中国博士后科学基金(201003774)
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
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- 大鼠牙源性细胞复合nHAC/PLA支架体内构建牙体组织-骨复合体样结构的研究被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨不同组合生长因子诱导的大鼠牙源性上皮细胞(rDECs)、间充质细胞(rDMCs)复合nHAC/PLA支架体内形成牙体组织-骨复合体样结构的能力。方法:应用酶消化法和差速消化法分离培养rDECs和rDMCs,免疫荧光染色鉴定其来源。将各组细胞-支架复合物移植裸鼠皮下3月、5月后分别取材,检测移植物形成牙体组织-骨复合体样结构能力。结果:成功分离培养、鉴定大鼠牙源性上皮细胞和间充质细胞。细胞-支架复合物移植后3月,组1、2、3在细胞-支架接触部位均发现类骨质、新生成熟骨和血管形成,并有OCN、OPN的阳性表达。组2促成骨作用最强。对照组4没有新生骨形成,仅有少量胶原纤维和血管。移植后5月,组1、3均形成没有髓腔的牙根样结构,部分区域有DSPP、DMP1、CAP表达。组2形成周边有新生骨、中央有单根牙体样组织,中心为含有牙髓样组织和血管的髓腔样结构,并有DSPP、DMP1、OPN、OCN在髓腔内壁牙本质基质、部分牙髓样组织和血管内的阳性表达,ameloblastin、CAP分别在釉质样、牙骨质样组织中表达阳性。对照组4形成新生骨,OCN强阳性表达,未形成牙体样结构。结论:经TGF-β1+BMP4诱导的rDECs+rDMCs-nHAC/PLA体内移植物促成骨和成牙作用最强,移植后5月形成牙体组织-骨复合体样结构。
- 赵征刘洪臣黄征难鄂玲玲杨海青
- 大鼠牙源性细胞复合nHAC/PLA支架的体外生物相容性研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨大鼠牙源性上皮细胞(rDECs)、牙源性间充质细胞(rDMCs)分层复合纳米羟基磷灰石-胶原/聚乳酸(nHAC/PLA)支架共生长的生物相容性。方法:①.应用酶消化法和差速消化法分离培养rDECs和rDMCs,经cytokeratin、vimentin免疫荧光染色鉴定其来源。②.应用扫描电镜观测rDECs、rDMCs分层复合nHAC/PLA支架后的生物相容性。结果:①.成功分离培养、鉴定大鼠牙源性上皮细胞和间充质细胞,免疫荧光染色鉴定rDECs、rDMCs分别表达cytokeratin、vimentin,证明rDECs、rDMCs分别来源于牙源性上皮组织、中胚层间充质。②.扫描电镜显示:rDECs、rDMCs复合nHAC/PLA共培养5 d后,椭圆形的rDECs和长梭形的rDMCs胞体充分伸展,胞质中胶原纤维和基质分泌丰富,细胞与支架相互交织成网状。10d后,rDECs、rDMCs胞质中基质分泌更加丰富,覆盖部分细胞,并与支架相融合。结论:rDECs、rDMCs在nHAC/PLA支架上增殖、分化旺盛,具有良好的生物相容性。
- 赵征刘洪臣魏立鄂玲玲贾保军杨海青
- 关键词：聚乳酸支架生物相容性
- 不同因子对大鼠牙源性间充质细胞成牙本质分化的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨b FGF、IGF1、BMP4、TGF-β1联合应用对大鼠牙源性间充质细胞(rat dental mesenchymal cells,r DMCs)成牙本质分化的影响。方法 :应用酶消化法和差速消化法分离、培养大鼠牙源性上皮细胞(r DECs)和r DMCs,经cytokeratin、vimentin免疫荧光染色鉴定其来源。应用茜素红染色、Gomori钙-钴法检测矿化液诱导下r DMCs的矿化能力。应用免疫组织化学染色、图像分析、实时荧光定量PCR和Western印迹法检测在b FGF+IGF1(组1)、TGF-β1+BMP4(组2)、b FGF+IGF1+TGF-β1+BMP4(组3)分别诱导下r DMCs中DSPP、CAP、OPN、OCN的表达差异。采用SPSS14.0软件包对数据进行统计学分析。结果:成功分离培养、鉴定r DECs和r DMCs,经矿化液诱导后的r DMCs钙结节和ALP染色阳性。组1、2中,DSPP、CAP、OPN、OCN m RNA和蛋白的表达水平均显著高于空白对照组4,差异显著(P<0.01),其中组1 CAP、OCN和组2 DSPP、OPN的表达水平最高。结论:r DMCs经矿化诱导后具有成骨特性。b FGF+IGF1显著促进CAP、OCN的表达,加速r DMCs向成牙骨质细胞、成骨细胞分化与牙骨质基质、骨基质的矿化;TGF-β1+BMP4显著促进DSPP、OPN的表达,加速r DMCs向成牙本质细胞、成骨细胞分化与牙本质基质、骨基质的矿化,显示其成骨趋向。4种因子联合应用,并不具备显著的协同作用。
- 赵征刘洪臣黄征难鄂玲玲杨海青
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子胰岛素样生长因子1转化生长因子Β1
- 远航舰艇官兵牙周病发病状况调查分析被引量：6
- 2015年
- 目的:调查分析长时间远航舰艇官兵牙周病的发病状况。方法 :对比分析参与长时间远航的186名舰艇官兵远航前、后的简化牙石指数(CI-S)、菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、社区牙周指数(CPI)、附着丧失(AL)、缺失牙数(NMT)和牙周病患病率的差异。采用SPSS14.0软件包对数据进行统计学分析。结果:远航后各项牙周检测指标值均较远航前显著增高(P<0.01)。186名研究对象在远航前牙周病总患病率为59.7%,远航后患病率增加到83.3%。其中,牙龈炎和轻、中度牙周炎患者增加较多,远航后牙周病患病率和患病程度与远航前相比差异显著(P<0.01)。结论:远航环境、饮食约束和口腔卫生不良可显著影响舰艇官兵的牙周状况,及时有效地加强口腔卫生宣教、养成良好正确的刷牙习惯、均衡合理膳食及适当的牙周基础和药物治疗,对远航舰艇官兵的牙周健康十分重要。
- 赵征李露嘉黄征难贾保军杨海青
- 关键词：远航舰艇官兵牙周病
- ADAM28 shRNA干扰载体的构建及对人牙周膜干细胞的抑制效应
- 2020年
- 目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)shRNA干扰载体对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,HPDLSC)内ADAM28基因表达的抑制作用,为先天性牙根发育不全疾病的基因治疗提供实验依据。方法:设计合成4对特异性shRNA干扰片段,与pGPU6/GFP/Neo载体连接,构建、鉴定ADAM28 shRNA干扰载体并转染HPDLSC 48 h后,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹分析检测抑制效率。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:酶切和测序鉴定证明双链shRNA正确插入表达载体pGPU6/GFP/Neo,重组干扰载体构建成功并高效转染HPDLSC。QRT-PCR和Western印迹检测显示,pGPU6/GFP/Neo-ADAM28-shRNA1-4均有显著的抑制效率,shRNA1的抑制效率最高;ADAM28-shRNA1-4组与未转染组、阴性对照组比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论:ADAM28 shRNA干扰载体可有效抑制HPDLSC内ADAM28的基因表达。
- 赵征邱海燕傅兰李杰
- 关键词：SHRNA人牙周膜干细胞
- ADAM28反义寡核苷酸对人牙龈成纤维细胞内ADAM28的基因表达的影响
- 2019年
- 目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义寡核苷酸对人牙龈成纤维细胞(HGFs)内ADAM28表达的抑制作用。方法设计合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HGFs后,通过RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果 ADAM28 AS-ODN转染HGFs后,在转录、翻译和蛋白水平HGFs内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异(P<0.05)。结论 ADAM28 AS-ODN可有效阻断HGFs内ADAM28的基因表达。
- 赵征李杰丁秀娜周磊孙德刚
- 关键词：反义寡核苷酸人牙龈成纤维细胞
- ADAM28反义核酸治疗牙根发育不良疾病的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)治疗牙根发育不良疾病(CHTR)的可行性和效果。方法:应用反义核酸技术、基因重组、动物实验和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测ADAM28 AS-ODN、S-ODN和真核质粒对CHTR的不同效应。结果:用药后AS-ODN组患牙松动度明显减轻,牙周袋深度显著变浅,COL-Ⅱ、IL-1β、PGE2水平均显著下降,呈现炎症愈合趋势;S-ODN组和真核质粒组各项检测结果正相反,炎症呈显著上升趋势。结论:应用ADAM28 AS-ODN(200μmol/L)可有效治疗牙根发育不良疾病,但最佳药物浓度和用药时间还需进一步探讨。
- 赵征黄征难刘洪臣
- 关键词：反义核酸
- ADAM28反义核酸对人牙龈成纤维细胞生物学功能的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究金属蛋白酶解离素28(a disintegrin and metalloproteinase 28,ADAM28)反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖、分化、凋亡的影响,并分析可能的作用机制。方法:采用细胞培养、基因转染、四甲基唑蓝(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸转染HGFs后对细胞生物学特性的影响。采用SPSS16.0软件包中的SNK检验对数据进行统计学分析。结果:ADAM28 AS-ODN组HGFs的增殖活性显著降低。AS-ODN组HGFs处于S期的细胞百分比显著低于SODN组和未转染组,G2+M期的细胞百分比显著低于未转染组,AS-ODN组的细胞增殖指数(PI=S+G2M)显著低于其他2组,差异显著。AS-ODN组碱性磷酸酶(ALP)分泌活性、凋亡细胞百分比显著升高。结论:ADAM28反义核酸可显著抑制HGFs的增殖,并影响细胞周期的变化,促进其分化,显著诱导HGFs的凋亡。
- 赵征魏立李露嘉叶勇黄征难杨海青
- 关键词：反义核酸人牙龈成纤维细胞
- ADAM28对人牙龈成纤维细胞表达CAP、OPN的影响
- 2017年
- 目的:研究金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)和正义对照(S-ODN)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)表达牙骨质附着蛋白(CAP)和骨桥蛋白(OPN)的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、免疫细胞化学和图像分析技术检测ADAM28对HGFs表达CAP、OPN的影响。结果:ADAM28 AS-ODN转染HGFs后,细胞内CAP、OPN的表达显著降低(P<0.05),ADAM28 S-ODN转染HGFs后,细胞内CAP、OPN的表达显著升高(P<0.05)。结论:ADAM28 AS-ODN可有效封闭HGFs内CAP、OPN的表达。
- 赵征杨海青姜田田黄征难
- 关键词：反义核酸人牙龈成纤维细胞免疫细胞化学
