山东省自然科学基金(Y2005C04)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究CD59配体肽基因对卵巢癌细胞CD59表达的影响。方法构建CD59配体肽基因的真核表达重组体(CD59配体-pIRES),转染人卵巢癌细胞A2780,G418筛选稳定表达细胞克隆;RT-PCR及Westernblot方法检测细胞表面CD59 mRNA及蛋白的表达;MTT法测定细胞增殖抑制率。结果成功构建了CD59配体肽基因真核表达重组体,转染后的A2780 CD59 mRNA及蛋白的表达水平与WT-A2780比较均明显下降(t=9.217、.20,P<0.05);细胞增殖抑制率明显增高(F=5.417,q=3.93,P<0.05)。结论CD59配体肽基因可影响人卵巢癌细胞A2780表面CD59的表达,有望用于肿瘤治疗。
- 李伟伟高美华张蓓解西河
- 关键词：A2780细胞重组融合蛋白质类
- 转录因子Sp1在肿瘤细胞CD59表达调控中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的:构建针对Sp1基因siRNA真核表达载体,转染前列腺癌细胞PC-3,研究反式作用因子Sp1对CD59表达的影响。方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性Sp1基因的重组载体pSUPER-siSp1,脂质体法转染前列腺癌细胞,G418筛选建立稳定表达转染基因的细胞株,RT-PCR和Western blot检测转染细胞中Sp1和CD59基因的表达,染料释放试验判断CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用。结果:成功构建了Sp1基因siRNA真核表达载体,转染PC-3细胞可表达荧光蛋白,稳定转染的PC-3细胞CD59基因的mRNA和蛋白水平降低,染料释放实验表明CD59基因受抑制后对补体溶破的抵抗作用降低。结论:siRNA-Sp1重组载体有效地抑制了CD59的表达,降低CD59的抗补体活性,结果证明反式作用因子Sp1是CD59表达调控中重要的转录因子,为探讨CD59在肿瘤细胞中高表达的研究奠定了基础。
- 梁岩高美华张蓓
- 关键词：CD59启动子RNA干扰
- RNA干扰沉默Spl基因抑制前列腺癌细胞中CD59的表达
- 2010年
- 目的采用RNA干扰技术沉默前列腺癌PC-3细胞转录因子Sp1的表达,观察其对CD59的表达影响。方法构建靶向人Spl基因的干扰载体(pSUPER-siSp1),脂质体介导转染PC-3细胞,荧光倒置显微镜下观察转染效率,RT-PCR及Western-blotting检测其对Sp1及CD59蛋白质水平的影响,流式细胞仪检测CD59的表达,MTT法检测CD59抗补体活性的变化。结果成功构建针对Spl的干扰载体,转染后能够有效抑制前列腺癌PC-3细胞中Sp1与CD59蛋白的表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT实验显示,下调Spl表达可显著抑制CD59抗补体活性。结论 Spl基因沉默能够抑制人前列腺癌CD59的表达,为前列腺癌基因治疗提供新的思路和手段。
- 高美华梁岩
- 关键词：CD59RNA干扰
