重庆市自然科学基金(CSTC2011JJA0623)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用
- 2013年
- 目的:观察以pEGFP-N1为载体的促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中Ang2蛋白的表达,研究其对人胃癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用重组质粒转染反义Ang2的pEGFP-N1载体(pEGFP-N1-anti Ang2)、pEGFP-N1空载体质粒以脂质体转染法转染体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,应用RT-PCR技术与免疫组化法检测Ang2基因及其蛋白的表达,MTT法分析细胞生长抑制作用,AnnexinV-FITC和PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:RT-PCR与免疫组化均示pEGFP-N1-anti Ang2转染组无Ang2 mRNA及其Ang2蛋白的表达,MTT检测表明pEGFP-N1-anti Ang2转染组活细胞数较其它两组均低,差异有统计学意义(F=10.39,P=0.002 4),流式细胞仪检测则显示其凋亡率较其它两组明显增高,差异有统计学意义(χ2=3 188.98,P<0.000 1)。结论:pEGFP-N1-anti Ang2成功转染人胃癌细胞SGC-7901且可封闭Ang2 mRNA表达,使已转染pEGFP-N1-anti Ang2的人胃癌细胞Ang2蛋白的表达减少,并抑制人胃癌细胞的恶性表型。
- 陈雷朱鹏
- 关键词：促血管生成素2基因转染
