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山羊痘病毒serpin基因缺失重组毒株的构建和鉴定: 2013年; 通过敲除与山羊痘病毒(GTPV)毒力相关的serpin基因以构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法克隆了包含GTPV AV41株serpin基因(ORF149)及其侧翼长为1 745bp的片段,并在serpin基因片段内部分别插入报道基因EGFP和抗性基因gpt表达盒,构建GTPV重组转移载体pSp-Eg。然后将重组转移载体pSp-Eg与GTPV AV41株共转染BHK-21细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定其遗传稳定性和生长特性。结果,成功获得一株敲除serpin基因的重组病毒vSp-Eg。该重组病毒在至少10代能稳定表达绿色荧光蛋白,在培养细胞中的生长特性与亲本毒株基本一致,但病毒效价降低1个数量级。结果表明,serpin基因是GTPV的复制非必需基因。; 郑敏李春艳韦显凯梁晟苏娇秀郑列丰李军; 关键词：山羊痘病毒重组病毒病毒载体

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广西壮族自治区自然科学基金(0991042)