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外源化合物对孕烷X受体和组成型雄烷受体介导的细胞色素P4503A4和2B6转录调节共转染体系的优化被引量：2: 2012年; 目的优化孕烷X受体(hPXR)和组成型雄烷受体(hCAR)介导的细胞色素P450(CPY)3A4和CYP2B6诱导共转染体系,提高检测系统的灵敏度。方法利用invitrogen脂质体2000共同转染表达质粒hPXR/hCAR、报告基因质粒CPY3A4/CYP2B6和内参质粒pRL-TK到HepG-2细胞中。系统以hPXR的激动剂利福平,hCAR的激动剂CITCO为阳性对照组,以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂阴性对照组。通过调整3种质粒的转染比例,以利福平/DMSO和CITCO/DMSO的比活值,即阳性药物的诱导倍数作为优化系统灵敏度的指标,分别获得最大比值以表示系统具有最佳灵敏度。结果当共转染体系比例为hPXR/hCAR表达质粒150ng、CPY3A4/CYP2B6报告基因质粒600ng、PLR-TK内参质50ng时,转染体系的检测灵敏度最高。结论针对所使用的转染细胞系和共转染质粒,通过优化质粒的转染比例可提高系统的灵敏度,优化的共转染系统可用于药物代谢酶诱导机制的研究。; 关志男王燕王锐利张丽锋张淑秋; 关键词：细胞色素P450系统转染

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山西省基础研究计划项目(2009021040-1)