国家自然科学基金(30600318)
- 作品数：5 被引量：41H指数：4
- 相关作者：于荣吴忠义黄聪聪李学东孙丽更多>>
- 相关机构：首都师范大学北京市农林科学院农业生物技术研究中心中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植物气孔运动过程中的信号转导机制被引量：17
- 2006年
- 气孔运动的信号转导机制一直是科研工作者研究的一个热点,文章就光、CO2、ABA、H2O2、NO、蛋白激酶、蛋白磷酸酶等对保卫细胞气孔运动的影响,介绍气孔运动机制的研究进展。
- 孙丽吴忠义李学东于荣
- 关键词：保卫细胞气孔气孔运动信号转导
- 拟南芥保卫细胞微管骨架的重排参与NO诱导的气孔关闭被引量：6
- 2008年
- 以GFP:α-tubulin-6转基因拟南芥为材料,利用药理学实验及激光扫描共聚焦显微技术研究了微管骨架在NO诱导气孔关闭过程中的动态变化及其可能的调控机制.结果表明:(ⅰ)微管特异性抑制剂长春花碱和NO供体SNP均能诱导气孔关闭,并且长春花碱能加强SNP对气孔开度的抑制作用,而微管稳定剂紫杉醇则部分抑制了NO对气孔关闭的诱导作用;(ⅱ)开放气孔保卫细胞中,大量周质微管从保卫细胞的背壁向腹壁呈辐射状整齐规则地排布,并且几乎所有微管纤维都与保卫细胞腹壁成90°垂直;(ⅲ)同一条件下保卫细胞经外源NO供体SNP光下处理30min,保卫细胞内整齐的辐射状微管逐步散乱,微管部分解聚,纤维数量减少,部分交错扭曲,排布方式也由与腹壁垂直转变为倾斜,说明微管骨架可能参与了NO诱导的气孔关闭;(ⅳ)进一步研究发现,胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM可以大幅度削弱由NO诱导的气孔关闭作用,而对长春花碱诱导的气孔关闭无明显影响;开放气孔的保卫细胞经SNP处理后,再施加BAPTA-AM,散乱的微管骨架排布随处理时间延长逐步趋于正常,到30min时基本恢复成辐射状,与对照相比无明显区别,表明在NO对微管排布的调节机制中有Ca2+参与.综合以上结果推测,在NO调控的气孔运动中,NO可能是通过调节胞内Ca2+来促进微管骨架系统的重排,进而影响气孔的开关运动.
- 张永梅吴忠义王学臣于荣
- 关键词：NO微管骨架气孔运动CA^2+
- 高羊茅叶绿体表达载体构建及绿色荧光蛋白基因瞬时表达检测被引量：4
- 2009年
- 【目的】验证高羊茅叶绿体表达载体在高羊茅叶绿体中的瞬时表达情况,为今后在高羊茅叶绿体中稳定表达该载体,获得耐旱高羊茅的叶绿体转基因株系奠定基础。【方法】首先从高羊茅草叶绿体基因组中克隆16S/trnI-trnA/23S片段,作为定点整合同源片段。然后将耐旱相关基因酵母海藻糖合酶基因tps1与水稻叶绿体16SrRNA基因的强启动子Prrn、烟草叶绿体基因psbA的终止子构建表达盒(Prrn-tps1-TpsbA-ter),连同草丁膦抗性基因bar表达盒、卡那霉素抗性基因nptII和绿色荧光蛋白基因gfp构建的融和基因表达盒一起克隆到定点整合同源片段之间,构建高羊茅叶绿体的稳定表达载体gTKGB。通过基因枪轰击法将gTKGB转化到高羊茅幼嫩叶片中,用激光共聚焦扫描显微镜对GFP的表达情况进行检测分析。【结果】克隆的高羊茅叶绿体基因16S-trnI-trnA-23S在NCBI登录号为:DQ490947-DQ490950。构建的叶绿体表达载体gTKGB转化高羊茅幼嫩叶片,在叶绿体中有很好的GFP表达。【结论】高羊茅叶绿体表达载体gTKGB可用于高羊茅叶绿体转化。
- 赵彤于荣黄丛林王永勤张秀海吴忠义
- 关键词：高羊茅重叠延伸PCR法
- 植物微管结合蛋白的研究进展被引量：10
- 2008年
- 微管结合蛋白是一类能够特异地与微管结合,参与调节微管结构与功能的结合蛋白。目前已经鉴定出多种植物微管结合蛋白,并对其结构及功能进行了深入研究。本文综述了植物微管结合蛋白——剑蛋白、MAP65、MAPEB1、MOR1、SPR和WVD2的最新研究进展。
- 黄聪聪吴忠义陈洁于荣
- 关键词：SPR
- 保卫细胞微管骨架参与蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化调节的气孔运动被引量：4
- 2012年
- 【目的】探讨在气孔运动的信息传递通路中,保卫细胞微管骨架与蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化两种因素之间是否存在相互作用,进而深入了解气孔运动机理。【方法】以拟南芥野生型及GFP-α-tubulin-6植株为材料,利用药理学试验、激光共聚焦扫描显微镜观察、免疫印迹等细胞学及生物化学方法研究丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸化对保卫细胞气孔运动及微管骨架的影响。【结果】丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂星型孢菌素(staurosporine,STS)能促进光照下气孔开放,微管特异性抑制剂长春花碱(vinblastine)和微管稳定剂紫杉醇(taxol)分别减弱和增强其作用;1/2A型磷酸酶抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)、花萼海绵诱癌素A(calyculin A,CalA)抑制光照诱导的气孔开放,微管特异性药物长春花碱和紫杉醇又能分别增强和削弱该抑制作用。激光共聚焦扫描显微镜下观察,两种磷酸酶抑制剂OA和CalA处理后,正常开放气孔保卫细胞中整齐有序的辐射状微管数量显著减少,变为以交错网状及解聚态为主;蛋白激酶抑制剂STS处理则增加了辐射状微管的比例。微管特异性药物紫杉醇、长春花碱分别与以上3种抑制剂共同处理,同样能够在一定程度上改变其对保卫细胞微管骨架组织排布的影响。提取保卫细胞原生质体总蛋白进行免疫印迹检测,55 kD分子量处的微管蛋白发生明显的蛋白丝氨酸磷酸化。【结论】蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化可以通过调节保卫细胞微管骨架的动态排布进行气孔运动的信息传递。
- 叶子黄聪聪于荣
- 关键词：微管骨架丝氨酸气孔运动
