江苏省自然科学基金(SBK201121879)
- 作品数：9 被引量：16H指数：2
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- 鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠骨癌痛的缓解作用
- 2012年
- 目的观察鞘内注射T细胞死亡相关基因8(T celldeath-associated gene 8,TDAG8)的小干扰RNA(small inter-fering RNA,siRNA)对骨癌痛大鼠机械性痛觉过敏以及脊髓TDAG8表达的影响。方法通过将Walker256肿瘤细胞接种在大鼠左侧胫骨骨髓腔内建立骨癌痛模型。观察接种肿瘤前后大鼠机械缩爪反射阈值(paw withdrawl threshould,PWT)和脊髓TDAG8表达水平的变化;并进一步观察痛觉过敏形成后鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠PWT和脊髓TDAG8表达的影响。结果大鼠接种肿瘤后6～18 d,PWT明显下降(P<0.01),脊髓TDAG8的表达明显升高(P<0.01);与对照组相比,鞘内注射siRNA的骨癌痛大鼠,其PWT明显增高(P<0.05),脊髓TDAG8表达水平明显降低(P<0.01)。结论脊髓部位的TDAG8可能参与了大鼠骨癌痛的形成和发展,鞘内注射其siRNA可以通过干扰脊髓TDAG8的表达而具有疼痛缓解作用。
- 殷伟杭黎华郑小艳王丽娜贾晓明杨建平许期年王秀云左剑玲
- 关键词：脊髓鞘内注射痛觉过敏
- 骨癌痛大鼠脊髓背角MEK/ERK信号转导通路与CX3CR1的关系被引量：1
- 2013年
- 目的 评价骨癌痛大鼠脊髓背角丝裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶（MEK/ERK）信号转导通路与CX3C趋化因子受体1（CX3CR1）的关系.方法 雌性未交配SD大鼠50只,体重150～ 180 g,采用随机数字表法分为5组（n=10）：假手术组（Ⅰ组）、骨癌痛组（Ⅱ组）、假手术＋ MEK抑制剂U0126组（Ⅲ组）、骨癌痛组＋5％二甲基亚砜（DMSO）组（Ⅳ组）和骨癌痛＋MEK抑制剂U0126组（Ⅴ组）.左侧胫骨骨髓腔内接种Walker 256乳腺癌肿瘤细胞制备大鼠骨癌痛模型.Ⅲ组和Ⅴ组于接种后第10 ～ 12天鞘内注射U0126 10 μg/10 μl,1次/d,Ⅳ组鞘内注射等体积5％DMSO,于接种前及接种后第3、6、9、10天和第11、12天给药后测定机械痛阈.接种后第12天给药后处死大鼠,取L4-6脊髓背角,分别采用免疫组化法和Western blot法检测CX3CR1的表达.结果 与Ⅰ组和Ⅲ组比较,Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组大鼠接种后第6～ 12天机械痛阈降低,脊髓背角CX3CR1表达上调（P＜0.01）；与Ⅱ组和Ⅳ组比较,Ⅴ组接种后第10 ～ 12天机械痛阈升高,脊髓背角CX3CR1表达下调（P＜0.01）.结论 脊髓背角MEK/ERK信号转导通路可能通过调节CX3CR1表达参与大鼠骨癌痛的发生和发展.
- 孙艳胡计嬅王加玉杨建平
- 关键词：丝裂原激活蛋白激酶类骨肿瘤脊髓
- 脊髓背角小胶质细胞组织蛋白酶S在大鼠骨癌痛维持中的作用
- 2013年
- 目的 探讨脊髓背角小胶质细胞组织蛋白酶S（CatS）在大鼠骨癌痛维持中的作用.方法 雌性未交配SD大鼠50只,4～6周龄,体重150～ 180 g,采用随机数字表法,将其分为5组（n=10）：假手术组（S组）、骨癌痛组（BCP组）、假手术＋CatS抑制剂吗啉亮氨酸高苯丙氨酸乙烯基苯基砜（LHVS）组（S＋L组）、骨癌痛＋二甲基亚砜组（BCP＋D组）和骨癌痛＋LHVS组（BCP＋L组）.左侧胫骨骨髓腔内接种浓度为2×107/ml Walker256细胞5μl制备大鼠骨癌痛模型.分别于造模后10、11、12d时S＋L组和BCP＋L组鞘内注射LHVS 50 nmol/10l,1次/d,BCP＋D组给予等容量二甲基亚砜.分别于造模前1d（基础状态）及造模后3、6、9、10、11、12 d（T0-6）测定机械缩爪反应阈（MWT）,分别于鞘内给药前、鞘内给药后0.5、1.0、3.0、6.0、9.0、12.0、24.0 h时测定（MWT）.处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用免疫组化法测定OX-42表达.结果 与S组比较,BCP组、BCP＋D组和BCP＋L组T2-6时MWT降低,脊髓背角OX-42表达上调（P＜0.01）,S＋L组MWT和脊髓背角OX-42表达差异无统计学意义（P＞0.05）；与BCP组比较,BCP＋L组T4-6时MWT升高,脊髓背角OX-42表达下调（P＜0.01）,BCP＋D组MWT和脊髓背角0X-42表达差异无统计学意义（P＞0.05）.S＋L组和BCP＋D组鞘内给药后3.0、6.0、9.0h时MWT低于BCP＋D组（P＜0.01）.结论 脊髓背角小胶质细胞CatS激活参与了大鼠骨癌痛的维持.
- 王加玉胡计华孙艳杨建平王丽娜许期年王秀云左剑玲
- 关键词：半胱氨酸内肽酶类小神经胶质细胞
- TLR4/NF-κB信号转导通路在大鼠骨癌痛形成及维持中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨Toll样受体4（TLR4）/NF-κB信号转导通路在大鼠骨癌痛形成及维持中的作用.方法 健康雌性SD大鼠81只,5～6周龄,体重150～ 180 g,采用随机数字表法,将其分为8组,骨癌痛组（BCP组）18只,其他7组每组9只,对照组（C组）不作任何处理；骨癌痛组大鼠胫骨注射l×105 Walker 256乳腺癌细胞；Ⅴ1组、TLR4siRNA1组和TLR4msiRNA1组分别于造模后4d（预注射）鞘内注射溶媒、TLR4小干扰RNA （TLR4siRNA）和TLR4错义siRNA（TLR4msiRNA）,Ⅴ2组、TLR4siRNA2组和TL-R4msiRNA2组分别于造模后9d（后注射）鞘内注射溶媒、TLR4siRNA和TLR4msiRNA.TLR4siRNA和TLR4msiRNA 2μg用5％葡萄糖和jetPEITM稀释到5μl,1次/d,连续3d,最后1次注射后24 h处死大鼠,BCP组分别于造模后7、12d处死大鼠,取L4-6脊髓,采用RT-PCR法检测NF-κBp65 mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达,采用免疫组化法和Western blot法检测NF-κBp65表达.结果 预注射TLR4siRNA可完全抑制骨癌痛大鼠脊髓组织NF-κBp65 mRNA、TNF-α mRNA和NF-κBp65表达上调,而后注射TLR-4siRNA可部分抑制骨癌痛大鼠脊髓组织NF-κBp65 mRNA、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA和NF-κB表达上调（P＜ 0.05或0.01）.结论 TLR4/NF-κB信号转导通路介导了大鼠骨癌痛的形成和维持.
- 刘思兰杨建平王丽娜刘磊李彩芳任春光周静李伟江淼
- 关键词：TOLL样受体4NF-ΚB骨肿瘤疼痛
- 趋化因子受体CCR2拮抗剂在大鼠骨癌痛治疗中的可能机制被引量：4
- 2014年
- 目的观察脊髓单核细胞趋化蛋白受体CCR2在大鼠骨癌痛形成过程中的可能机制。方法大鼠左侧胫骨骨髓腔内接种Walker256乳腺癌细胞制备骨癌痛模型。观察并测量各组大鼠术前1 d,术后3、6、9、10、11、12 d的机械痛阈值。术后12 d取材,免疫组织化学法检测脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)的平均光密度值(MOD),观察脊髓小胶质细胞增殖活化情况。结果与对照组相比,鞘内给予CCR2拮抗剂后大鼠机械痛阈值明显升高,脊髓GFAP表达明显降低(P<0.01)。结论鞘内注射CCR2特异性拮抗剂可能通过抑制脊髓星形胶质细胞的活化而缓解大鼠骨癌痛,CCR2可能是治疗骨癌痛新的靶点。
- 徐振华杨建平胡计嬅陈婷左建玲
- 关键词：骨癌痛脊髓趋化因子CCR2星形胶质细胞CCR2
- 鞘内注射NF-κ B抑制剂对骨癌痛大鼠的抗伤害效应被引量：6
- 2014年
- 目的：研究鞘内注射（it） NF-κ B活化抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（pyrrolidme dithiocarbamate,PDTC）对骨癌痛大鼠机械痛敏及脊髓NF-κB表达的影响,探讨NF-κ B在大鼠骨癌痛中的作用.方法：按照本实验室建立的大鼠胫骨癌痛模型建模.雌性SD大鼠96只,体重150～180 g,按照数字表随机化的原则将大鼠分为4组（n=24）：正常对照组（N组）、骨癌痛组（BP组）、生理盐水组（S组）和NF-κB抑制剂组（PDTC组）.BP组于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μlWalker256（1×10^5）乳腺癌细胞制备骨癌痛模型,N组仅左胫骨上端注入5 μl Hank＇s液.于接种后9d鞘内注射生理盐水10 μl或PDTC 20 μg/10μl（生理盐水溶解）,2次/d,共3d.于接种前、后2、4、6、9和12d、鞘内给药后1、3、6、12、24 h采用von Frey丝测定大鼠术侧后爪机械缩足反射阈值（paw withdrawal threshold,PWT）,PWT测定结束后处死大鼠,取L4～6脊髓,采用real time-PCR法测定NF-κ B p65 mRNA表达,免疫组化法测定NF-κ B p65蛋白表达.结果：接种后6dBP组大鼠的PWT值与基础值相比开始降低,且差异有统计学意义（P＜0.05）,随着接种时间的延长其下降更加显著.鞘内注射PDTC可显著提高骨癌痛大鼠的PWT值,且与没注射PDTC前PWT值比,差异有统计学意义（P＜0.05）.与接种后6d时相比较,骨癌痛大鼠脊髓NF-κ B p65 mRNA和蛋白质的表达在接种后9d （P＜0.01）和12d（P＜0.01）时均显著上调,而鞘内注射PDTC可显著降低大鼠脊髓NF-κ B p65 mRNA和蛋白质的表达（P＜0.01）.结论：鞘内注射PDTC可减轻大鼠骨癌痛引起的痛敏,NF-κ B的激活可诱导或促进大鼠的胫骨癌痛.
- 刘思兰杨建平王丽娜刘磊李彩芳任春光周静李伟江淼马珍妮邱桥成
- 关键词：骨肿瘤
- 脊髓JNK/MCP-1信号通路在大鼠骨癌痛维持中的作用
- 2014年
- 目的 评价脊髓c-Jun氨基末端激酶/单核细胞趋化蛋白-1（JNK/MCP-I）信号通路在大鼠骨癌痛维持中的作用.方法 清洁级成年雌性未交配SD大鼠50只,体重150 ～ 180 g,采用随机数字表法分为5组（n=10）：假手术组（S组）、假手术＋ JNK抑制剂SP600125（SP组）、骨癌痛组（BCP组）、骨癌痛＋ DMSO组（BCP＋ DMSO组）和骨癌痛＋SP600125组（BCP＋ SP组）.采用左侧胫骨骨髓腔内接种Walker256乳腺癌细胞的方法制备骨癌痛模型.SP组和BCP＋ SP组于模型制备后10-12 d时鞘内注射SP600125 10 μg（10μ1）,1次/d,BCP＋ DMSO组注射5％DMSO 10 μl,1次/d.模型制备前1d、制备后3、6、9、10、11和12d时测定机械痛阈.于模型制备后12 d时处死,取L4-6脊髓组织,采用免疫组化学法和Western blot法测定MCP-1的表达.结果 与S组比较,BCP组、BCP＋ DMSO组和BCP＋ SP组模型制备后6-12 d时机械痛阈降低,脊髓MCP-1表达上调（P＜0.01）,SP组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与BCP组比较,BCP＋ SP组模型制备后10-12 d时机械痛阈升高,脊髓MCP-1表达下调（P＜0.01）,BCP＋ DMSO组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脊髓JNK/MCP-1信号通路可能参与了大鼠骨癌痛的维持.
- 徐振华杨建平胡计媾王丽娜陈婷金迪
- 关键词：丝裂原激活蛋白激酶类趋化因子CCL2脊髓
- 脊髓后角胶质细胞活化在大鼠骨癌痛发生中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的:观察N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体2B亚型(NR2B)选择性拮抗剂Ro25-6981对胫骨癌痛大鼠脊髓后角星型胶质细胞的影响,探讨骨癌痛的发生机制。方法:采用Walker256乳腺癌细胞建立雌性SD大鼠胫骨癌痛模型。将大鼠随机分为3组(每组8只):假手术组(Sham组)、模型组(M组)和Ro25-6981组(R组)。假手术组只行鞘内置管,模型组鞘内注射(IT)生理盐水20μl,Ro25_6981组于建立大鼠骨癌痛模型前30 min及术后第7天IT Ro25-6981 20μl(0.5 mg/ml)。Sham组于假手术后3 d及R组和M组均于术后14 d分别取8只大鼠,测定机械痛阈阈值后断头处死,取患侧L4-6脊髓背角组织,采用免疫组化方法观察GFAP、OX-42及NR2B的表达变化判断Ro25-6981对脊髓背角星形胶质细胞及小胶质细胞活化的影响。结果:各组术前基础机械痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05)。与Sham组比较,M组术后14 d时机械痛阈降低(P<0.01),Ro25-6981组术后14 d时机械痛阈降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,Ro25-6981组术后14 d时机械痛阈升高(P<0.05)。与Sham组相比,Ro25-6981组和M组术后14 d时脊髓背角GFAP、OX-42和NR2B蛋白表达均升高(P<0.05);与M组比较,R组术后14 d时脊髓背角GFAP、OX-42和NR2B蛋白表达降低(P<0.05)。结论:鞘内注射Ro25-6981可抑制脊髓背角星形胶质细胞和/或小胶质细胞激活,有效地预防大鼠胫骨癌痛的发生及发展。
- 许讴杨建平王丽娜
- 关键词：胫骨癌痛脊髓背角胶质细胞活化
- 脊髓小胶质细胞CCR2在大鼠骨癌痛维持中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的评价脊髓小胶质细胞CC趋化因子受体2（CCR2）在大鼠骨癌痛维持中的作用。方法健康雌性未交配sD大鼠50只，2月龄，体重160-180g，采用随机数字表法，将其分为5组（n=10）：假手术组（I组）、假手术＋RSl02895（CCR2拮抗剂）组（Ⅱ组）、骨癌痛组（Ⅲ组）、骨癌痛＋DMSO组（Ⅳ组）、骨癌痛＋RSl02895组（V组）。左侧胫骨干骺端骨髓腔内接种Walker256乳腺癌细胞制备大鼠骨癌痛模型。手术后10．12d，1I组和V组分别鞘内注射3μg/RSl02895 10μl，IV组鞘内注射DMSO 10μl，I组和Ⅲ组鞘内注射生理盐水10μl，1次／d。手术前1d、术后3、6、9、10、11、12d时测定机械痛阈，术后12d痛阈测定后，取L4-6脊髓组织，采用免疫组织化学法测定脊髓背角小胶质细胞激活标记物（OX-42）水平，采用ELISA法测定脊髓IL-lβ、IL-6及TNF-α的含量。结果与I组比较，Ⅲ组、Ⅳ组、V组术后6-12d时机械痛阈降低，OX-42阳性细胞数、脊髓IL-lβ、IL-6及TNF-a含量升高（P〈0．01），Ⅱ组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与Ⅲ组比较，V组术后10-12d时机械痛阈升高，OX-42阳性细胞数、脊髓IL-lβ、IL-6及TNF-a含量降低（P〈0．01），Ⅳ组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论脊髓小胶质细胞CCR2参与大鼠骨癌痛的维持，其机制可能与激活小胶质细胞从而促进炎性细胞因子释放有关。
- 徐振华杨建平胡计嬅陈婷王丽娜孙艳
- 关键词：骨肿瘤CCR2小神经胶质细胞脊髓
