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国家自然科学基金(81173637): 作品数：9 被引量：40H指数：3; 相关作者：陈恬王永洪周洁代富英李学东更多>>; 相关机构：成都医学院四川大学山西农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金四川省青年科技基金更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>

Ⅰ型单纯疱疹病毒UL12基因在大肠杆菌BL21和Rosetta菌中的差异表达被引量：5: 2012年; 目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的UL12基因原核重组表达质粒pET32a-UL12,比较重组表达质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coli Rosetta表达产量与生物学活性。方法使用PCR的方法扩增出HSV-1的UL12基因,克隆至原核表达质粒pET32a(+),构建出重组质粒pET32a-UL12,分别转化E.coli BL21和E.coli Rosetta菌。经SDS-PAGE鉴定分析目的蛋白的表达差异,并比较在两种菌中目的蛋白的活性。结果重组质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coliRosetta的包涵体中均表达出了碱性核酸酶融合蛋白,E.coli Rosetta中表达的碱性核酸酶融合蛋白表达量较大,而E.coliBL21中表达的碱性核酸酶活性更高。结论成功构建了表达出了具有较高活性的HSV-1碱性核酸酶融合蛋白,为进一步研究抗HSV-1药物奠定了基础。; 陈恬李学东代富英张磊赖升凤余小平曹康; 关键词：克隆原核表达生物学活性

HSV-1碱性脱氧核糖核酸酶在毕赤酵母中的表达、纯化和活性鉴定: 目的在毕赤酵母中表达HSV-1复制的关键酶——碱性脱氧核糖核酸酶（alkaline deoxyribonuclease,AN）,检测其核酸外切酶活性,从而进一步研究AN的抑制剂。方法以GenBank发表的HSV-1的17...; 胡金陈恬张文秋张燕王永洪兰婉莹; 关键词：HSV-1 毕赤酵母酶活性; 文献传递

2002—2011年国家自然科学基金资助中药学项目统计分析被引量：2: 2012年; 2002年，国务院办公厅转发了由国家科技部、国家计划委员会等8部门联合制定的《中药现代化发展纲要（2002-2010年）》，第一次从国家政策高度提出中药现代化的重大命题。2007年，科技部、国家自然科学基金委员会（以下简称自然科学基金委）等16部门联合颁布了《中医药创新发展规划纲要（2006-2020年）》，进一步强调创新在中药发展中的作用。两个文件的颁布实施，极大的推动了我国中医药现代化研究进程。; 彭云王苗陈恬王伦安黄涛; 关键词：中药学统计分析基金资助中医药现代化国家科技部

黄连水提物对小鼠白色念珠菌性阴道炎的影响被引量：6: 2016年; 目的探讨黄连水提物对小鼠白色念珠菌性阴道炎的治疗作用。方法采用微量肉汤稀释法测定黄连水提物对白色念珠菌的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,通过病理组织切片观察黄连水提物对阴道黏膜刺激的病理变化;构建小鼠白色念珠菌性阴道炎模型,对黄连水提物治疗的模型小鼠阴道内的白色念珠菌菌落进行计数,观察黄连水提物对阴道组织及模型小鼠阴道炎病程的影响。结果黄连水提物对白色念珠菌有较好的体外抑菌活性,MIC为0.94～3.75 mg/m L;病理切片结果显示,与空白组比较,20～80 mg/m L的黄连水提物对小鼠阴道黏膜无明显局部刺激,100 mg/m L黄连水提物对小鼠局部黏膜刺激明显;与阴性对照组比较,高、中剂量的黄连水提物能明显减少模型小鼠的阴道分泌物菌落数（P〈0.01）,且可明显缩短模型小鼠的病程（P〈0.01）;低剂量的小鼠阴道内菌落数减少较明显（P〈0.05）,病程缩短较明显（P〈0.05）。结论黄连水提物对白色念珠菌有较强的体外抑菌活性,对白色念珠菌性阴道炎模型小鼠有良好的治疗作用。; 吕益飞谭予钒杨贵蓉王永洪兰婉莹周洁陈恬; 关键词：黄连小鼠白色念珠菌阴道炎阴道黏膜

HSV-1碱性脱氧核糖核酸酶AN在毕赤酵母中的表达、纯化和活性鉴定: 2016年; 目的在毕赤酵母中表达HSV-1复制的关键酶——碱性脱氧核糖核酸酶(alkaline deoxyribonuclease,AN),检测其核酸外切酶活性,从而进一步研究AN的抑制剂。方法以Gen Bank发表的HSV-1的17株UL12基因为模板,在不改变UL12氨基酸序列的情况下选择毕赤酵母偏好密码子,设计合成新的基因UL12-2,定向克隆进毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经酶切和测序鉴定证明重组载体构建成功。线性化的重组载体p PIC9K-UL12-2,电转化至毕赤酵母菌GS115,用组氨酸缺陷平板选择His+转化子,并进行表型测定,筛选出高抗性转化子。采取甲醇诱导表达,对诱导表达96h的上清进行离子交换层析,SDS-PAGE检测经纯化的AN,并对AN进行核酸外切酶活性检测。结果重组质粒p PIC9K-UL12-2在GS115中成功分泌表达,表达产物纯化后经SDS-PAGE检测可见目的蛋白条带,目的蛋白显示出核酸外切酶活性。结论毕赤酵母成功表达了具有核酸外切酶活性的碱性核酸酶AN,为抗HSV-1新药的研发奠定了基础。; 胡金陈恬张文秋张燕王永洪兰婉莹; 关键词：HSV-1 AN 毕赤酵母

1株产琼脂酶细菌的分离鉴定及其胞外酶活性测定: 2014年; 从四川省成都市青城山采集土壤,以琼脂作为唯一碳源,筛选到产琼脂酶细菌CMCK136;通过形态观察、生化鉴定、16S r DNA测序及序列分析鉴定其种属;随后测定了菌株CMCK136的胞外酶活性。菌株CMCK136被鉴定为芽胞杆菌属细菌,命名为Bacillus sp.CMCK136。菌株CMCK136的胞外琼脂酶的最适酸碱度为p H 7.0,最适温度为35℃。菌株CMCK136是产琼脂酶细菌家族的新成员,该菌株的发现进一步提示芽胞杆菌属很可能蕴含有尚待开发的琼脂酶资源。; 殷建华邓雪柯代富英陈恬; 关键词：土壤细菌

喜树碱通过抑制HSV-1复制相关基因的表达发挥抗HSV-1作用被引量：2: 2018年; 目的探讨喜树碱体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的作用及其机制。方法不同浓度的喜树碱作用于HSV-1感染的Vero细胞后,采用细胞病变(cytopathologic effects,CPE)法评价喜树碱体外抗HSV-1的作用,计算喜树碱半数毒性浓度(TC_(50))、病毒半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测喜树碱对HSV-1相关基因m RNA表达的影响。结果喜树碱的TC_(50)为2 153.44 nmol/L,IC_(50)为43.01 nmol/L,TI为50.07。RT-qPCR结果显示,喜树碱能明显抑制HSV-1 UL12、UL42、UL54、TK基因的表达,其抑制作用与喜树碱浓度呈剂量依赖关系。结论喜树碱具有明显抗HSV-1的作用,能抑制HSV-1 UL12、UL42、UL54、TK基因的转录。; 周洁钟鹏禹许群芬陈恬李祖锐崔家旗张倩; 关键词：喜树碱抗病毒活性实时荧光定量PCR TK

甘草酸体外抗人巨细胞病毒AD169的作用被引量：19: 2016年; 目的探讨甘草酸体外抗人巨细胞病毒AD169的作用。方法人胚肺成纤维细胞感染人巨细胞病毒后,用细胞病变法(CPE)评价甘草酸的抗病毒作用。并计算甘草酸的半数中毒浓度(TC_(50)),病毒半数抑制浓度(IC_(50))以及治疗指数(TI),并与更昔洛韦抗病毒作用相比较。结果甘草酸的TC_(50)为7.65 mg/m L,IC_(50)为311.55 mg/L,TI为24.55;更昔洛韦的TC_(50)为0.98 mg/m L,IC_(50)为44.15 mg/L,TI为22.20。结论甘草酸的TC_(50)比更昔洛韦的TC_(50)高出将近8倍,其治疗指数也优于更昔洛韦,故甘草酸具有较好的抗人巨细胞病毒应用前景。; 王永洪兰婉莹陈恬; 关键词：甘草酸抗病毒活性

中草药抗巨细胞病毒作用的研究进展被引量：3: 2014年; 巨细胞病毒是一种可在多种组织潜伏感染的疱疹病毒,常引起宫内和产后感染,导致胎儿先天畸形或死亡。此外,免疫力低下者感染巨细胞病毒会引起多器官损害。目前国内外对中草药抗巨细胞病毒作用的研究主要集中在复方制剂、中草药粗提物以及单体成分的作用和作用机制的研究上,取得了一些研究成果,本文就此综述了近年的相关研究进展。; 陈恬兰婉莹王永洪袁溯阳谭予钒吕益飞; 关键词：巨细胞病毒中草药抗病毒作用

抗EV713C蛋白酶活性中草药单体的虚拟筛选被引量：3: 2019年; 目的通过虚拟筛选寻找抑制肠道病毒71型(EV71)3C蛋白酶活性的中药单体化合物。方法从TCM Database@Taiwan数据库下载抗病毒中药的1998个化合物作为筛选对象,以EV71 3C蛋白酶为药物靶点,利用Auto Dock Vina进行分子对接,模拟中草药单体与EV71 3C蛋白酶的结合,根据结合自由能大小对中药单体进行排序;使用Discovery Studio2018 Visualizer对得分≤-37.673 kJ/mol的中草药单体与EV71 3C蛋白酶进行相互作用分析,观察其结合模式。结果虚拟筛选得到2个与EV71 3C蛋白酶结合较好的中药单体,分别是原花青素B5(procyanidin B5)和1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1,2,3,6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose)。结论从传统中药中筛选出抗EV71 3C蛋白酶的候选中药单体,为体外抗EV71实验研究提供参考。; 张倩陈恬李祖锐潘渠曹康; 关键词：肠道病毒71型分子对接

国家自然科学基金(81173637)

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