国家自然科学基金(30600337)
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 相关作者：杨新春易方方蔡军林国生王腾更多>>
- 相关机构：武汉大学首都医科大学附属北京朝阳医院中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白藜芦醇对大鼠心肌梗死后室性心律失常及长期存活率的影响被引量：4
- 2009年
- 目的研究白藜芦醇埘大鼠心肌梗死后室性心律失常、心室重构和长期存活率的影响。方法将SD大鼠随机分成假手术组、心肌梗死组、白藜芦醇治疗组（治疗组）。心肌梗死组和治疗组开胸结扎冠状动脉左前降支，假手术组不结扎。植入性射频发射器记录24h心电图，并分析心肌梗死后24h内室性心律失常发病率；侵入性在体电生理检测评价室性心律失常的诱发率；全细胞膜片钳技术检测白藜芦醇对单个心室肌细胞的电生理作用；免疫荧光染色观察心肌细胞的结构改变。结果与心肌梗死组相比，治疗组明显抑制了心肌梗死导致的室性心动过速和心室颤动发病率，治疗组室性心动过速的诱发率低于心肌梗死组，差异有统计学意义（46％VS81％，P〈0．01）。14周后，治疗组心肌梗死面积和死亡率较心肌梗死组分别下降了20％和33％。膜片钳记录显示白藜芦醇抑制了L型钙电流。免疫荧光染色发现治疗组心肌细胞横断面积小于心肌梗死组。结论白藜芦醇可以通过抑制大鼠心肌L型钙电流发挥抗心律失常作用，并抑制了左心室重构，提高了大鼠心肌梗死后的存活率。
- 卞洲艳唐其柱易方方杨新春王腾唐艳红王晞蔡军
- 关键词：白藜芦醇心肌梗死室性心律失常存活率
- HCN4通道基因过度表达的电生理实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨腺病毒介导超极化激活环核苷酸门控通道（HCN4）在猪左心室过度表达的电生理效应。方法应用细菌内同源重组法构建携带人HCN4基因的重组腺病毒载体（Ad-HCN4）和绿色荧光蛋白的重组腺病毒载体（Ad-GFP）。实验动物随机分成3组：Ad-HCN4组（n=6），Ad-GFP组（n=5）和PBS组（n=3）。腺病毒或PBS注入到Yorkshire猪左心室游离壁，3-4d后行房室结消融造成完全性房室阻滞，记录体表心电图并进行心内起搏标测。注射部位心肌组织用酶分离后获得单个心肌细胞，膜片钳记录起搏电流（If）和内向整流钾电流（Ik1）。结果Ad-HCN4组室性心律频率显著快于Ad-GFP组和PBS组，心腔内起搏标测证实该心律起源于Ad-HCN4注射区且可被异丙肾上腺素所调节，无水乙醇消融Ad-HCN4注射区后该心律消失。Ad-HCN4转染心肌细胞表达较大的If;Ik1在3组间差异无统计学意义。结论腺病毒介导HCN4通道基因心室局部高表达发挥了生物起搏器的作用。
- 易方方杨新春蔡军李延辉刘秀兰
- 关键词：生物起搏器基因治疗腺病毒
- 兔窦房结细胞的分离方法及其起搏电流特征性探讨
- 2011年
- 探讨了家兔窦房结(Sino-Atrial Node,SAN)细胞的分离方法及其形态和起搏电流(Funny Current,If)的特征。通过打结定位法确定了带有"中心结区"的家兔SAN组织条,双酶法分离SAN细胞,利用全细胞穿孔膜片钳技术记录SAN细胞的If。结果显示,SAN组织为上宽下窄的枣核型,区域体积约为6.25mm×2.23mm×0.26mm,或6mm×2mm×0.1mm—6mm×2mm×3.3mm。SAN细胞成狭长梭形,无清晰横纹,细胞长(65.3±7.8)μm,宽为(7.2±3.1)μm。在正常Tyrode液中,可恢复规则自律性搏动,频率为(187.3±5.6)次/min,典型SAN细胞数量占整个分离细胞的2%—5%。根据电压钳制方案,If电流被引出,呈内向性斜坡状,随着钳制电压降低,起搏电流逐渐增大,并随钳制时间延长,倾斜度也增大。If带有明显尾电流,也随着超级化激活电位降低,逐渐增大。根据二者电流大小拟合的电流-电压曲线,呈典型横向Y形。本法获得SAN细胞形态典型,状态和活性良好,能够记录具有特征性的If,可供心血管领域有关针对SAN细胞If研究的技术借鉴。
- 王腾吴平亚范新荣陈勇军陈卉黄从新
- 关键词：窦房结细胞形态学
- 腺病毒介导HCN4通道基因过度表达构建生物起搏器的实验研究被引量：1
- 2007年
- 电子起搏器是窦房结功能障碍和重度房室传导阻滞的首选治疗。但是，目前使用的电子起搏器存在很多缺陷。最近的研究表明，介导起搏电流（If）的超极化激活环核苷酸门控通道基因（HCN4）在生理性起搏机制中扮演重要角色。在人类遗传性窦房结功能障碍家系中存在HCN4基因突变。而且，在HCN4基因敲除小鼠胚胎心脏记录不到具有4期自动除极特征的起搏细胞动作电位。最近，国外用HCN4腺病毒载体转染体外培养的心室肌细胞使其过度表达If电流，成功将其转变为“起搏”细胞并显著增加了搏动频率。
- 杨新春易方方蔡军江洪林国生蒋学俊杨波胡莉华
- 关键词：基因过度表达生物起搏器窦房结功能障碍重度房室传导阻滞细胞动作电位
- 用^99Tc^m-MIBI评价腺苷预适应对缺血心肌细胞的保护作用
- 2008年
- 目的探讨辨^99Tc^m-甲氧基异丁基异腈（MIBI）评价腺苷预适应对心肌缺血／再灌注（L／R）损伤的保护作用及其机制。方法应用Langendorff装置建立离体兔心脏I／R模型，18只离体灌注兔心脏随机分成I／R组6只、腺苷预适应＋I／R组（AD）6只、缺血预适应＋I／R组（IPC）6只。用含^99Tc^m-MIBI（55．5MBq）的Krebs-Henseleit（KH）液灌注40min，测定^99Tc^m-MIBI摄取相和洗脱相心肌的放射性变化。观察左心室血流动力学变化、心肌细胞肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出量的变化、心肌梗死面积，用透射电镜观察心肌受损程度。采用SPSS11．5软件和Excel软件对数据进行分析。结果AD和IPC组MIBI摄取率和滞留分数明显高于I／R组（t=2．614—7．730，P均〈0．05）。而AD和IPC组摄取率和滞留分数差异均无统计学意义（t=0．614—2．227，P均〉0．05）。左心室功能恢复、心肌CK和LDH漏出量、心肌梗死面积、电镜分析结果均表明，AD和IPC组心肌受损程度较I／R组轻。心肌^99Tc^m-MIBI放射性与心肌冠状动脉血流量呈明显正相关（r=0．793，P〈0．001）；而与梗死心肌／缺血心肌质量百分比呈明显负相关（r=-0．86，P〈0．0001）。结论腺苷预适应与缺血预适应对I／R心肌具有相似的心脏保护效应。心肌^99Tc^m-MIBI血流动力学变化与心肌活力密切相关，可以作为评价心肌腺苷预适应及其机制的有效指标。
- 梁君林国生蔡军周逸陈辉霖
- 关键词：腺苷MIBI心肌再灌注
- 人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因体外转染乳鼠心肌细胞被引量：1
- 2009年
- 目的观察人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(hHCN4)基因对大鼠心肌细胞搏动的影响,初步探讨hHCN4转染心肌细胞构建生物起搏器的可行性。方法胰酶消化法分离培养原代乳鼠心肌细胞,随机分为实验组、空病毒对照组、空白对照组,转染时分别加入带hHCN4和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒、带GFP的腺病毒、PBS,观察分析心肌细胞转染前,转染后2天和3天的搏动情况;采用逆转录聚合酶链式反应和免疫荧光检测各组心肌细胞hHCN4 mRNA和通道蛋白的表达。结果hHCN4重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞后2天和3天较转染前搏动频率明显增加,频率高于对照组;hHCN4重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞后,可检测到hHCN mRNA和通道蛋白表达,而对照组无表达。结论hHCN4转染心肌细胞的搏动频率增加,hHCN4基因转导入心肌细胞构建生物起搏器的方法具有初步可行性。
- 张翩林国生蔡军马金安曹庭家曾彬郭军
- 关键词：心血管病学心肌细胞HCN4基因腺病毒生物起搏器
- 胚胎干细胞移植到大鼠梗死心脏后的分化研究
- 2010年
- 目的研究胚胎下细胞在梗死心脏微环境下向心肌细胞、成纤维细胞的分化情况。方法将大鼠分为两组,梗死组为正常大鼠通过结扎左前降支(LAD)制备,对照组为正常大鼠。将4,6-二氨基(DAPI)标记的具有伞能分化能力的鼠胚胎干细胞(mESCs)注射人急性心肌梗死大鼠(18只)或对照绀大鼠(16只)的心脏,观察胚胎干细胞在休内的分化情况。结果 DAPI标记的移植mESCs在对照和梗死心脏均能成活并形成稳定的移植岛,同时在移植区有巨噬细胞浸润。mESCs移植2～4周后,心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)阳性的移植mESCs比例在正常心脏较梗死心脏高(2.67%±0.79%比1.06%±0.52%,P<0.01),但4周后cTnT阳性的DAP1标记细胞在正常和梗死心脏的比例差异无统计学意义(1.17%±0.98%比1.07±1,02%,P>0.05)。mESCs在埘照组和梗死组心脏都能分化为成纤维细胞。结论移植mESCs不仪能仔活,还可分化进入大鼠梗死心肌细胞。但是,梗死心脏的微环境不能选择性促进mESCs分化进入心肌细胞。
- 钱伟莉杨新春于丽萍郭雷生高飞刘秀兰
- 关键词：胚胎干细胞干细胞移植心肌梗死
