四川省教育厅重点项目(2004A020)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 相关作者：任正隆周建平冯娟杨足君邓科君更多>>
- 相关机构：电子科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黑麦染色体组中一个新重复序列的发现、定位与应用被引量：5
- 2007年
- 【目的】寻找黑麦基因组中新的重复序列作为特异PCR标记。【方法】以普通小麦中国春、川农18、育成品系R111、绵阳11为对照,以荆州黑麦、秦岭黑麦、非洲黑麦、森林黑麦为材料,用RAPD法筛选到黑麦基因组中的一个高拷贝DNA片段OPD15940,将OPD15940输入到NCBI的BLAST框中进行比对。根据OPD15940设计特异PCR引物D15F和D15R,利用这对引物对小麦族物种进行扩增,验证OPD15940的特异性。进而利用原位杂交技术定位pScD15940在染色体上的位置。【结果】序列比对后发现OPD15940与重复序列Sukkula中近60个53bp的小片段有较高的同源性,但又不同于Sukkula,是一类新的重复序列。通过特异PCR确定仅含黑麦染色质的物种能扩增出OPD15940,因而OPD15940为黑麦所特有。原位杂交结果显示除端部区域外,pScD15940弥散状分布在黑麦整套染色体上。【结论】OPD15940可以作为分子标记检测导入到小麦背景中的黑麦染色体。
- 刘成杨足君冯娟迟世华周建平任正隆
- 关键词：黑麦原位杂交特异PCR
- 利用改进的Oligo-capping法构建手掌参全长cDNA文库被引量：11
- 2006年
- Oligo-capping法是构建全长cDNA文库的重要方法之一.以名贵中药手掌参(Gymnadenia conopseaR.Br.)的幼芽组织为材料,通过减少mRNA的用量,用pUC18作载体,设计特异引物对第1链cDNA进行PCR扩增,按片段大小分级回收cDNA,形成了一种以Oligo-capping法为基础,构建珍稀材料全长cDNA文库的快速、简单的技术体系.利用该方法,首次成功地构建了手掌参的全长cDNA文库.经综合评价,文库容量达到了8×105个/μg cDNA,全长cDNA比例达到68%,重组率超过96%,说明本实验的改进非常成功.该文库的建成为手掌参的遗传资源保护和功能基因发掘等理论与应用研究奠定了基础.
- 周建平杨足君白丽莉冯娟李光蓉邓科君任正隆
- 关键词：全长CDNA文库
