湖南省自然科学杰出青年基金(08JJ1002)
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
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- 基于锁核酸的高选择性新型分子信标被引量：1
- 2010年
- 通过在分子信标的错配位点修饰锁核酸,不仅可有效地改善其单碱基错配识别能力,还可提高检测灵敏度.因而有望发展成为一种通用的提高分子信标单碱基错配识别能力的方法.
- 王青崔亮羊小海王柯敏何磊良
- 关键词：分子信标锁核酸选择性
- 基于线性荧光探针对T4 DNA连接酶的活性分析被引量：3
- 2010年
- 利用线性荧光探针作为核酸连接反应的模板和信号分子,通过实时监测荧光信号的降低来表征连接产物的生成过程,从而建立了一种连续、简单且特异性高的T4 DNA连接酶活性分析的新方法,检出限可达1.2 U/mL;同时,该方法还可用于快速考察金属离子和化学药物对酶促反应的影响.实验结果表明,该法不仅为灵敏、实时监测核酸连接反应提供了一种简便快捷的非同位素分析方法,也为开展核酸连接酶活性分析、反应动力学机制探讨和药物快速筛选提供了一种新技术.
- 刘斌羊小海王柯敏谭蔚泓
- 关键词：实时监测
- 基于分子信标和S1核酸酶检测锌离子的研究
- 2010年
- S1核酸酶是能够特异性切割核酸单链的核酸酶,对锌离子有很强的依赖性,基于这一特性,发展了一种基于分子信标和S1核酸酶的锌离子检测新方法。结果表明该方法操作简单,不需要昂贵仪器,不涉及复杂的离子载体合成,对锌离子的检测下限为120μmol/L。
- 王青薛曹叶羊小海王柯敏
- 关键词：分子信标锌离子
- 基于分子信标对hOGG1活性的定量分析被引量：3
- 2012年
- 设计了一种含有8-oxoG碱基的新型分子信标,结合酶促反应发展了一种非同位素标记的人8-oxoG-鸟嘌呤糖苷酶1(hOGG1)的活性分析新方法,检出限可达0.0125 U/mL.此外,该方法还可用于快速考察金属离子对酶促反应的影响和肿瘤细胞中hOGG1活性水平的定量检测.实验结果表明,该方法简单、灵敏,有望用于肿瘤样品中hOGG1活性的高通量分析和hOGG1抑制剂的筛选.
- 刘斌羊小海王柯敏谭蔚泓
- 关键词：分子信标实时监测
- 基于锁核酸分子信标和酶放大检测RNA
- ＜正＞本文发展了一种通用的基于锁核酸分子信标（LMB）和酶放大的RNA检测新方法。分子信标茎部被设计为互补配对的锁核酸,环部仍为普通核苷酸。这种新型LMB具有良好的抗酶切能力和杂交性能。在DNase I存在的条件下,没有...
- 羊小海李晓平王青王柯敏郭秋平崔亮薛曹叶
- 关键词：锁核酸分子信标RNA
- 文献传递
- 双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测被引量：3
- 2010年
- 发展了一种基于双链荧光核酸适体（F-Aptamer）探针的简单快速检测蛋白质的分析方法.该双链荧光Aptamer探针由一条带荧光标记的Aptamer探针和带猝灭标记的互补DNA组成,当靶蛋白存在时,能形成比双链荧光Aptamer探针更稳定的F-Aptamer/蛋白质复合物,并发出荧光,从而实现对蛋白质的简便快速检测,检测线性范围为6~100 nmol/L,检出限为6 nmol/L.该方法设计简单,对核酸适体分子的大小和空间结构没有要求,可作为一种通用的基于F-Aptamer识别机理的蛋白质检测方法.
- 郭秋平羊小海王柯敏孟祥贤李军仲志鸿
- 关键词：核酸适体蛋白质检测凝血酶
- 分子信标检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法
- 2009年
- 利用分子信标被切割后荧光信号的变化,发展了一种简便的检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法.以限制性内切酶XspⅠ为例,将其识别位点嵌入具有茎环结构的分子信标探针(Molecular Beacon,MB)的环状部分,利用这种分子信标在溶液中形成的瞬时二聚体结构,实现了限制性内切酶对分子信标的切割.在优化的条件下,反应初速度与酶的浓度成正比,线性范围为0.05～50U/mL,检测限为0.05U/mL.通过改变分子信标环部的识别位点的序列,还可以检测其他限制性内切酶如AluⅠ的活性.
- 霍希琴颜鸿飞李军周兴旺李伟羊小海
- 关键词：分子信标荧光分析限制性内切酶
- 阳离子荧光共轭聚合物结合纳米颗粒用于DNA检测
- 2009年
- 利用纳米颗粒对目标DNA的富集、分离作用以及阳离子荧光共轭聚合物良好的荧光特性,建立了一种特异性检测DNA的新方法。首先将标记有猝灭基团的DNA捕获探针修饰到纳米颗粒上,捕获互补的DNA分子;然后加入S1核酸酶,除去未捕获到互补DNA的捕获探针;最后用DNaseⅠ将颗粒上的双链切断,使猝灭基团从纳米颗粒上解离下来,与阳离子荧光共轭聚合物结合并猝灭其荧光。结果表明,目标核酸的浓度与该聚合物的荧光猝灭程度正相关,且具有良好的特异性,线性响应范围为5.0～40nmol/L;检出限为3.7nmol/L(S/N=3)。
- 霍希琴王胜锋王青羊小海崔亮
- 关键词：脱氧核糖核酸核酸酶
- 基于阳离子荧光共轭聚合物和核酸适体探针的蛋白质检测新方法被引量：8
- 2009年
- 以核酸适体为识别分子,阳离子荧光共轭聚合物为报告分子,建立了一种蛋白质检测新方法.修饰有荧光熄灭基团的核酸适体探针通过静电作用与阳离子荧光共轭聚合物结合,导致后者荧光熄灭.当加入靶蛋白后,核酸适体探针与其特异性结合,荧光熄灭基团与阳离子荧光共轭聚合物远离,聚合物荧光信号得以恢复.实验结果表明,荧光恢复程度与靶蛋白的浓度正相关.采用该方法检测凝血酶的线性范围为1.7～40 nmol/L.
- 羊小海王胜锋王柯敏罗晓明谭蔚泓崔亮
- 关键词：核酸适体凝血酶荧光检测
- 基于核酸适体和ExonucleaseⅠ放大检测小分子
- ＜正＞小分子如ATP、NAD等在生物体内的新陈代谢中起着重要的作用,它们的含量和活性直接关系到生物体的健康,因此对它们的分析在疾病的早期诊断和治疗等方面具有重要的参考价值。但是由于小分子分子量小,难以产生抗体,检测小分子...
- 羊小海薛曹叶王柯敏王青郭秋平李晓平
- 关键词：核酸适体
- 文献传递
