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国家自然科学基金(30872440)

作品数：6 被引量：13H指数：2
相关作者：杨辉卜慧莲高峰田玉科王鹏更多>>
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文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生

主题

  • 3篇疼痛
  • 3篇吗啡
  • 3篇吗啡耐受
  • 2篇注射
  • 2篇Δ阿片受体
  • 2篇阿片
  • 2篇阿片受体
  • 2篇RNA干扰
  • 1篇短发卡RNA
  • 1篇血清
  • 1篇血清素
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇镇痛作用
  • 1篇色胺
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇特异性拮抗剂
  • 1篇内注射
  • 1篇鞘内

机构

  • 5篇华中科技大学

作者

  • 5篇杨辉
  • 3篇田玉科
  • 3篇王鹏
  • 3篇卜慧莲
  • 3篇高峰
  • 2篇逄坤芳
  • 2篇陈鹤翔
  • 2篇刘希江
  • 1篇廖志品
  • 1篇胡松权
  • 1篇曹菲
  • 1篇安珂
  • 1篇田学愎
  • 1篇江辉

传媒

  • 1篇中国疼痛医学...
  • 1篇中华麻醉学杂...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2013
  • 3篇2012
  • 2篇2011
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
2012年
目的构建大鼠δ阿片受体(delta opioid receptor,DOR)基因小发卡RNA(shRNA)及人前脑啡肽原基因(hu-man preproenkephalin gene,hPPE)双表达慢病毒载体并鉴定。方法根据大鼠DOR mRNA序列设计shRNA并合成包含正、反义靶序列的互补DNA链,退火后插入至shRNA表达载体pENTR/U6vector中,构建shRNA表达质粒,并转化至感受态细胞DH5α,抽提质粒后进行测序。合成hPPE基因序列并插入到表达载体pcDNA3.1(+)中,转化至感受态细胞DH5α,挑取多个单克隆进行测序验证。将hPPE插入已构建成功的pENTR/U6-shRNA载体中,再与慢病毒载体pLenti7.3/V5-DEST重组,构建慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA并转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序验证,保留测序验证正确的LR重组质粒。用构建的慢病毒表达载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA和包装质粒共转染293T细胞,包装病毒,并测定滴度。结果经测序验证重组质粒pENTR/U6-shRNA、pcDNA3.1(+)-hPPE和慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA均构建成功。大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒包装成功,病毒滴度为1×107 TU/mL。结论大鼠DOR基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体构建成功,为研究DOR和hPPE在吗啡耐受中的作用机制及探求更加合理的镇痛方式奠定了基础。
逄坤芳陈鹤翔杨辉卜慧莲刘希江
关键词：Δ阿片受体RNA干扰慢病毒吗啡耐受
不同途径注射含人脑啡肽原基因重组腺相关病毒对慢性神经病理痛大鼠的镇痛作用
2013年
目的构建含人前脑啡肽原基因的腺相关病毒载体（rAAV／hPPE），将此病毒载体通过不同途径注射至慢性疼痛模型大鼠体内，观察rAAV介导的hPPE体内转染的镇痛作用。方法将阳性对照质粒rAAV／hPPE分别经蛛网膜下、尾静脉和骨骼肌3种途径注射至慢性挤压伤疼痛模型大鼠体内，观察注射后大鼠热痛阈和机械痛阈的变化，8周后，处死大鼠，运用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定大鼠组织hPPE的表达，用放射免疫方法测定大鼠器官组织中亮氨酸．脑啡肽（L—EK）的含量。结果行为学结果说明3种给药方式均可在5d-8周内对坐骨神经慢性挤压（CCI）热痛阈和机械痛阈显著升高；L—EK在脊髓组织中表达水平最高的是鞘内注射组而在血管和心肌组织中表达最高的是静脉注射组；PCR结果表明3种给药方式导致不同组织hPPEmRNA表达水平增高。结论将rAAV／hPPE注射到CCI大鼠体内，rAAV能将hPPE导入易感细胞，并获得较好的镇痛效果。
杨辉高峰安珂田学愎王鹏田玉科江辉
关键词：腺相关病毒疼痛
Laterodorsal Tegmentum and Pedunculopontine Tegmental Nucleus Circuits Regulate Renal Functions: Neuroanatomical Evidence in Mice Models被引量：5
2012年
Neurons in the laterodorsal tegmentum (LDTg) and pedunculopontine tegmental nucleus (PPTg) play important roles in central autonomic circuits of the kidney. In this study, we used a com-bination of retrograde tracers pseudorabies virus (PRV)-614 and fluorescence immunohistochemistry to characterize the neuroanatomic substrate of PPTg and LDTg innervating the kidney in the mouse. PRV-614-infected neurons were retrogradely labeled in the rostral and middle parts of LDTg, and the middle and caudal parts of PPTg after tracer injection in the kidney. PRV-614/TPH double-labeled neurons were mainly localized in the rostral of LDTg, whereas PRV-614/TH neurons were scattered within the three parts of LDTg. PRV-614/TPH and PRV-614/TH neurons were located predomi-nantly in the caudal of PPTg (cPPTg). These data provided direct neuroanatomical foundation for the identification of serotonergic and catecholaminergic projections from the mid-brain tegmentum to the kidney.
叶达伟郭晴晴冯觉平刘成杨辉高峰周外平周伶项红兵李荣春
关键词：TEGMENTUMNUCLEUSNUCLEUSTRYPTOPHANHYDROXYLASEHYDROXYLASE
大鼠delta阿片受体短发卡RNA干扰真核表达载体的构建和鉴定
2011年
背景:长期应用阿片受体治疗疼痛会导致药物耐受或成瘾,可能与delta阿片受体密度上调有关。目的:设计及构建大鼠delta阿片受体短发卡RNA真核表达载体并鉴定。方法:根据大鼠delta阿片受体mRNA序列设计并体外合成短发卡RNA寡核苷酸片段,退火形成双链,克隆到线性化质粒pGenesil-1,然后进行酶切和测序鉴定。结果与结论:酶切证明delta阿片受体-短发卡RNA已经插入到质粒载体pGenesil-1里,测序结果证明均为插入正确的克隆质粒,而且质量均符合设计标准,证实靶向大鼠delta阿片受体基因的短发卡RNA真核表达载体构建成功。
胡松权王鹏杨辉
关键词：RNA干扰吗啡耐受疼痛
鞘内注射δ阿片受体特异性拮抗剂对慢性痛大鼠吗啡耐受的影响被引量：5
2012年
目的 :观察鞘内注射δ阿片受体特异性拮抗剂对吗啡耐受大鼠慢性疼痛的疼痛行为学的影响,探讨吗啡耐受机制。方法 :选择鞘内置管成功SD大鼠在成功建模后第10天随机分为8组并给药:骨癌痛+生理盐水对照组(BC组)、骨癌痛+吗啡组(BM组)、骨癌痛+呐曲吲哚+吗啡组(BN组)、骨癌痛+DPDPE(D-丙2-D-亮5-脑啡肽,[D-Pen2,D-Cl-Phe5]-enkephalin,δ受体特异性激动剂)+吗啡组(BD组)、SNI(spared nerve injury,坐骨神经分支选择性损伤模型)+生理盐水对照组(SC组)、SNI+吗啡组(SM组)、SNI+呐曲吲哚+吗啡组(SN组)、SNI+DPDPE+吗啡组(SD组)。BC组和SC组鞘内注射10μl生理盐水,BM组和SM组鞘内注射10μg/10μl吗啡,BN组和SN组鞘内注射10μg/10μl呐曲吲哚20 min后加注10μg/10μl吗啡,BD组和SD组鞘内注射1μg/10μl DPDPE 20min后加注10μg/10μl吗啡。SNI模型大鼠1天两次给药,骨癌痛模型大鼠1天3次给药,连续9天。采用von Frey丝分别于建模前(基础状态),建模后3、5、7、9 d(T3、T5、T7、T9),鞘内给药1、4、7、9 d(I1、I4、I7、I9)时测定术侧机械痛阈。骨癌痛模型大鼠连续9天鞘内注药后灌注取左右两侧胫骨,冰冻切片,HE染色,观察肿瘤生长及骨结构破坏情况。结果 :HE染色显示种植侧胫骨癌细胞大量生长,异型性明显,骨质大片缺损,骨癌痛模型建模成功。两种慢性疼痛模型中,给药前各组大鼠机械阈值皆明显降低形成痛觉过敏(P<0.05);给药过程中,各治疗组均有镇痛作用,其大鼠机械阈值均明显升高(P<0.05);在给药第7天及第9天,大鼠机械痛阈较治疗第1天相比明显降低(P<0.05)。骨癌痛模型中,与BN组相比,BM组在第9天其机械阈值明显降低(P<0.05)。在SNI模型,与SN组相比,SM组及SD组其机械阈值在给药的第7、9天皆明显降低。结论 :鞘内注射δ阿片受体特异性拮抗剂呐曲吲哚可以抑制或延缓吗啡耐受,δ阿片受体参与吗啡耐受形成。
陈鹤翔杨辉逄坤芳卜慧莲王鹏高峰廖志品田玉科
关键词：Δ阿片受体吗啡耐受慢性疼痛
胫骨癌痛大鼠脊髓背角5-羟色胺水平的变化被引量：2
2011年
目的评价胫骨癌痛大鼠脊髓背角5-羟色胺（5-HT）水平的变化。方法雌性SD大鼠60只，体重160～180g，采用随机数字表法，将其随机分为3组（n=20）：对照组（c组）、假手术组（s组）和胫骨癌痛组（P组）。C组不做任何处理；S组于右侧胫骨上段骨髓腔注射D．hank液10μl；P组于右侧胫骨上段骨髓腔接种Walker256大鼠乳腺癌细胞悬液10出制备胫骨癌痛模型。于接种前1d、接种后3、5、7、9、11、14、16、18和21d时测定机械痛阈。于接种前1d、接种后7、14和21d时，每组痛阈测定结束后随机处死大鼠4只，取脊髓组织，采用高效液相色谱法测定脊髓背角5-HT含量；接种后14d取接种侧胫骨组织，光镜下观察胫骨破坏情况。脊髓背角5-HT含量与机械痛阈进行直线相关分析。结果与C组和S组比较，P组接种后7～21d时机械痛阈降低，接种后7、14和21d时脊髓背角5-HT含量升高（P〈0．05），且5-HT含量与机械痛阈呈负相关（r=-0．973，P〈0．05）。C组和S组各时点机械痛阚和脊髓背角5-HT含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）。光镜下P组大鼠术侧胫骨骨质严重破坏。结论大鼠胫骨癌痛的形成与维持可能与脊髓背角5-HT水平升高有关。
刘希江曹菲卜慧莲高峰杨辉田玉科
关键词：血清素骨肿瘤脊髓
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