河北省科技厅指导计划项目(052761615)
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
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- 相关机构：河北医科大学第二医院河北省人民医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省科技厅指导计划项目更多>>
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- 三氧化二砷对淋巴瘤细胞酪氨酸磷酸酶1基因的去甲基化作用被引量：12
- 2009年
- 目的探讨淋巴瘤细胞系1、2和非霍奇金淋巴瘤（NHL）组织中酪氨酸磷酸酶1基因启动子区甲基化状态，三氧化二砷（As2O3）对T2细胞中SHP-1的去甲基化作用及对T2细胞生长增殖的生物学影响。方法以不同浓度As2O3处理淋巴瘤细胞株T2，采用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测T2细胞的生长变化，采用流式细胞术检测细胞凋亡率的变化，采用实时定量聚合酶链反应（FQPCR）和Westernblot方法检测T2细胞SHP-1基因mRNA和蛋白表达及c—kit蛋白表达变化。采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测T2细胞和32例NHL组织SHP-1基因启动子甲基化状态。结果As2O3使他细胞增殖受抑，凋亡增加，效应均具有时间和剂量依赖性。As2O3能逆转他细胞SHP-1基因启动子甲基化，SHP-1基因恢复表达，同时c-kit蛋白磷酸化水平降低。SHP-1基因在对照组淋巴组织中呈完全性非甲基化状态，而在NHL组织中启动子甲基化出现率为87．5％（28／32）。结论在淋巴瘤细胞和NHL组织中，SHP-1基因启动子区域存在高度甲基化。As2O3能逆转T2细胞DNA异常甲基化，诱导SHP-1基因表达，并可能通过抑制c-kit受体及其信号传导路径的活化，抑制肿瘤细胞增殖。
- 杨琳罗建民李燕刘小军温树鹏杜行严姚丽杨敬慈董作仁
- 关键词：淋巴瘤三氧化二砷甲基化C-KIT
- SHP-1与SOCS3基因在成人急性白血病中的表达及其与预后的关系
- 2009年
- 目的了解SHP-1基因和SOCS3基因在白血病细胞中的表达及其对预后的影响,为进一步阐明SHP-1和SOCS3基因在白血病发病中的作用机制打下基础。方法用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR方法分别对AL患者和13例正常对照的骨髓进行SHP-1、SOCS3 mRNA水平监测。结果①正常人SHP-1 mRNA均呈阳性表达,其表达水平为3.413±2.018,ALL患者SHP-1均为阴性表达;初治、复发AL组SHP-1表达水平明显低于正常对照组(P<0.01),缓解后SHP-1 mRNA水平上升但仍低于正常对照(P<0.01)。②初治和复发AL患者SOCS3 mRNA表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(P<0.05);缓解患者SOCS3 mRNA与正常对照相比无统计学意义(P>0.05)。③SHP-1表达阳性组缓解率(76.4%)明显高于表达阴性组(47.3%)(P<0.01)。结论SHP-1和SOCS3均参与白血病发病,但发病机制不同。SHP-1与白血病的疗效预后有关。
- 罗建民杨琳李燕刘小军温树鹏王福旭张敬宇张学军杜行严姚丽董作仁
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶细胞因子信号转导抑制因子3白血病
- 甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycytidine对K562细胞SHP-1基因表达及细胞增殖与凋亡的影响被引量：7
- 2009年
- 本研究探讨5-氮杂胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)对K562细胞中抑癌基因SHP-1的转录调控作用及对K562细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。采用MSP方法检测SHP-1基因甲基化状态,MTT法检测不同剂量(0.5,1,2μmol/L)5-aza-CdR作用K562细胞1,3,5天时对K562细胞存活率的影响,流式细胞术(FCM)分析5-aza-CdR作用1,3,5天时细胞周期及凋亡率的变化,实时定量PCR(FQ-PCR)和Westernblot方法检测5-aza-CdR处理前后SHP-1mRNA及蛋白表达水平、p-STAT5蛋白表达变化。结果表明,K562细胞中存在SHP-1基因的甲基化,5-aza-CdR作用使K562细胞中SHP-1mRNA和蛋白重新表达,而p-JAK2蛋白表达随之呈下降趋势;5-aza-CdR明显抑制K562细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关。JAK2特异性抑制剂AG490明显抑制K562细胞增殖;5-aza-CdR可使K562细胞凋亡率增加,且作用也呈时间依赖性,用药1,3,5天细胞凋亡率分别为9.3%,24.2%,37.7%。2μmol/L的5-aza-CdR处理24小时后,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期。5-aza-CdR作用1,3,5天时G2/M期细胞比例分别为30.7%,23.4%,19.3%。结论:特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使K562细胞中沉默的SHP-1基因重新表达,并可能通过JAK/STAT路径活化抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡。
- 罗建民李燕杨琳刘小军温树鹏王福旭张敬宇张学军董作仁
- 关键词：甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷K562细胞SHP-1基因
- 三氧化二砷对淋巴瘤T2细胞株SHP-1基因的去甲基化作用被引量：8
- 2009年
- 背景与目的:去甲基化作用可能是三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对抗造血系统恶性肿瘤的另一种机制。本研究探讨As2O3对淋巴瘤细胞系T2细胞中抑癌基因酪氨酸磷酸酶(SH2-containinphosphatase-1,SHP-1)的去甲基化作用及对T2细胞生长增殖的生物学影响。方法:T2细胞以As2O3或5-氮杂胞苷(5-aza-2'-deoxyoytidine,5-AC)单独处理,或两药联合处理。采用甲基化特异性PCR、荧光定量PCR和Western检测As2O3处理前后SHP-1基因启动子过甲基化及其mRNA和蛋白表达状况、c-kit蛋白表达变化。MTT法检测细胞存活率。流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:As2O3能逆转SHP-1基因启动子甲基化,使T2细胞SHP-1mRNA和蛋白重新表达,同时c-kit蛋白表达呈下降趋势;As2O3明显抑制T2细胞的增殖,随浓度增加及作用时间延长,其增殖抑制效应增加(P<0.05);2.5μmol/L浓度的As2O3作用T2细胞1,2,3d细胞增殖抑制率(9.8%,20.3%,47.5%)明显低于联合作用组(11.0%,36.7%,61.0%)。As2O3可使T2细胞凋亡率增加,且随作用时间延长和浓度增加,凋亡细胞逐渐增多(P<0.05),联合作用组细胞凋亡率(1d:17.3%;2d:37.9%;3d:67.9%)明显高于2.5μmol/LAs2O3单独作用组(6.1%,26.5%,50.9%)。结论:As2O3能去除T2细胞中SHP-1基因甲基化,使其重新表达,并可能通过抑制c-kit受体及其信号转导路径的活化而抑制肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡。
- 杨琳罗建民温树鹏刘小军杜行严李燕
- 关键词：淋巴瘤甲基化三氧化二砷
