国家自然科学基金(30772099)
- 作品数：6 被引量：26H指数：4
- 相关作者：杨斌邓立欢向萌娟吴小莹董雪更多>>
- 相关机构：中国医学科学院广州医学院北京协和医学院更多>>
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- 氯化锂诱导毛囊干细胞定向分化中Wnt信号通路介导基因的调控被引量：5
- 2011年
- 背景:研究发现氯化锂有促进毛囊干细胞向毛囊上皮定向分化的作用,但其分子调节机制仍不清楚。目的:通过外源性因子氯化锂干预人毛囊干细胞,观察Wnt信号通路中主要下游分子及目的基因的改变,探讨氯化锂对毛囊干细胞定向分化的诱导作用。方法:取正常成人除皱术后的头皮,采用两步酶消化法结合手术显微镜分选毛囊干细胞,采用角蛋白10抗体-异硫氰酸荧光素鉴定毛囊干细胞。以外源性因子氯化锂干预人毛囊干细胞。结果与结论:氯化锂干预5d后可发现毛囊干细胞体积变大,核浆比减小,Wnt信号通路中β-catenin、cyclinD1表达增强,GSK3β、Tcf3表达减弱,c-myc在氯化锂浓度低时增强浓度高时减弱。提示氯化锂可影响毛囊干细胞中Wnt信号通路β-catenin、GSK3β、Tcf3、c-myc和cyclinD1的表达水平,可能对毛囊干细胞的分化起到重要作用。
- 杨斌向萌娟
- 关键词：氯化锂WNT信号通路毛囊干细胞Β-CATENIN
- 角质细胞生长因子及氯化锂诱导毛囊干细胞定向分化中的信号通路被引量：6
- 2014年
- 背景:毛囊干细胞的增殖分化受到自身基因及外来信号的共同作用,Wnt/β-catenin信号通路在毛囊毛发发育中起重要作用,但详细机制尚未明确。目的:探讨在角质细胞生长因子及氯化锂干预下,Wnt/β-catenin信号通路在人毛囊干细胞向毛囊乳突细胞或表皮细胞定向分化中的作用及与其他信号分子的相互关系。方法:获取毛囊隆突区干细胞进行培养,检测其生长曲线,观察1×106 L-1、1×107 L-1、1×108 L-1和1×109 L-1培养的毛囊干细胞在不同时间点的增殖效应;使用免疫荧光染色法对毛囊干细胞及其分化细胞进行鉴定。分别以0,0.5,1.5,10,25 mmol/L氯化锂及0,10,25,50,100μg/L角质细胞生长因子诱导毛囊干细胞分化,对比各组细胞的增殖效应,探索促毛囊干细胞分化的最佳氯化锂及角质细胞生长因子浓度。使用RT-PCR检测未处理对照组、10 mmol/L氯化锂组和10μg/L角质细胞生长因子组干预后3,5,7,9 d细胞的β-catenin、APC、GSK-3β、Axin和Lef1的mRNA转录水平。结果与结论:分离培养的毛囊干细胞在体外经多次传代后仍具有很强的增殖能力和多向分化潜能,随氯化锂浓度升高,细胞增殖效应减弱;而随角质细胞生长因子组质量浓度增高细胞增殖能力增强。含有氯化锂的K-SFM条件培养基中毛囊干细胞形态改变明显,各组间有明显差别,氯化锂>10 mmol/L时分化比例高,β-catenin表达量增高;而含有角质细胞生长因子K-SFM条件培养基中毛囊干细胞向表皮细胞分化,β-catenin变化不明显。提示氯化锂在促毛囊干细胞分化中,激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制降解复合物重要成分GSK-3β的表达下降,促使β-catenin在细胞浆表达增加并转入核内,增加靶基因转录,促使毛囊干细胞向毛囊细胞方向分化。氯化锂>10 mmol/L是促毛囊干细胞分化的最佳浓度,但增殖效应减弱。角质细胞生长因子可促进毛囊干细胞向表皮分化,可促进毛囊干细�
- 杨斌邓立欢李秉航吴小莹丁榆德董雪
- 关键词：干细胞毛囊干细胞氯化锂角质细胞生长因子
- 毛囊干细胞双向分化的分子调控机制被引量：4
- 2010年
- 随着皮肤组织工程研究的逐步深入，毛囊干细胞有望作为稳定的种子细胞用于组织工程化皮肤的构建，并应用于临床。目前的研究表明，皮肤表皮细胞和毛囊各种细胞成份都来源于位于真皮层的毛囊外根鞘隆突区的毛囊干细胞，即毛囊干细胞具有双向分化的潜能，其分化方向有可能是受细胞增殖分化的内源性生物信号通路和外源性微环境调节控制的^[1-6]。
- 邓立欢杨斌
- 关键词：毛囊干细胞分子调控机制组织工程化皮肤皮肤组织工程皮肤表皮细胞毛囊外根鞘
- 毛囊干细胞定向分化过程中Wnt信号通路介导的基因调控被引量：5
- 2011年
- 皮肤的毛囊干细胞具有自我复制以及多向分化潜能,在毛囊形态发育和定向分化过程中,Wnt信号通路起决定性作用。参与这条信号通路的重要蛋白质,如Wnt蛋白、Frizzled、β-catenin、GSK3β、APC、Axin等研究相对较早,且颇为深入。但对于这条通路下游的调节因子,尤其是细胞核内关键性转录因子Tcf3、Lef1,以及它们所调控的一些重要基因c-myc、cyclinD1等的研究仍处于起步阶段。本文就Wnt信号通路介导的基因调节毛囊干细胞定向分化的研究现状进行综述,为构建组织工程皮肤提供理论参考。
- 向萌娟杨斌
- 关键词：毛囊干细胞WNT信号通路基因调控
- 载荷角质细胞生长因子聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米缓释微球在组织工程皮肤构建中的应用被引量：4
- 2011年
- 背景:聚乳酸-羟基乙酸共聚物具有良好的生物相容性和可降解性性。目的:制备载荷角质细胞生长因子聚乳酸-羟基乙酸共聚物控释载药系统用于组织工程皮肤。方法:采用乳化-溶剂挥发法、冷冻干燥法制备载有角质细胞生长因子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球,并构建组织工程皮肤。扫描电镜、倒置显微镜、纳米粒度分析仪、紫外分光及ELISA法对微球评价其特性。结果与结论:纳米微球载药量为(14.05±0.56)%,包封率为(59.86±2.38)%,角质细胞生长因子活性保留率(78.26±5.63)%,体外释放30d的累积释药率达75%以上,微球形态规则圆润。微球形态规整,在脱细胞真皮表面分布均匀,与其联接良好。毛囊干细胞群在荷载聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微囊脱细胞真皮上生长活跃,细胞形态良好,并呈克隆团生长。说明实验用组织工程材料制备工艺合理,材料相容性好,可用于构建新型组织工程皮肤。
- 杨斌邓立欢王朝阳
- 关键词：角质细胞生长因子聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微囊组织工程化皮肤
- 荷载角质细胞生长因子纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损被引量：3
- 2009年
- 目的研究荷载角质细胞生长因子（keratinocyte growth factor，KGF）纳米微囊的新型组织工程皮肤对裸鼠皮肤缺损的修复效果及特点。方法采用超声乳化-溶剂挥发法及低温干燥法，制备KGF纳米微囊，并构建KGF-脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix，ADM）；分离培养和鉴定人表皮干细胞群和成纤维细胞；接种表皮干细胞群于KGF—ADM之上，观察其生长情况；将荷载KGF纳米微囊的组织工程皮肤移植于裸鼠皮肤缺损处，以无KGF纳米微囊的组织工程皮肤为空白组，以其自体皮肤移植作对照组。于术后2-6周时分别观察修复区组织学愈合及皮片挛缩情况，并应用抗人角蛋白10及β-整合素免疫荧光检测修复区表皮和真皮层细胞来源、分化及生长情况。结果表皮干细胞群在KGF—ADM表面生长良好，粘贴紧密，可见到多角形的终末表皮细胞及小圆形的表皮干细胞，活性良好，有连接成片的趋势，部分形成克隆团块。以荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损，2、6周时修复效果均优于空白组及对照组，移植的组织工程皮肤边缘可与邻近皮肤完全融合，但存在一定的挛缩。镜下可见修复区组织工程皮肤表皮细胞分层良好，与ADM紧密结合，能产生正常角质层。6周时实验组修复区组织工程皮肤切片免疫荧光检测，基底层仍存有少量β-整合素阳性的表皮干细胞或短暂扩充细胞。结论所构建的荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的效果，优于无KGF纳米微囊的普通组织工程皮肤及裸鼠自体全厚皮片移植修复效果。
- 杨斌丘日井洪清琦冀晨阳
- 关键词：表皮干细胞角质细胞生长因子脱细胞真皮基质纳米微囊
