长沙市科技局科技项目(K1104052-21)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
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- 5种前处理方法对痰中结核分枝杆菌DNA提取的影响被引量：7
- 2013年
- 目的比较5种痰标本前处理方法,选择适用于基层结核病实验室痰中结核分枝杆菌DNA提取的痰标本前处理方法。方法分别采用DDT、NaOH、NALC-NaOH、Trypsin、Chymotrypsin等5种方法对所收集标本进行前处理,比较提取DNA模板的浓度、纯度和核酸扩增结果。结果经过5种前处理方法处理后,所提取DNA浓度(ng/μl)的最小值依次是27.30、4.10、9.30、18.60和14.80,最大值依次是84.10、40.20、26.10、111.00和159.00,均值依次是(52.84±19.17)、(16.69±12.72)、(14.38±4.57)、(48.65±25.75)和(53.79±46.27);以OD260/OD280的比值衡量DNA纯度,其最小值依次是1.75、1.60、1.64、1.60和1.62,最大值依次是1.86、1.85、1.79、1.88和1.84,均值依次是(1.80±0.29)、(1.66±0.88)、(1.74±0.40)、(1.76±0.86)、(1.73±0.74);16份已知阳性标本采用DDT、NALC-NaOH两种方法处理后扩增结果全部阳性,而采用NaOH、Trypsin、Chymotrypsin处理后分别出现了3、8和5份标本阴性。结论在基层结核病实验室,对拟进行结核分枝杆菌DNA提取的痰标本应首选二硫代苏糖醇进行前处理,其次选择N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠。
- 文岚张兵郭彦昌张如胜欧新华王孝君田斌
- 关键词：结核分枝杆菌DNA提取前处理方法
- 液化集菌法检查痰中结核分枝杆菌的应用评价被引量：1
- 2013年
- 目的探讨使用糜蛋白酶"液化集菌"检查痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法对56例拟诊肺结核病例的161份痰标本直接涂片和"液化集菌"后的沉渣滴冷冻玻片后分别进行ZN和金铵"O"染色,并将阅片结果进行统计分析。结果 "液化集菌"后取用沉渣滴片ZN染色的阳性率高于直接涂片ZN染色;"液化集菌"后取用沉渣滴片金铵"O"染色LED显微镜检查阳性率明显高于沉渣滴片ZN染色普通光学显微镜检查,χ2值为105.551和104.593,P=0.000。结论 "液化集菌"处理痰标本可以提高痰涂片检查结核分枝杆菌的敏感性,应用金铵"O"染色结合LED显微镜检查进一步扩大了这种优势。
- 文岚田斌陈发明王孝君郭彦昌张兵张如胜欧新华
- 关键词：显微镜检查糜蛋白酶
- 显微镜检查痰中结核分枝杆菌最低检测限的统计推断及方法改进
- 2013年
- 目的利用模拟痰标本,评价直接涂片和"液化集菌"镜检痰中结核分枝杆菌的最低检测限。方法对不同稀释度的模拟痰标本"液化集菌"前后分别进行涂片和采用冷冻及室温存放载玻片滴片,并分别进行ZN和金铵O染色。直接涂片进行ZN和金铵O染色的结果分别命名为A、B组结果;采用冷冻载玻片ZN染色和金铵O染色的结果分别命名为C、D组结果;室温存放载玻片滴片ZN染色的结果命名为E组结果。结果 A/B/C/D四组涂(滴)片所对应的NC A-D均未检出结核分枝杆菌;A组涂片有2片次106稀释度和4片次107稀释度未检出结核分枝杆菌,合计6片次(6/54,11.11%);B/C/D三组涂(滴)片未出现未检出结核分枝杆菌的结果,但B组涂片结果为实际条数描述1+、2+、3+、4+的片次数分别为7、23、13、5、6,而C/D两组滴片分别为5、19、16、6、8和1、4、20、18、11。结论 "液化集菌"处理痰标本可以提高痰涂片检查结核分枝杆菌的敏感性,应用金铵O染色和LED显微镜检查进一步扩大了这一优势,采用冷冻后的载玻片滴片可以改善沉渣膜脱落现象,值得进一步进行研究分析。
- 文岚孙边成王孝君张兵郭彦昌田斌
- 关键词：结核分枝杆菌荧光显微镜糜蛋白酶
