福建省教育厅科技项目(JA04260)
- 作品数：7 被引量：30H指数：4
- 相关作者：谢晓兰陈清西黄乾生潘小芳朴顺金更多>>
- 相关机构：泉州师范学院厦门大学更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 醋酸酐对太平洋白对虾(Penaeus vannamei)β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶的抑制动力学(英文)
- 2006年
- β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶与太平洋白对虾的食物消化吸收、蜕壳生长有着密切关系.海水里存在的有机污染物将影响酶生理功能,从而进一步影响虾的正常蜕壳,严重将导致对虾的死亡.醋酸酐是常用的有机溶剂,故本文应用动力学方法研究醋酸酐对太平洋白对虾β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶催化pNP-NAG水解时酶活力的变化规律.表明在醋酸酐浓度低于20.0mmol/L,酶的抑制作用是可逆的,测得醋酸酐对酶抑制的IC50为9.0mmol/L.用双倒数作图法测定醋酸酐与游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的结合平衡常数.结果显示,醋酸酐是酶的非竞争性抑制剂.用底物反应动力学方法观测在不同底物浓度下酶在0.0、3.0、6.0、9.0、12.0mmol/L的醋酸酐溶液中的失活过程,分别测定了酶的微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0,结果表明醋酸酐对酶的影响是快速结合再缓慢失活的过程.比较微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0,结果显示,在高浓度的醋酸酐溶液中,酶将完全失活.
- 谢晓兰黄乾生韩鹏石艳陈清西
- 关键词：动力学醋酸酐
- 不同生长期凡纳滨对虾肝胰腺NAGase的基本性质变化被引量：15
- 2006年
- 凡纳滨对虾[Lifopenaeusvannamei（Boune1931）]N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（β-N—acetyl-D-glucosaminidase，简称NAGase。EC3．2．1．52）与周期性蜕壳和生长密切相关．我们研究了凡纳滨对虾肝胰腺中该酶的活力与部分性质在不同生长期的变化，结果表明：在不同生长期该酶活力有较大的变化，幼体虾的酶活力为每mg蛋白40U，随着虾的生长，酶活力迅速下降，当养殖到第6周时，酶活力下降到每mg蛋白18U，达到最低点．随后，酶活力随着虾的长大快速增大，当养殖到成虾时，酶活力达到最高值，为每mg蛋白58U，不同生长期的酶，其最适pH均在5．5～6．0之间，最适温度由原来的34℃改变为37℃，同时测定不同生长期酶的动力学参数（Km、Vm）、酶促反应活化能（En）及对Cu^2＋、Zn^2＋和Hg^2＋的敏感性并进行了相应的比较．
- 黄乾生谢晓兰石艳朴顺金陈清西
- 关键词：凡纳滨对虾N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶
- 不同养殖期的凡纳滨对虾外壳膜NAGase基本性质比较被引量：11
- 2006年
- 以不同生长期的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannam ei)的外壳为材料,分离提取外壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,NAGase),测定分析不同生长期的外壳膜NAGase的酶比活力及其性质的变化.结果表明:不同生长期的酶活力、最适温度、催化反应的动力学参数(Km、vm)、活化能等均存在差异.不同生长期酶的最适pH均为5.5.不同生长期的对虾外壳膜NAGase对Cu2+、Zn2+和Hg2+的敏感性也不同.Cu2+对养殖8周对虾外壳膜NAGase的激活作用最为显著,可以使酶活力提高到400%.Zn2+对不同生长期的酶活力均有抑制作用,但对成体对虾酶抑制作用最为显著,可以使酶活力下降80%.Hg2+对各个生长期的酶活力影响效果也不一样,当浓度为0.1 mmol/dm3时,仅对养殖6、8、9周的对虾的酶有激活作用,当Hg2+浓度为1.0mmol/dm3时,五个生长期的虾皮NAGase活力均受到不同程度抑制.
- 朴顺金谢晓兰黄乾生谢进金陈清西
- 关键词：海洋生物凡纳滨对虾N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶
- 有机溶剂对黄粉虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响被引量：3
- 2006年
- 以黄粉虫为材料,以N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)为研究对象.考察了几种有机溶剂对NAGase活力的影响.结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、乙二醇和丙三醇对NAGase的作用均表现为低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高,激活作用减弱并速转为抑制作用;N,N—二甲基甲酰胺(DMF)和二氧六环对酶的抑制作用呈现明显的浓度效应,随浓度增大酶活力迅速下降.进一步研究二氧六环的抑制作用动力学,结果表明:二氧六环对酶的抑制作用是可逆过程,抑制类型都表现为混合型抑制.测得二氧六环对游离酶的抑制常数K I为8.1%,对酶-底物络合物的抑制常数K IS为30.0%.
- 潘小芳谢晓兰徐海金赖志青
- 关键词：黄粉虫有机溶剂酶活力
- 巯基乙醇对黄粉虫NAGase活力的影响被引量：4
- 2006年
- 以黄粉虫幼虫为材料,采用0.05 mol/L pH 7.5 Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级分离提取N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52),获得比活力1025 u/mg的酶制剂.研究NAGase催化pNP-NAG水解反应的动力学参数,测得米氏常数Km=0.384 mmol/L,探讨巯基乙醇对该酶活力的影响.结果表明,巯基乙醇对该酶活力具有显著的抑制作用,其抑制作用显示可逆过程,研究巯基乙醇对该酶的抑制类型,显示其抑制效应为混合型,KI和KIS分别为1.9%和9.6%.
- 谢晓兰潘小芳刘小强
- 关键词：黄粉虫N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶巯基乙醇
- 氨基酸对凡纳滨对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响被引量：8
- 2006年
- 选用甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)及精氨酸(Arg)等18种氨基酸为效应物,研究它们对凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶催化pNP-NAG水解反应的影响。结果表明,非极性氨基酸及不带电荷的极性氨基酸对NAGase没有明显的抑制作用;带正电荷的碱性氨基酸L-His及Lys有轻微的激活作用,而Arg则先激活后抑制;带负电荷的酸性氨基酸Asp及Glu有明显的抑制作用,其IC50分别为20,28mmol/L。研究Asp,Glu对酶催化pNP-NAG水解反应的抑制作用机理,并测定其抑制常数。研究表明Asp及Glu的抑制作用均表现为可逆效应,抑制类型均为竞争性抑制,其抑制常数KI值分别为9.50mmol/L和11.06mmol/L。
- 谢晓兰王悦陈清西
- 关键词：N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶氨基酸
- 几种单糖对黄粉虫NAGase活力的影响被引量：4
- 2006年
- 以素有“动物营养宝库”之称的高蛋白昆虫-黄粉虫为材料,以N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)为研究对象.采用0.05 mol/L pH7.5Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级分离沉淀从黄粉虫体内获得NAGase粗酶制剂.研究葡萄糖(glu)、半乳糖(gal)、果糖(fru)对NAGase催化水解对硝基苯-N-乙酰氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)活力的影响,结果表明,glu、gal、fru对该酶均有抑制作用,抑制强弱次序为:gal>glu>fru.gal对该酶的抑制作用表现为反竞争型,其抑制常数KIS为226 mmol/L;而glu对酶的作用表现为竞争型抑制,抑制常数KI为338mmol/L.
- 潘小芳辛碧芬谢晓兰齐娟赖志青
- 关键词：黄粉虫N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶单糖
