江苏省卫生厅面上科研课题(H2006040)
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
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- 胶质瘤C6肿瘤干细胞蛋白质组学初步分析
- 2010年
- 目的:运用蛋白质组学的方法,对C6脑肿瘤干细胞(BTSC)和非BTSC细胞进行配对研究,建立差异性蛋白文库,为探讨胶质瘤病因提供初步线索。方法:在C6细胞中,参照神经干细胞(NSC)培养条件进行培养。出现典型的神经球后,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等,以及诱导分化等方法,鉴定神经球细胞是否为BTSC。收集神经球和非神经球细胞,进行配对,利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)检测细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点。结果:C6细胞在NSC培养条件下,出现比较典型的神经球。神经球细胞nestin阳性,NSE和GFAP阴性。经诱导发生分化,分化后细胞形态与C6相似,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记,证实这种神经球细胞为肿瘤干细胞。在2D-PAGE结果中,C6肿瘤干细胞和非干细胞配对比较,有统计学差异(P<0.05)的蛋白点共有84个,大于2倍差异蛋白点有50个,大于3倍的有17个,大于4倍的有6个,最大差异倍数为11.607 2。在BTSC中,有55个差异蛋白表达增多(上调),29个蛋白表达下降(下调)。结论:胶质瘤C6细胞系中存在肿瘤干细胞,在蛋白质组学方面与非BTSC细胞有明显差异。
- 王存祖王宁欧阳琦黄钱焕赵鹏尤永平傅震杨伟现仇有成许慧中
- 关键词：脑肿瘤干细胞双向凝胶电泳蛋白质组学
- 胶质瘤CD133阳性和阴性U87细胞蛋白质组学分析
- 2012年
- 目的通过对人脑胶质瘤U87细胞中CD133＋和CD133一细胞进行配对研究，寻找差异性蛋白。方法通过磁珠选择分离U87中CD133＋和CD133-细胞，利用双向凝胶电泳（2D—PAGE）检测上述细胞总体蛋白，分析差异性蛋白点。通过质谱（MALDI—TOF—MS）对蛋白点进行鉴定，建立两种细胞差异性蛋白文库。结果CD133＋和CD133一细胞配对比较，蛋白质组学检测结果中，差异有统计学意义（P〈0．05）的2D—PAGE蛋白点共有73个，〉1．5倍差异蛋白点有46个，〉2倍差异蛋白点有27个，〉3倍差异蛋白点有8个。在CD133＋U87细胞中，有10个蛋白表达增多（上调），63个蛋白表达下降（下调）。共得到44张高质量质谱肽质量指纹图谱（PMF），鉴定了35种蛋白质。结论CD133＋和CD133-细胞是同一细胞株中两种不同的细胞，蛋白方面存在的差异，将成为进一步研究它们相互关系的重要靶点。
- 王存祖杨伟现赵鹏尤永平傅震欧阳琦许慧中
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞蛋白质组学CD133
- 维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥疗效的影响
- 2010年
- 目的探讨维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥(BCNU)疗效的影响。方法制作裸鼠胶质瘤U251模型,分别给予BCNU和BCNU+维拉帕米进行治疗,测量肿瘤大小,用免疫荧光染色检测肿瘤中P-糖蛋白(P-gp),多药耐受蛋白1(MRP1)和肺耐药相关蛋白(LRP)的表达。结果 BCNU+维拉帕米组中,肿瘤大小明显比BCNU组减小,尤其是第一至四周更加明显(P<0.05)。肿瘤细胞中LRP,P-gp和MRP1均为阳性,主要在细胞膜表达,从形态学上两组差别并不明显。结论维拉帕米在体内有明显增加胶质瘤U251对BCNU的敏感性,逆转耐药的作用。
- 吴小明仇有成王存祖欧阳琦黄钱焕杨伟现许慧中
- 关键词：胶质瘤维拉帕米
- 胶质瘤U251细胞中CD133表达及干细胞特性分析被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨CD133+细胞的生物学特性,分析CD133作为胶质瘤干细胞标记的可行性。方法:利用免疫荧光染色检测U251细胞中CD133、巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达,分析CD133+细胞与CD133-细胞中巢蛋白、NSE、GFAP阳性细胞存在的差异。结果:U251中CD133+细胞比例为0.060±0.003,在CD133+细胞中,巢蛋白阳性细胞,NSE和GFAP阴性细胞比CD133-中明显增多;在CD133-细胞中,也存在巢蛋白阳性细胞,数目较CD133+中明显减少,相反巢蛋白阴性细胞,NSE和GFAP阳性细胞明显增多。结论:胶质瘤U251细胞存在CD133+细胞,在CD133阳性和阴性细胞中,均存在干细胞样细胞,但是在CD133+细胞中此类细胞更多。
- 杨伟现欧阳琦周月鹏王存祖张志坚向定朝许慧中陆晓峰
- 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞
- 胶质瘤U251细胞化疗过程中MGMT表达改变与耐药的关系
- 2010年
- 目的探讨胶质瘤U251细胞中MGMT表达与卡莫司汀(BCNU)和替莫唑胺(TMZ)化疗耐药的关系。方法细胞生长情况用MTT进行评估,细胞周期采用流式细胞仪检测,MGMT表达用western-blot检测。结果 U251细胞对BCNU和TMZ存在耐药现象。在化疗过程中,处于G0/G1期细胞比例明显增加,MGMT表达无显著变化。结论利用BCNU和TMZ对U251进行化疗过程中,不能通过消耗MGMT,来达到逆转耐药现象的目的 。
- 吴小明仇有成王存祖欧阳琦黄钱焕杨伟现许慧中
- 关键词：胶质瘤化疗耐药
- 替莫唑胺化疗对胶质瘤U251中CD133^+细胞的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨化疗耐药与肿瘤干细胞之间的关系。方法分析替莫唑胺(TMZ)作用前后胶质瘤U251中CD133蛋白表达及阳性细胞数量的变化。通过MTT实验评估U251细胞对TMZ的敏感性。利用免疫荧光染色和Western blot检测TMZ作用前后U251细胞中CD133、巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达。结果U251细胞中未加入TMZ组的CD133+细胞比例约为0.060±0.003,明显低于加入TMZ组的0.337±0.012(P<0.05)。在TMZ作用后,CD133和nestin表达明显增加,而GFAP和NSE表达明显减少(P<0.05)。结论胶质瘤U251细胞株中存在CD133+细胞,大部分具有脑肿瘤干细胞特性;在TMZ作用后,这类细胞比例增加,提示其与化疗耐药有关。
- 杨伟现向定朝王存祖周月鹏欧阳琦张志坚许慧中陆晓峰
- 关键词：胶质瘤化疗耐药
- CD133阳性和阴性胶质瘤U87细胞基因组学分析
- 2013年
- 目的分析胶质瘤U87中的CD133阳性(CD133+)和阴性(CD133-)细胞,建立差异性基因文库。方法通过磁珠选择分离U87细胞中的CD133+和CD133-细胞,利用AgilentHuman 1Aoligo芯片检测2种细胞总体基因,分析结果,建立差异性基因文库。结果基因组学研究中,CD133+和CD133-U87细胞比较,差异性基因数为840个;其中,上调基因759个,下调基因81个。在各基因功能分组中,与翻译调控功能相关的基因,差异性基因所占比率最大,为14.9%;各功能组之间差异性基因比率均有统计学意义(P<0.01)。结论通过基因组学研究,建立了CD133+和CD133-U87细胞差异性基因文库,为进一步研究脑肿瘤干细胞提供了线索。
- 王存祖陆晓峰赵鹏尤永平傅震欧阳琦向定朝徐敏
- 关键词：胶质瘤基因组学
