湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目(T200607)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：姚群峰薛津若肖凌陈馨杨燕更多>>
- 相关机构：湖北中医药大学湖北中医学院更多>>
- 发文基金：湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目湖北省教育厅科学技术研究项目湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于错配杂交化学发光定量检测MGMT基因过甲基化被引量：2
- 2014年
- 目的利用错配杂交和化学发光技术,建立一种检测MGMT基因启动子区过甲基化的定量分析方法。方法基因组DNA经过亚硫酸氢钠修饰,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化。设计特异的PCR引物(不含CpG位点),同时扩增含有CpG位点甲基化或非甲基化目的 MGMT基因启动子区,用两条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物杂交,化学发光检测,通过两条探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中MGMT甲基化的程度。结果检测混合样品中MGMT基因的甲基化水平与结果完全相符,并可用于肿瘤组织样品的MGMT甲基化定量检测。结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的MGMT基因甲基化的定量检测方法。
- 姚群峰郭爽杜丹心
- 关键词：MGMT基因甲基化化学发光
- 姜黄素对HeLa细胞的去甲基化效应被引量：4
- 2010年
- 目的探讨姜黄素作用于人宫颈癌HeLa细胞后其p16和MGMT基因表遗传方面的影响。方法配制不同浓度的姜黄素(20、40、60μmol/L)分别处理人宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT检测细胞的生长情况,利用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测不同浓度姜黄素处理前后的肿瘤细胞中p16和MGMT基因甲基化状态的改变,并用RT-PCR法检测姜黄素作用前后HeLa细胞的p16及MGMT基因的表达情况。结果姜黄素能够抑制HeLa细胞的增殖和生长;HeLa细胞的p16和MGMT基因均表现出异常甲基化状态,当姜黄素浓度为40μmol/L时,HeLa细胞的p16和MGMT基因呈去甲基化状态;20μmol/L的姜黄素可以让HeLa细胞中表达缺失的p16基因重新表达,对于MGMT基因,姜黄素可以使其表达增强。结论姜黄素对HeLa细胞的增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量依赖性(P<0.01);高浓度的姜黄素溶液对HeLa细胞p16和MGMT基因有一定的去甲基化作用,并能调控p16和MGMT基因的表达。
- 陈馨姚群峰
- 关键词：姜黄素DNA甲基化HELA细胞P16基因MGMT基因
- 乙肝病毒前S1抗原检测与HBV-DNA相关性研究被引量：3
- 2011年
- 乙型肝炎在全世界范围内广泛流行，我国是乙肝的高发区。乙型肝炎病毒（HBV）是乙肝的病原体，目前临床上常用乙肝血清标志物（HBV-M）定性检测指导临床诊断和疗效观察。虽然HBV-DNA定量检测对于确诊HBV感染与治疗具有重要意义，但因其检测技术条件及成本较高，并未广泛应用。乙肝病毒HBV表面抗原（HBsAg）基因组分别编码S、前S1、前S2 3种蛋白。
- 杨莉许倩倩姚群峰
- 关键词：乙型肝炎病毒前S1抗原HBV-DNA
- PCR-SSP法检测29种HLA-B27基因亚型被引量：3
- 2011年
- 目的采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)高分辨技术检测29种HLA-B27基因亚型。方法设计并合成HLA-B27亚型特异性引物35条(配对组成上下游引物组合29对)以及一对内对照引物,建立PCR-SSP方法,用于B27亚型分型。检测标本为117例HLA-B27阳性研究对象(男79名,女38名)外周血DNA。结果 117例标本的PCR-SSP扩增均获得成功,成功构建了PCR-SSP检测反应体系。共检测出6种亚型:B*2702、B*2703、B*2704、B*2705、B*2706及B*2713,六种亚型的构成比分别为:0.85%、6.84%、64.10%、25.64%、1.71%和0.85%,其中B*2704和B*2705为中国汉族人群中主要亚型。结论应用该新型PCR-SSP高分辨技术进行HLA-B27基因亚型检测,能检测出较多HLA-B27亚型,且该法进行B27亚型分型分辨度高,特异性强,成本较低,适合于临床应用。
- 曾洋谭诗梦冯斌刘湘姚群峰
- 关键词：HLA-B27PCR-SSP强直性脊柱炎
- CYFRA21-1和CA-125联合检测在非小细胞肺癌诊断中的意义被引量：5
- 2006年
- 目的研究糖链抗原-125(CA-125)和细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA 21-1)联合检测在非小细胞肺癌(N SCLC)诊断中的临床意义。方法采用放射免疫法检测了83例肺癌患者、28例肺部良性疾病患者及25名健康体检者的血清CA-125和CYFRA 21-1。结果肺癌组血清CA-125和CYFRA 21-1含量显著高于正常对照组和肺良性疾病组;CYFRA 21-1在肺鳞癌中表达水平最高,CA-125在肺腺癌中表达水平最高;CA-125和CYFRA 21-1联合检测肺癌的敏感性为83.9%,特异性为80%。结论联合检测CA-125和CYFRA 21-1对于临床诊断肺癌,特别是非小细胞肺癌(N SCLC)具有重要临床价值。
- 姚群峰薛津若肖凌
- 关键词：肺肿瘤肿瘤标志物CA-125CYFRA21-1
- 巢式甲基化特异性PCR检测p16基因甲基化被引量：3
- 2008年
- 目的利用巢式甲基化特异性PCR(Nested-MSP,nMSP)法检测非小细胞肺癌患者血清中p16基因的甲基化状态,探讨其在肿瘤早期诊断中的意义。方法利用nMSP法检测了65例非小细胞肺癌患者(其中鳞癌48例,腺癌17例)血清中p16基因的甲基化状态。结果在65例非小细胞肺癌患者血清中,p16基因的甲基化百分率为72.3%(47/65);nMSP法比普通的MSP法具有更高的灵敏度。结论巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于基因甲基化分析。
- 杨燕薛津若肖凌姚群峰
- 关键词：甲基化P16基因聚合酶链式反应
