测法一致;该法特异性强,与AIV、IBV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应。小规模田间试验显示,该法用于NDV的普查监测,结果可靠。结果表明,建立的NDV-rRT-LAMP检测法可满足NDV现场快速分子检测需求。
- 陈兵胡运发孙洁陈书琨刘建利曾少灵曹琛福张彩虹阮周曦林庆燕吕建强杨俊兴花群义卢体康秦智锋
- 关键词：新城疫病毒
- H5亚型禽流感病毒现场实时荧光RT-LAMP检测方法点的建立与优化被引量：9
- 2013年
- H5亚型禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键。本实验首次借助热裂解法抽提病毒RNA,建立H5亚型禽流感病毒(H5subtype avian influenza Virus,AIV-H5)实时荧光反转录环介导等温扩增(Fluorescent quantitative real-time reversetranscription-LAMP,qRT-LAMP)检测法,并对该法进行特异性、敏感性、可重复性及可靠性分析;同时对比钙黄绿素(Calcein)、SYBR Green I、羟基萘酚蓝(Hydroxynaphthol blue,HNB)、SYTO 81四种荧光染色剂在颜色判定中的工作情况,筛选最佳染料。试验结果显示本实验所建AIV-H5qRT-LAMP法可有效鉴别AIV-H5,其敏感性较国家标准实时荧光RT-PCR检测法高100倍,最低检测限可达1个基因拷贝;该法与IBV、NDV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应,特异性强;同时该法具有良好重复性。本实验筛选出最佳染色剂Calcein。小规模田间试验显示该法用于AIV-H5的普查监测结果可靠。可见本实验建立AIV-H5qRT-LAMP检测法可满足AIV-H5现场快速分子检测需求,具广阔应用空间。
- 刘芸唐金明陶虹孙洁卢体康廖立珊刘建利曾少灵曹琛福张彩虹阮周曦吕建强杨俊兴花群义陈正礼秦智锋
- 关键词：H5亚型禽流感
