湖南省教育厅科研基金(01C191)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸降低乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶活性被引量：2
- 2006年
- 目的:已经发现随着细胞内胆固醇酯的积聚,脂肪分化相关蛋白的表达明显增加。本文进一步探讨脂肪分化相关蛋白干预细胞内胆固醇代谢的作用位点。方法:Ox-LDL组为80mg/L氧化低密度脂蛋白与C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,Ox-LDL+antisense组另加1mmol/L脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸,在不同的时点取样,共观察4d。使用荧光分光光度计观察细胞内胆固醇酯的改变;使用脂肪分化相关蛋白抗体间标法结合流式细胞术,观察脂肪分化相关蛋白表达量的变化;使用Ox-r[CL-3H]LDL和液体闪烁计数器观察细胞对氧化低密度脂蛋白摄入量的变化,并同时测定乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性。结果:72h后,Ox-LDL+antisense组细胞内胆固醇酯(19.9±1.9)mg/gprotein显著低于Ox-LDL组(46.6±3.4)mg/gprotein。4d观察期间,脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量两组细胞都增加,从12h时点开始,Ox-LDL组大于Ox-LDL+antisense组,在4d时点,Ox-LDL组明显高于Ox-LDL+antisense组。两组细胞摄入Ox-r[CL-3H]LDL的量逐渐增加,但是,Ox-LDL+antisense组摄入量从1d后明显低于Ox-LDL组,在2d和4d时点,两组差别仍有显著性。乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性从6h到2d表现为增加,在2d时点,两组比较差别显著,Ox-LDL+antisense组的活性明显低于Ox-LDL组。但从2d到4d,乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性稳定。ACAT的活性与脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量相关分析表明,Ox-LDL组R2=0.6176(P<0.05),Ox-LDL+antisense组R2=0.8212(P<0.05)。结论:抑制脂肪分化相关蛋白表达能引起细胞摄入外源性脂蛋白减少和乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性降低,提示脂肪分化相关蛋白与脂滴的代谢功能密切相关,且乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶有可能是其潜在的位点。
- 袁中华杨永宗尹卫东易光辉唐朝克唐显庆万载阳吴孟津
- 关键词：酰基辅酶A
- 脂肪分化相关蛋白在兔动脉粥样硬化模型中的表达被引量：3
- 2004年
- 研究脂肪分化相关蛋白与动脉粥样硬化发生和发展的关系。使用高胆固醇饲料喂养新西兰白兔 12周 ,复制动脉粥样硬化模型。用生物化学法测定血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇含量 ;苏丹Ⅳ染色观察主动脉斑块面积 ;HE染色观察主动脉及肝脏的病变 ;免疫组织化学法观察脂肪分化相关蛋白在主动脉病变区及肝脏中的表达。结果发现 ,喂高胆固醇饲料的动物血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇含量显著升高 ,主动脉病变面积为 4 0 .1%± 7.3% ,脂肪分化相关蛋白在主动脉动脉粥样硬化病变区免疫组织化学染色呈强阳性 ,在肝脏中染色呈阴性。喂高胆固醇饲料能成功复制出兔动脉粥样硬化模型。脂肪分化相关蛋白在兔动脉粥样硬化病变中表达明显增高 。
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- 关键词：病理学与病理生理学免疫组织化学法脂肪分化相关蛋白动脉粥样硬化疾病模型
- 脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸抑制细胞内胆固醇积聚及其在动脉粥样硬化中的改变被引量：4
- 2005年
- 目的:研究ADRP与As发生和发展的关系。方法:使用80mg/LOx -LDL和/或1mmol/L反义ADRP寡核苷酸与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育72h。测定细胞内胆固醇酯;油红O染色显示细胞内中性脂质;RT -PCR和Westernblotting观察反义寡核苷酸对ADRP表达的影响。高胆固醇饲料喂养新西兰白兔12周,复制As模型。测定血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇;苏丹Ⅳ染色显示主动脉病变面积;HE染色观察主动脉及肝脏的病变;免疫组织化学方法显示ADRP在主动脉病变区及肝脏中的表达。结果:反义ADRP寡核苷酸使细胞内胆固醇酯由(46. 6±3 .4 )mg/gprotein下降到(19. 9±1 .9)mg/gprotein ,细胞内中性脂质明显减少,ADRP基因和蛋白的表达显著下降。喂高胆固醇饲料的动物血清TC、LDL -C、TG及动脉壁胆固醇显著升高,主动脉病变面积为(40 . 1±7 .3) % ,ADRP在主动脉病变区免疫组织化学染色强阳性,在肝脏中染色阴性。结论:反义ADRP寡核苷酸能够明显抑制由氧化低密度脂蛋白引起的小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯的聚集。ADRP在兔As病变中表达明显增高。提示高表达ADRP促使As发生和发展。
- 袁中华杨永宗尹卫东唐显庆易光辉杨保堂万载阳
- 关键词：动脉硬化巨噬细胞
