广东省自然科学基金(011809)
- 作品数：9 被引量：44H指数：4
- 相关作者：马润娣于立坚刘姬艳胡章张霄瑜更多>>
- 相关机构：广东海洋大学湛江海洋大学广东医学院附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 土贝母苷甲在人宫颈癌HeLa细胞内对线粒体的影响被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨线粒体在土贝母苷甲(TBMS1)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡过程中的作用。方法:流式细胞仪测定线粒体膜电位(ΔΨm)、琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂片和蛋白质免疫印迹法检测细胞色素c(cyt c)的表达。结果:TBMS1引起人宫颈癌HeLa细胞凋亡,使得ΔΨm下降,释放入胞质的cyt c增加,并具有时间、剂量依赖性;TBMS1还可直接作用于分离的鼠肝脏线粒体,使之释放cyt c;TBMS1的这种作用部分能够被线粒体膜保护剂环孢菌素A(CsA)阻断。结论:线粒体途径是TBMS1诱导的HeLa细胞凋亡的途径之一。
- 王芳马润娣于立坚
- 关键词：土贝母苷甲线粒体细胞色素C人宫颈癌HELA细胞
- 土贝母苷甲对人脐静脉内皮细胞凋亡和肿瘤诱导的血管生成的影响被引量：6
- 2008年
- 研究了土贝母苷甲(下称苷甲)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡和肿瘤诱导的血管生成的影响。包括:MTT法检测苷甲对HUVECs生长的影响;荧光显微镜观察苷甲作用下HUVECs的形态变化;流式细胞术分析苷甲对HUVECs周期及凋亡的影响;聚碳酸酯膜小室(Transwell model)趋化运动模型检测苷甲对HUVECs运动能力的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryochorioallantoic membrane,CAM)试验检测苷甲对人鼻咽癌细胞(human nasopharyngeal carcinomaCNE-2Zcells,CNE-2Z)诱导的CAM血管生成的影响;免疫组化法检测苷甲对BALB/c裸小鼠Lewis肺癌组织微血管密度(microvessel density,MVD)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)表达的影响。苷甲明显抑制HUVECs的生长,其抑制效果与剂量和作用时间相关,苷甲作用HUVECs24、48、72h其IC50值分别为24.2、21.4、17.9μmol/L;苷甲作用下HUVECs发生周期阻滞,呈现典型的凋亡特征,20.0μmol/L苷甲作用12、24、36hHUVECs的凋亡率分别为11.4%、20.8%、25.3%;20.0μmol/L苷甲处理HUVECs24h,对细胞迁移抑制率为58.4%;苷甲抑制CNE-2Z细胞诱导的CAM血管生成,并与剂量相关;苷甲应用后瘤组织MVD明显减少,VEGF、bFGF、PDGF表达下调。苷甲有明显的抑制血管生成活性,其抑制血管生成作用与诱导血管内皮细胞凋亡,抑制其运动能力,下调VEGF、bFGF和PDGF的表达有关。
- 于立坚胡定慧马润娣苏伟明王珍玉廖铭能张霄瑜于廷曦
- 关键词：土贝母苷甲血管生成人脐静脉内皮细胞株鸡胚绒毛尿囊膜
- 土贝母苷甲对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨土贝母苷甲(下称苷甲)对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:PGCL3细胞经不同剂量苷甲处理24、48、72h,MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用重组基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Transwell小室趋化运动模型研究苷甲对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测苷甲对PGCL3细胞分泌Ⅳ型胶原酶(MMP-2)能力及活性的影响。结果:苷甲明显抑制PGCL3细胞的生长,且呈剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为15.70、14.20和13.32μmo.lL-1。苷甲1.25、2.50、5.00μmol·L-1处理PGCL3细胞24h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为28.7%、41.0%、57.5%;对PGCL3细胞迁移能力的抑制率分别为21.6%、35.2%、53.7%。苷甲降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且呈一定的剂量依赖关系。结论:苷甲抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力,其对PGCL3细胞的侵袭和粘附的影响可能与其降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率有关。
- 于立坚马润娣王长秀黄来珍张霄瑜于廷曦
- 关键词：土贝母苷甲粘附迁移MMP-2
- 土贝母苷甲对人红白血病细胞K562的诱导分化作用被引量：4
- 2006年
- 目的:研究土贝母苷甲对人红白血病细胞K562分化的影响。方法:采用台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲对K562细胞增殖的影响;采用细胞形态学、细胞化学方法检测土贝母苷甲对K562细胞分化的影响;采用Western blotting法检测土贝母苷甲对K562细胞早期原癌基因c-myc、cf-os表达的影响。结果:土贝母苷甲下调K562细胞c-myc的表达,上调cf-os的表达,诱导K562细胞产生血红蛋白,诱导K562细胞向成熟红系细胞方向分化。结论:土贝母苷甲对人红白血病细胞K562具有诱导分化作用。
- 刘姬艳高营于立坚马润娣
- 关键词：土贝母苷甲诱导分化K562细胞
- 土贝母苷甲对人HL-60髓性白血病细胞周期与凋亡的影响被引量：8
- 2003年
- 目的:研究土贝母苷甲(下称苷甲)对人髓性白血病细胞HL-60的细胞周期及凋亡的影响。方法:采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测苷甲对HL-60细胞生长的影响;形态学方法(荧光显微镜和透射电镜)、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在苷甲作用下HL-60细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况;蛋白印迹免疫法检测细胞凋亡及周期相关基因bcl-2、cyclinB1表达的变化。结果:苷甲显著抑制HL-60细胞的生长,其抑制效果与浓度及时间呈依赖关系。15μmol·L-1苷甲作用24小时可将HL-60细胞阻滞于G2/M期,进而诱导其凋亡,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳可见明显的梯状区带。bcl-2表达无明显变化,cyclinB1表达降低。结论:苷甲对细胞周期起阻滞作用,并诱导其凋亡,其作用机制可能与cyclinB1表达降低有关。
- 胡章马润娣于立坚
- 关键词：土贝母苷甲细胞周期阻滞HL-60细胞髓性白血病
- 土贝母皂苷对HL-60细胞周期作用的研究被引量：15
- 2005年
- 目的:应用土贝母皂苷(下称皂苷)作用于人早幼粒白血病细胞(HL -60),研究皂苷抗肿瘤作用的分子机制。方法:采用流式细胞术等方法分析细胞周期及凋亡;蛋白印迹免疫法检测细胞凋亡及周期相关基因 bcl- 2、cdc2 和 cy clinB1表达的变化。结果:15μmol/L皂苷作用 24 h 可将 HL -60 细胞阻滞于G2/M期,进而诱导凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。凋亡抑制基因bcl 2表达无明显变化,周期蛋白 cyclinB1 表达降低,而cdc2表达无明显改变。结论:皂苷导致HL- 60细胞 G2/M期阻滞,进而诱导凋亡;周期阻滞的分子机制与降低 cy clinB1蛋白水平有关,而凋亡的诱导与bcl- 2表达无关。
- 胡章马润娣于立坚
- 关键词：土贝母脱噬作用细胞周期
- 土贝母苷甲诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡的超微结构变化及环孢菌素A的保护作用被引量：2
- 2007年
- 目的观察土贝母苷甲(TBMS1)诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡的超微结构变化及环孢菌素A的保护效果,探讨以线粒体为中心的内源性凋亡途径在TBMS1诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡时的作用。方法利用透射电镜观察不同浓度TBMS1作用不同时间引起的细胞超微结构的变化,以及环孢菌素A预处理对TBMS1作用的影响。结果随着土贝母TBMS1浓度的增高和作用时间的延长,人HeLa细胞的结构发生了连续性变化。肿瘤细胞逐渐减小,细胞间隙逐渐增大,线粒体逐渐肿胀、退化,粗面内质网逐渐扩张,核逐渐变小、核碎裂。在TBMS1低浓度时,环孢菌素A能够在一定程度上保护细胞免受TBMS1的损伤。环孢菌素A对TBMS1的损伤有保护效果。但当TBMS1浓度增大时,环孢菌素A的这种保护就不起作用了。结论TBMS1诱导HeLa细胞发生一系列凋亡特征的超微结构变化,线粒体肿胀、退化为其特征之一,从形态学角度提供了以线粒体为中心的内源性凋亡途径起一定作用。
- 王芳马润娣于立坚
- 关键词：土贝母苷甲超微结构细胞凋亡人宫颈癌HELA细胞
- 土贝母苷甲诱导人红白血病细胞K562凋亡被引量：1
- 2006年
- 用MTT法检测苷甲对K562细胞生长的抑制作用,分别采用形态学方法(光学显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜)检查在苷甲作用下K562细胞形态的变化以及用流式细胞术观察在苷甲作用下K562细胞凋亡及周期变化的情况.结果显示:苷甲抑制K562细胞的生长,其24、48、72h的IC50值分别为19.7、18.5、15.9μmol/L.苷甲诱导K562细胞出现典型凋亡细胞的形态学特征.20μmol/L苷甲作用K562细胞6 h,流式细胞仪即检出亚倍体峰,G2/M期细胞增多.随着作用时间延长,细胞被阻滞于G2/M期更加明显,细胞的凋亡率也增加.该实验证明:苷甲能抑制K562细胞的生长,把细胞阻滞在G2/M期并诱导细胞发生凋亡.
- 刘姬艳于立坚马润娣
- 关键词：土贝母苷甲细胞凋亡
- 测定苷甲对ERK激酶活性影响的三种方法比较
- 2006年
- 细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在细胞生长、分裂、恶性转化、凋亡等过程中起重要作用.土贝母苷甲(下称苷甲)是从传统中药土贝母块茎中分离出来的一种三萜皂苷.该研究分别用放射自显影、液闪和蛋白免疫印迹法检测苷甲对ERK激酶活性的影响.结果表明,苷甲能快速激活ERK.三种检测ERK激酶活性的方法各有短长.
- 刘姬艳于立坚马润娣
- 关键词：土贝母苷甲细胞外信号调节蛋白激酶放射自显影法蛋白免疫印迹法
- 土贝母苷甲对人红白血病细胞K562的诱导分化作用
- 目的:研究土贝母苷甲对人红白血病细胞K562分化的影响。方法:采用台盼蓝拒染法检测土贝母苷甲对K562细胞增殖的影响;采用细胞形态学、细胞化学方法检测土贝母苷甲对K562细胞分化的影响;采用Western blottin...
- 刘姬艳高营于立坚马润娣
- 关键词：土贝母苷甲诱导分化K562细胞
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