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国家自然科学基金(81173640)

作品数:9 被引量:35H指数:5
相关作者:姚立李晓亚卜夏威王璐彭彦更多>>
相关机构:浙江中医药大学浙江大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
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文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生

主题

  • 6篇ANG
  • 4篇纤维化
  • 4篇肝纤维化
  • 2篇细胞
  • 2篇肝纤维化大鼠
  • 2篇ROS
  • 2篇AT1R
  • 2篇C-
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白芯片
  • 1篇电镜
  • 1篇星状细胞
  • 1篇药理
  • 1篇药理学
  • 1篇射电
  • 1篇水平轴
  • 1篇体外
  • 1篇体外抑制
  • 1篇体外抑制作用
  • 1篇通过网络

机构

  • 8篇浙江中医药大...
  • 1篇浙江大学

作者

  • 8篇姚立
  • 2篇卜夏威
  • 2篇张云龙
  • 2篇王璐
  • 2篇李晓亚
  • 2篇彭彦
  • 1篇张敏
  • 1篇姚加
  • 1篇曹晓倩
  • 1篇董文珠
  • 1篇严超

传媒

  • 5篇浙江中医药大...
  • 1篇西北药学杂志
  • 1篇中药新药与临...
  • 1篇海峡药学
  • 1篇Chines...

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 2篇2018
  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2013
  • 1篇2012
9 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
合欢皮-白蒺藜药对对AngⅡ-ROS诱导下HSC-LX2细胞增殖及PKC/Nrf2/HO-1通路的影响被引量:6
2020年
[目的]探讨合欢皮-白蒺藜含药血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导产生的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)作用下人源性肝星状细胞HSC-LX2的增殖及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)/核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/血红素氧化酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)通路的影响。[方法]以HSC-LX2细胞为研究对象,先以AngⅡ诱导产生ROS,再以合欢皮-白蒺藜含药血清进行干预,MTT法检测HSC-LX2细胞的增殖情况,Western blot和Real-time PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、PKC、Nrf2、HO-1蛋白以及m RNA表达情况。[结果]MTT结果显示,与AngⅡ组比较,合欢皮-白蒺藜药对高、中、低剂量组均显著抑制HSC-LX2细胞增殖(均P<0.05)。Western blot结果显示,与AngⅡ组比较,合欢皮-白蒺藜药对高、中、低剂量组α-SMA蛋白表达减少(均P<0.001),低剂量组PKC蛋白表达减少(P<0.05),高、中剂量组Nrf2蛋白表达减少(P<0.001,P<0.01),高、中剂量组HO-1蛋白表达减少(P<0.001,P<0.001)。Real-time PCR结果显示,与AngⅡ组比较,合欢皮-白蒺藜药对高、中、低剂量组α-SMA mRNA表达减少(P<0.01,P<0.001,P<0.001),PKC mRNA表达减少(均P<0.001),Nrf2 mRNA表达减少(P<0.001,P<0.001,P<0.05),高、中剂量组HO-1 mRNA表达减少(均P<0.001)。[结论]HSC-LX2细胞经AngⅡ刺激后增殖活化明显,且α-SMA表达升高,此过程与PKC、Nrf2、HO-1蛋白的激活有关。合欢皮-白蒺藜可通过抑制HSC-LX2细胞增殖来阻止肝纤维化,其机制与抑制PKC、Nrf2、HO-1的表达有关。
陈杭萍董文珠曹晓倩姚立
关键词:ROS合欢皮白蒺藜
鳖甲煎丸对AngⅡ-ROS诱导下HSC-LX2细胞中PKC-Pyk2/SRC通路的影响被引量:4
2019年
[目的]探讨鳖甲煎丸含药血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱生的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)作用下HSC-LX2细胞中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)-富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)/SRC通路的影响。[方法]以人源肝星状细胞HSC-LX2为研究对象,以AngⅡ诱导产生ROS,再以鳖甲煎丸含药血清进行干预,以MTT法检测HSC-LX2细胞的增殖情况,荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS含量,Western blot检测PKC、Pyk2、SRC蛋白表达情况。[结果] MTT结果显示,与AngⅡ组比较,5%鳖甲煎丸含药血清培养24h后,鳖甲煎丸高、中剂量组显著抑制HSC-LX2细胞增殖(P<0.05,P<0.01);培养48h后,鳖甲煎丸高、中、低剂量组均能显著抑制HSC-LX2细胞增殖(P<0.05,P<0.05,P<0.01);培养72h后,中剂量组有显著抑制效果(P<0.01)。此外,除了15%中剂量鳖甲煎丸含药血清培养48h后有显著抑制效果(P<0.05),其余各组、各时间段均无明显抑制作用,差异无统计学意义(P>0.05)。荧光探针DCFH-DA结果显示,与空白对照组比较,AngⅡ组ROS产生明显增多,经鳖甲煎丸含药血清高、中剂量组干预后,ROS均不同程度减少。Western blot显示,鳖甲煎丸含药血清干预后,PKC(P<0.001,P<0.001,P<0.001)、Pyk2(P<0.05,P<0.001,P<0.001)、SRC(P<0.001,P<0.001,P<0.01)蛋白表达均受到显著抑制。[结论] HSC-LX2细胞经AngⅡ刺激后可以产生ROS,且细胞增殖明显,此过程与PKC、Pyk2、SRC蛋白的激活有关。鳖甲煎丸可通过减少ROS的产生来阻止HSC-LX2细胞的增殖,其机制与抑制PKC、Pyk2、SRC蛋白的表达有关。
曹晓倩董文珠王璐陈杭萍姚立
关键词:ROSPYK2SRC鳖甲煎丸
通过网络药理学和蛋白芯片研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的潜在机制
2023年
目的 通过网络药理学和蛋白芯片研究鳖甲煎口服液抗肝纤维化的潜在机制。方法 鳖甲煎口服液的化学成分、潜在靶点及肝纤维化相关基因均来自开放源数据库。然后,利用Autodock vina对目标蛋白和化合物进行分子对接。利用PyMOL对对接构象进行可视化。随后用蛋白芯片比较AngⅡ诱导的人肝星状细胞(HSC-LX2)和鳖甲煎口服液处理的HSC-LX2磷酸化蛋白(DEPs),以验证上述结果。结果 鳖甲煎口服液抗肝纤维化的网络药理学GO和KEGG通路富集分析结果表明,关键信号通路为PI3K/Akt、MAPK和Ras信号通路。分子对接的结论表明,活性物质(β-谷甾醇、槲皮素、山柰酚)对关键靶点(TNF、AKT1、IL6)具有较高的亲和力。同时网络药理学的结果与蛋白芯片的结果相吻合。结论 鳖甲煎口服液治疗肝纤维化主要抑制Ras信号通路的活性,进而抑制MAPK和PI3K/Akt信号通路,包括抑制TNF、AKT1和IL6。上述通路蛋白还与鳖甲煎口服液具有活血化瘀、软坚散结的作用有关。这些途径可作为肝纤维化的治疗靶点。
谢泽宇许一笑郑梦圆郑静茹姚立
关键词:肝纤维化网络药理学蛋白芯片
携带Lipocalin2基因的腺病毒对结肠癌细胞SW620的体外抑制作用被引量:1
2013年
目的探讨携带Lipocalin2基因的腺病毒对结肠癌SW620细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用。方法以不同浓度梯度的腺病毒作用于体外培养的结肠癌SW620细胞,通过MTT法检测腺病毒对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,透射电镜观察细胞凋亡时的超微形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 MTT实验显示携带Lipocalin2基因的腺病毒可抑制SW620细胞的生长,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,透射电镜下观察发现细胞体积缩小,细胞核固缩,核内染色质凝集,并附于一侧核膜的边缘,内质网扩张,空泡形成增多,出现明显的凋亡现象。流式细胞仪可检测到SW620细胞凋亡率明显增加,呈时间及浓度依赖性。结论携带Lipocalin2基因的腺病毒能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制SW620细胞的生长。
张云龙彭彦姚立
关键词:腺病毒流式细胞仪透射电镜
Balancing Effect of Biejiajian Oral Liquid(鳖甲煎口服液)on ACE-AngⅡ-AT1R Axis and ACE2-Ang-(1–7)-Mas Axis in Rats with CCl_4-Induced Hepatic Fibrosis被引量:14
2018年
Objective: To explore the effect of Biejiajian Oral Liquid(鳖甲煎口服液, BOL) on CCl4-induced hepatic fibrosis in rats by detecting the changes in the levels of angiotensinⅡ(AngⅡ), angiotensin-(1–7) [Ang-(1–7)], angiotensin-converting enzyme(ACE), ACE2, angiotensinⅡ type 1 receptor(AT1 R), Mas, etc. Methods: A total of 180 Wistar rats were randomly divided into two groups by random digital table method: prevention experiment and treatment experiment. Each group was further subdivided into the fol owing 6 subgroups: normal control group, model group, vitamin E [100 mg/(kg·d), VE] group, enalapril [10 mg/(kg·g), Ena] group, high-dosage [20 g/(kg·d)] BOL group, and low-dosage [10 g/(kg·d)] BOL group. The hepatic fibrosis rat model was established by subcutaneous injection of CCl4 for 6 weeks. Prevention experiment and treatment experiment were administered with specific drugs at different times. At the end of treatment experiment, the pathological changes of liver were observed after hematoxylin-eosin staining. The expressions of ingredients in renin-angiotensin-aldosterone system(RAAS) such as AngⅡ, Ang-(1–7), ACE, ACE2, AT1 R, Mas, renin, CYP11 B2 and angen in liver were detected by enzyme linked immunosorbent assay, immunohistochemistry method or reverse transcription-polymerase chain reaction, respectively. Results: The levels of AngⅡ and Ang-(1–7) at the 6 th week increased by 496.10% and 73.64%, respectively, compared with those at the 2 nd week in the model group(P<0.01). With prevention or treatment with high-dosage BOL, there was an evident reduction of AngⅡ level but an improvement of Ang-(1–7) level. Specifically, AngⅡ level of high-dosage group decreased by 77.50% in prevention experiment(P=0.000) and by 76.93% in treatment experiment(P=0.002) compared with that in the model group. Ang-(1–7) level increased by 91.69% in prevention experiment(P=0.006) and by 70.77% in the treatment experiment(P=0.010) compared with that in the model group. The expression levels of m RNA
LI Xiao-yaPENG YanBU Xia-weiYAO JiaYAO Li
关键词:水平轴
鳖甲煎口服液对肝纤维化大鼠AngⅡ、Ang(1-7)的影响被引量:5
2015年
[目的]研究鳖甲煎口服液(biejiajian oral liquid,BOL)对肝纤维化大鼠肝组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、血管紧张素(1-7)[angiotensin(1-7),Ang(1-7)]水平及两者比值的影响。[方法]将健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,BOL高、低剂量组,每组10只。模型组大鼠腹腔注射未灭活猪血清,每只0.5m L,每周2次,持续8周。其余各组大鼠腹腔注射同等剂量同周期生理盐水。模型成功后,BOL低剂量组大鼠给予BOL 10g·kg-1,BOL高剂量组大鼠给予BOL 20g·kg-1,空白组与模型组大鼠每日给予等量蒸馏水,连续灌胃给药5周。计算肝、脾指数,将肝组织进行HE及Masson染色,连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,放射免疫法测定血清细胞外基质成分含量,酶联免疫法测定肝组织AngⅡ、Ang(1-7)水平。[结果]与空白组比较,模型组肝脏胶原纤维增生、结构破坏,ALT、AST水平显著升高,细胞外基质成分含量均上升,AngⅡ、Ang(1-7)水平升高,AngⅡ/Ang(1-7)比值上调。BOL干预组与模型组比较,肝组织病理变化好转,血清ALT、AST、细胞外基质成分、AngⅡ水平均显著降低,Ang(1-7)水平进一步上升,AngⅡ/Ang(1-7)比值显著下降。[结论]BOL具有保护肝细胞,维护肝功能,抗肝纤维化的作用,其作用机制可能与上调Ang(1-7)水平、降低AngⅡ的水平及AngⅡ/Ang(1-7)比值有关。
卜夏威李晓亚姚立
关键词:肝纤维化
鳖甲煎口服液对肝纤维化大鼠ACE-AngⅡ-AT1R轴的影响被引量:7
2016年
[目的]研究鳖甲煎口服液(Biejiajian oral liquid,BOL)对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin converting enzyme-angiotensinⅡ-angiotensinⅡtype 1 receptor,ACE-AngⅡ-AT1R)轴的影响。[方法]将65只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、马来酸依那普利(enalapril malecate,Ena)组、BOL低、中、高剂量组,其中模型组15只,其余每组10只。除正常组外其余各组大鼠制备酒精性肝纤维化模型,造模结束后各组给予相应药物治疗4周。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察各组大鼠的肝纤维化状况,酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝组织中的AngⅡ的水平,以实时定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织中ACE、AT1R的mRNA表达。[结果]BOL各剂量组和Ena组的肝纤维化程度减轻,模型组肝组织中的AngⅡ含量和ACE、AT1R mRNA表达高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);BOL各剂量组和Ena组可以显著降低肝组织中的AngⅡ含量和ACE、AT1R mRNA的表达。[结论]AngⅡ含量和ACE、AT1R mRNA表达升高可能是大鼠酒精性肝纤维化发生机制之一,而BOL可以通过下调三者的表达对大鼠酒精性肝纤维化的发展起到抑制作用。
李晓亚卜夏威曹晓倩董文珠姚立
关键词:酒精性肝纤维化ACEAT1R
ESR法测定肝纤维化小鼠自由基的样品处理方法比较被引量:1
2012年
目的利用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)波谱仪检测肝纤维化过程中血清、血浆以及肝脏中分别产生的自由基信号,寻找检测自由基的样品前处理最佳方案。方法采用传统的四氯化碳法造模,造模1周后通过不同的处理方法,利用ESR检测小鼠肝脏、血清和血浆的自由基信号。结果通过利用ESR技术,在小鼠肝脏、血清及血浆中均检测到了自由基信号,并且在处死小鼠后加入电子捕获剂(DMPO)所测得的自由基信号更加明显。结论通过以上对比发现,样品加DMPO的生理盐水组测出的自由基信号相较于其他处理方法而言更为明显。
张云龙彭彦严超姚加姚立
关键词:肝纤维化
AngⅡ-ROS-PKC/Nrf2/HO-1通路调控LX-2细胞增殖的机制研究被引量:6
2018年
[目的]研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对体外培养的LX-2细胞增殖的影响,并探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)/核因子相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/血红素氧化酶(hemeoxygenase-1,HO-1)通路在其中的作用。[方法]采用MTT法检测不同浓度AngⅡ作用不同时间对LX-2细胞增殖的影响,流式细胞术检测AngⅡ刺激后不同时间点LX-2细胞的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)表达水平,Western blot技术检测PKC、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。[结果]与正常组比较,当AngⅡ浓度为10-5mol·L-1时,LX-2细胞增殖有统计学差异(P<0.01)。与正常组比较,以10-5mol·L-1的AngⅡ刺激LX-2细胞0.5、24h时,细胞增殖有统计学差异(P<0.05),ROS表达显著增加(P<0.05)。Western blot提示,与正常组比较,10-5mol·L-1的AngⅡ刺激LX-2细胞2、24h后,PKC蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01);刺激细胞2、12、24h后,Nrf2蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001);刺激细胞24h后,HO-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。[结论]AngⅡ刺激LX-2细胞后,早期即可产生ROS,促进细胞增殖,并迅速激活PKC,进而诱导Nrf2从复合物解离并移位入核,激发HO-1的表达,启动了细胞自身潜在的抗氧化作用。
董文珠曹晓倩王璐陈杭萍董叶娇方佳敏张敏惠慧姚立
关键词:肝星状细胞
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